一些儀器具有多種光源供選擇:紫外光、可見光和甚至紅外光(780nm至3,000nm)。鎢燈和鹵素?zé)粢话阒桓采w可見光部分(大約380nm到800nm)。而氙燈則可以覆蓋紫外光和可見光區(qū)域。分光光度計(jì)的帶寬很大程度上依賴于單色儀的狹縫的寬度??梢酝渡涑鰧?shí)驗(yàn)精確要求的光譜。一種嚴(yán)格帶寬使得儀器能對(duì)復(fù)雜的混合物進(jìn)行高分辨率的吸光測(cè)量??勺兊膯紊珒x的狹縫寬度能使一臺(tái)分光光度計(jì)滿足多種實(shí)驗(yàn)需要。為了測(cè)量吸光值,分光光度計(jì)制造商通常使用光電倍增管(photo-multipliertubes,PMTs)和光敏二極管。超微量分光光度計(jì)是一種將復(fù)雜的光分解成光譜線的科學(xué)儀器!寧夏分光分光光度計(jì)教程
WFZ800-DA、756型等分光光度計(jì),由于其光電接收裝置為光電倍增管,它本身的特點(diǎn)是放大倍數(shù)大,因而可以用于檢測(cè)微弱光電信號(hào),而不能用來(lái)檢測(cè)強(qiáng)光。否則容易產(chǎn)生信號(hào)漂移,靈敏度下降。針對(duì)其上述特點(diǎn),在維修、使用此類儀器時(shí)應(yīng)注意不讓光電倍增管長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,因此在預(yù)熱時(shí),應(yīng)打開比色皿蓋或使用擋光桿,避免長(zhǎng)時(shí)間照射使其性能漂移而導(dǎo)致工作不穩(wěn)。放大器靈敏度換擋后,必須重新調(diào)零。比色杯的配套性問(wèn)題。比色杯必須配套使用,否則將使測(cè)試結(jié)果失去意義。在進(jìn)行每次測(cè)試前均應(yīng)進(jìn)行比較。具體方法如下:分別向被測(cè)的兩只杯子里注入同樣的溶液,把儀器置于某一波長(zhǎng)處,石英比色杯;220nm、700nm裝蒸餾水,玻璃比色杯:700nm處裝蒸餾水,將某一個(gè)池的透射比值調(diào)至100%,測(cè)量其他各池的透射比值,記錄其示值之差及通光方向,如透射比之差在,若超出此范圍應(yīng)考慮其對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響。典型故障及其排除方法1、儀器不能調(diào)零??赡茉颍篴.光門不能完全關(guān)閉。解決方法:修復(fù)光門部件,使其完全關(guān)閉。b.透過(guò)率“100%”旋到底了。解決方法:重新調(diào)整“100%”旋鈕。c.儀器嚴(yán)重受潮。解決方法:可打開光電管暗盒,用電吹風(fēng)吹上一會(huì)兒使其干燥。吉林原子吸收分光分光光度計(jì)操作超微量分光光度計(jì)不需要比色皿!
編輯|steins來(lái)源|島津分析中心背景摘要:紫外可見分光光度計(jì)和熒光分光光度計(jì)都經(jīng)常用于樣品定量。使用紫外可見分光光度計(jì)進(jìn)行定量時(shí)基于朗伯比爾定律,測(cè)定的吸收值一定范圍內(nèi)與樣品濃度成正比。另一方面,利用熒光分光光度計(jì)時(shí),使用熒光強(qiáng)度。在低濃度時(shí),熒光強(qiáng)度與濃度成正比,所以,可以用于定量。本次使用紫外可見分光光度計(jì)和熒光分光光度計(jì)兩臺(tái)儀器分別測(cè)定了羅丹明B溶液。羅丹明B是用于纖維和皮革的染色的熒光物質(zhì)。關(guān)于測(cè)定結(jié)果,對(duì)兩個(gè)機(jī)種的定量、檢測(cè)下限值和標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性度進(jìn)行了比較,下面將進(jìn)行介紹。1紫外1羅丹明B溶液的吸光度測(cè)定使用了紫外可見分光光度計(jì)UV-260Oi測(cè)定樣品吸光度。測(cè)定條件如表1所示。將粉末狀的羅丹明B溶解在蒸餾水中,調(diào)配~5ug/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液。羅丹明B的標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光光譜如圖1所示,根據(jù)544nm的吸光度值創(chuàng)建的標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖2和圖3所示。在圖2中,用~5ug/ml的6點(diǎn)和空白樣品(蒸餾水)創(chuàng)建,得到了線性度良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線(相關(guān)系數(shù)的平方值是)。在圖3所示的低濃度區(qū)域中,噪聲的影響相對(duì)較大,導(dǎo)致線性較差。2熒光2羅丹明B溶液的熒光強(qiáng)度測(cè)定使用了熒光分光光度計(jì)RF-60O0測(cè)定了樣品熒光強(qiáng)度。測(cè)定條件如表2所示。
