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廣西嘉安健達(dá)二代測序流程

來源: 發(fā)布時間:2024-12-21

二代測序—全外顯子測序的應(yīng)用領(lǐng)域

醫(yī)學(xué)領(lǐng)域:1、疾病診斷:用于診斷各種遺傳性疾病,包括單基因遺傳?。ㄈ缒倚岳w維化、杜氏肌營養(yǎng)不良等)和復(fù)雜疾?。ㄈ?*、心血管疾病等)。在**研究中,通過對**組織和正常組織進(jìn)行全外顯子測序,可以發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞中的體細(xì)胞突變,這些突變可能是導(dǎo)致**發(fā)生、發(fā)展的關(guān)鍵因素,有助于醫(yī)生制定個性化的治療方案。2、藥物研發(fā):幫助研究人員了解藥物靶點的基因變異情況。例如,如果發(fā)現(xiàn)某些患者的藥物靶點基因外顯子區(qū)域存在突變,可能會影響藥物的療效,從而可以針對性地開發(fā)新的藥物或者調(diào)整藥物的使用劑量和方式。

遺傳學(xué)研究:用于研究人類群體的遺傳多樣性,通過對不同人群的外顯子測序,可以發(fā)現(xiàn)不同人群之間的基因差異,這些差異可能與人群的適應(yīng)性、易感性等有關(guān)。還可以用于追蹤基因的進(jìn)化歷程,了解基因在進(jìn)化過程中的變化情況。 二代測序是基于PCR和基因芯片發(fā)展而來的DNA測序技術(shù)。廣西嘉安健達(dá)二代測序流程

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二代測序技術(shù)的一些***研究進(jìn)展②

植物基因組學(xué)研究領(lǐng)域 :

花生四倍體野生種基因組測序:河南農(nóng)業(yè)大學(xué)殷冬梅教授團(tuán)隊和上海交通大學(xué)韋朝春教授團(tuán)隊聯(lián)合發(fā)布了花生四倍體野生種近乎完整基因組 amon2.0 版本。該研究結(jié)合 ONT 超長讀段、二代測序和 Hi-C 等多種測序技術(shù),使基因組的連續(xù)性、完整性和準(zhǔn)確性都得到了顯著提高,為花生的遺傳馴化和分子育種提供了重要的基因組數(shù)據(jù)信息資源。

長雄野生稻基因組解析:中科院昆明動物所王文研究組與云南省農(nóng)科院糧食作物研究所胡鳳益研究組等中外機(jī)構(gòu)合作,利用二代測序技術(shù)成功組裝出高質(zhì)量的長雄野生稻基因組,并對其與近緣物種的分歧時間、基因的收縮擴(kuò)張等進(jìn)行了分析,還鑒定出一批可能影響地下莖以及自交不親和性狀的候選基因及代謝途徑,為解析相關(guān)分子機(jī)制提供了重要線索。 河南嘉安健達(dá)二代測序提供二代測序包括全基因組測序和全外顯子測序。

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二代測序技術(shù)在不同人群中的準(zhǔn)確性有何差異③

孕婦及胎兒

優(yōu)勢:無創(chuàng)產(chǎn)前篩查(NIPT)是二代測序技術(shù)用于孕期胎兒常見染色體非整倍體篩查的應(yīng)用,對于唐氏綜合征、18-三體綜合征、13-三體綜合征等染色體異常疾病的檢測準(zhǔn)確率分別能達(dá)到95%、85%、75%以上,明顯高于傳統(tǒng)血清學(xué)篩查。

局限性:孕婦外周血中胎兒游離DNA來源于胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞,可能與胎兒實際情況不一致,導(dǎo)致假陽性。母親若合并免疫疾病、凝血功能障礙等,會使外周血中游離DNA含量過高,掩蓋胎兒來源的游離DNA,造成假陰性510.

二代測序的建庫步驟④

四、接頭連接

接頭選擇:根據(jù)測序平臺的要求選擇合適的接頭。不同的二代測序平臺(如Illumina、IonTorrent等)有各自特定設(shè)計的接頭。這些接頭包含與測序平臺的流動池(flowcell)表面互補(bǔ)的序列,用于將DNA片段固定在測序芯片上,還包含用于區(qū)分不同樣本的索引序列(index)等。

連接反應(yīng):使用DNA連接酶將接頭與DNA片段連接。T4DNA連接酶是常用的連接酶,它可以在ATP(三磷酸腺苷)存在下,將接頭的5'-磷酸基團(tuán)與DNA片段的3'-羥基形成磷酸二酯鍵,從而將接頭連接到DNA片段的兩端。連接反應(yīng)的條件(如溫度、連接酶的用量、反應(yīng)時間等)需要根據(jù)具體的實驗要求進(jìn)行優(yōu)化,以確保較高的連接效率。 高通量測序是二代測序嗎?

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什么樣本可以做二代測序?④

4、口腔樣本

口腔拭子:通過刮取口腔黏膜細(xì)胞來獲取樣本??谇皇米硬杉奖?、無創(chuàng),可用于DNA提取和基因檢測。例如,在法醫(yī)鑒定中,口腔拭子是常用的樣本來源,用于個體身份識別和親子關(guān)系鑒定等;在一些大規(guī)模的人群基因篩查項目中,也可以使用口腔拭子來收集樣本。

5、糞便樣本

糞便中含有腸道微生物、腸道上皮細(xì)胞等成分。對糞便樣本進(jìn)行宏基因組測序,可以研究腸道微生物群落的組成、功能和多樣性。例如,在腸道疾病(如炎癥性腸病、結(jié)直腸*等)的研究中,分析糞便中微生物群落結(jié)構(gòu)的變化,以及微生物基因的表達(dá)情況,有助于了解疾病的發(fā)病機(jī)制和尋找潛在的生物標(biāo)志物。 二代測序通量大,可以產(chǎn)生上G的reads.靜安區(qū)哪里有二代測序技術(shù)

二代測序的過程有哪些?廣西嘉安健達(dá)二代測序流程

二代測序——甲基化的作用和檢測方法有哪些?

作用

基因表達(dá)調(diào)控:DNA 甲基化通常與基因沉默有關(guān)。例如,在**發(fā)生過程中,某些抑*基因的啟動子區(qū)域(調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄起始的 DNA 序列)可能會發(fā)生高甲基化,導(dǎo)致這些基因無法正常表達(dá),從而失去對腫瘤細(xì)胞生長的抑制作用。

發(fā)育調(diào)控:在胚胎發(fā)育過程中,DNA 甲基化模式的動態(tài)變化對于細(xì)胞分化和組織***形成至關(guān)重要。不同的細(xì)胞類型具有特定的 DNA 甲基化圖譜,這些圖譜引導(dǎo)細(xì)胞向特定的方向分化。

檢測方法

亞硫酸鹽測序法:這是一種能夠精確檢測 DNA 甲基化狀態(tài)的方法。其原理是利用亞硫酸鹽處理 DNA,未甲基化的胞嘧啶會被轉(zhuǎn)化為尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶則保持不變。經(jīng)過 PCR 擴(kuò)增和測序后,可以區(qū)分甲基化和未甲基化的位點。 廣西嘉安健達(dá)二代測序流程

標(biāo)簽: 二代測序