可見分光光度計(jì)【原理】可見分光光度計(jì)是一種結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)潔、使用方便的單光束分光光度計(jì),基于樣品對(duì)單色光的選擇吸收特性可用于對(duì)樣品進(jìn)行定性和定量分析。其定量分析根據(jù)相對(duì)測(cè)量原理工作,即選定樣品的溶劑(或空氣)作為標(biāo)準(zhǔn)試樣,設(shè)定其透射比為100%,被測(cè)樣品的透射比則相對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)試樣(或空氣)而得到,在一定的濃度范圍,各參量遵循朗伯—比耳定律:A:吸光度T:相對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)試樣的透射比I:光透過(guò)被測(cè)樣品后照射到光電傳感器上的強(qiáng)度I0:光透過(guò)標(biāo)準(zhǔn)試樣后照射到光電傳感器上的強(qiáng)度K:樣品溶液的比消光系數(shù)L:樣品溶液在光路中的長(zhǎng)度C:樣品濃度【儀器結(jié)構(gòu)】【使用方法】(1)開機(jī)預(yù)熱儀器接通電源,微機(jī)進(jìn)行系統(tǒng)自檢,LCD顯示窗口顯示相應(yīng)的產(chǎn)品型號(hào)后,儀器進(jìn)入工作狀態(tài)。默認(rèn)的工作模式是T。注意:為使內(nèi)部達(dá)到熱平衡,開機(jī)預(yù)熱時(shí)間不小于30分鐘。(2)改變波長(zhǎng)通過(guò)旋轉(zhuǎn)波長(zhǎng)手輪改變波長(zhǎng),并在波長(zhǎng)觀察窗的刻度選擇所需的波長(zhǎng)。(3)放置參比與待測(cè)樣品選擇測(cè)試用的比色皿,把盛放參比和待測(cè)液的樣品放入樣品架內(nèi),通過(guò)樣品架拉桿來(lái)選擇樣品的位置。當(dāng)拉桿到位時(shí)有定位感,到位時(shí)輕輕推拉一下以保證定位的正確。(4)調(diào)0%T、調(diào)100%T/0A為保證儀器進(jìn)入正確的測(cè)試狀態(tài)。分析儀器工作者要懂得分光光度計(jì)的日常維護(hù)和對(duì)主要技術(shù)指標(biāo)的簡(jiǎn)易測(cè)試方法。
紫外-可見分光光度計(jì)是基于紫外可見分光光度法原理,利用物質(zhì)分子對(duì)紫外可見光譜區(qū)的輻射吸收來(lái)進(jìn)行分析的一種分析儀器。主要由光源、單色器、吸收池、檢測(cè)器和信號(hào)處理器等部件組成。其工作原理為分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見輻射光后,發(fā)生了電子能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同,因此,每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。本文介紹的是日立U-3010型號(hào)紫外分光光度計(jì)的使用方法。日立U-3010型號(hào)紫外分光光度計(jì)的使用1.開電源,先開U-3010電源,再啟動(dòng)電腦2.點(diǎn)擊桌面上UV,啟動(dòng)程序3.點(diǎn)擊method窗口,將會(huì)出現(xiàn)GeneralQuantitationinstrumentMonitorReport五個(gè)對(duì)話框,如下圖所示:4.設(shè)置(1)General對(duì)話框;(2)Quantitation對(duì)話框,如果測(cè)波長(zhǎng)選擇wavelength,數(shù)量可選多個(gè),比如測(cè)定:260nm,280nm,230nm,則選擇3個(gè);如圖所示:(3)Instrument對(duì)話框,將你要測(cè)定的波長(zhǎng)值依次輸入框內(nèi);(4)設(shè)置好后,點(diǎn)確定鍵5.放入空白對(duì)照。超微量分光光度計(jì)一般具有多個(gè)光程!湖北火焰分光分光光度計(jì)原理
紫外可見分光光度計(jì)的鎢燈光源發(fā)出400~760nm波長(zhǎng)的光譜。寧夏分光分光光度計(jì)教程
由于儀器的制造和調(diào)整誤差,單色光的實(shí)際波長(zhǎng)與儀器的波長(zhǎng)讀數(shù)值間都存在一定的誤差。但是,當(dāng)吸收峰寬度較小,而且吸收峰兩側(cè)邊緣比較陡直,此時(shí)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的影響就必須引起注意。2、透射比(吸光度)準(zhǔn)確度很顯然,透射比或吸光度的誤差越大,測(cè)試結(jié)果的可信性越差,從而影響到測(cè)試數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。3、雜散光雜散光是由于光學(xué)元件制造誤差以及光學(xué)和機(jī)械零件表面的漫反射形成的。雜散光是分析樣品的非吸收光,隨著樣品濃度的增加,雜散光的影響也隨之增大,將給分析結(jié)果帶來(lái)一定的誤差。在紫外的短波區(qū)域光源強(qiáng)度和檢測(cè)器的靈敏度均明顯減弱,雜散光的影響更不能忽視。因此,雜散光的大小也是儀器性能的一項(xiàng)重要指標(biāo)。使用與維護(hù)1、若大幅度改變測(cè)試波長(zhǎng),需稍等片刻,等燈熱平衡后,重新校正“0”和“100%”點(diǎn)。然后再測(cè)量。2、指針式儀器在未接通電源時(shí),電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況,需進(jìn)行機(jī)械調(diào)零。3、比色皿使用完畢后,請(qǐng)立即用蒸餾水沖洗干凈,并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去,以防止表面光潔度被破壞,影響比色皿的透光率。4、操作人員不應(yīng)輕易動(dòng)燈泡及反光鏡燈。寧夏分光分光光度計(jì)教程