它還通過測定紫外光譜范圍內(nèi)強(qiáng)度峰值位置的精確度來確定波長的系統(tǒng)及隨機(jī)誤差。遵照這些建議來維護(hù)分光光度計(jì),那么在今后的使用過程中再也不用擔(dān)心測量結(jié)果有問題啦。分光光度法始于牛頓(Newton)。早在1665年牛頓作了一介罈人的實(shí)驗(yàn):他讓太陽光透過暗室窗上的小圓孔,在室內(nèi)形成很細(xì)的太陽光束,該光束經(jīng)棱鏡色散后,在墻壁上呈現(xiàn)紅、橙、黃、綠、藍(lán)、靛、紫的色帶。這色帶就稱為“光譜”。頓通過這個(gè)實(shí)驗(yàn);揭示了太陽光是復(fù)合光的事實(shí)。分光光度計(jì)的測量范圍一般包括波長范圍為380~780 nm的可見光區(qū)和波長范圍為200~380 nm的紫外光區(qū)。海南國產(chǎn)分光光度計(jì)
5、WFZ800-DA、756型等分光光度計(jì),由于其光電接收裝置為光電倍增管,它本身的特點(diǎn)是放大倍數(shù)大,因而可以用于檢測微弱光電信號,而不能用來檢測強(qiáng)光。否則容易產(chǎn)生信號漂移,靈敏度下降。針對其上述特點(diǎn),在維修、使用此類儀器時(shí)應(yīng)注意不讓光電倍增管長時(shí)間暴露于光下,因此在預(yù)熱時(shí),應(yīng)打開比色皿蓋或使用擋光桿,避免長時(shí)間照射使其性能漂移而導(dǎo)致工作不穩(wěn)。6、放大器靈敏度換擋后,必須重新調(diào)零。7、比色杯的配套性問題。比色杯必須配套使用,否則將使測試結(jié)果失去意義。在進(jìn)行每次測試前均應(yīng)進(jìn)行比較。具體方法如下:分別向被測的兩只杯子里注入同樣的溶液,把儀器置于某一波長處,石英比色杯;220nm、700nm裝蒸餾水,玻璃比色杯:700nm處裝蒸餾水,將某一個(gè)池的透射比值調(diào)至100%,測量其他各池的透射比值,記錄其示值之差及通光方向,如透射比之差在,若超出此范圍應(yīng)考慮其對測試結(jié)果的影響。典型故障及其排除方法1、儀器不能調(diào)零。可能原因:a.光門不能完全關(guān)閉。解決方法:修復(fù)光門部件,使其完全關(guān)閉。b.透過率“100%”旋到底了。解決方法:重新調(diào)整“100%”旋鈕。c.儀器嚴(yán)重受潮。解決方法:可打開光電管暗盒,用電吹風(fēng)吹上一會兒使其干燥。遼寧紫外可見分光分光光度計(jì)操作單光束分光光度計(jì)結(jié)構(gòu)簡單、價(jià)格便宜,但由于其雜散光、光源波動等影響很大,所以準(zhǔn)確度較差。
分光光度法原理要求照射在樣品池上的單色光必須對應(yīng)于樣品吸收光譜中的某一個(gè)吸收峰的波長。由于儀器的制造和調(diào)整誤差,單色光的實(shí)際波長與儀器的波長讀數(shù)值間都存在一定的誤差。樣品中絕大部分的主要吸收峰都有一定的寬度,對波長準(zhǔn)確度要求允許寬些。但是,當(dāng)吸收峰寬度較小,而且吸收峰兩側(cè)邊緣比較陡直,此時(shí)波長準(zhǔn)確度的影響就必須引起注意。很顯然,透射比或吸光度的誤差越大,測試結(jié)果的可信性越差,從而影響到測試數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
兩束光合為一束。并交替通過入射狹縫進(jìn)入單色器中,經(jīng)離軸拋物鏡將光束平行地投射在光柵上,色散并通過出射狹縫之后,被濾光片濾除高級次光譜,再經(jīng)橢球鏡聚焦在探測器的接收面上。探測器將上述交變的信號轉(zhuǎn)換為相應(yīng)的電信號,經(jīng)放大器進(jìn)行電壓放大后,轉(zhuǎn)入A/D轉(zhuǎn)換單位,計(jì)算機(jī)處理后得到從高波數(shù)到低波數(shù)的紅外吸收光譜圖。元析儀器紫外可見分光光度計(jì)二、紫外可見分光光度計(jì)和紅外分光光度計(jì)的概述不同:1、紫外分光光度計(jì)的概述:根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收,特別是比較大吸收波長λmax和摩爾吸收系數(shù)ε是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很***的應(yīng)用。在國內(nèi)外的藥典中,已將眾多的藥物紫外吸收光譜的比較大吸收波長和吸收系數(shù)載入其中,為藥物分析提供了很好的手段。2、紅外分光光度計(jì)的概述:由光源發(fā)出的光,被分為能量均等對稱的兩束,一束為樣品光通過樣品,另一束為參考光作為基準(zhǔn)。這兩束光通過樣品室進(jìn)入光度計(jì)后,被扇形鏡以一定的頻率所調(diào)制,形成交變信號。三、紫外可見分光光度計(jì)和紅外分光光度計(jì)的應(yīng)用不同:1、紫外分光光度計(jì)的應(yīng)用:將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜。關(guān)于儀器的系統(tǒng)誤差,可通過對分光光度計(jì)的定期校正來克服,若所需準(zhǔn)確度很高的測量,則必須天天校正。
試劑盒包含一個(gè)空白濾光片、三個(gè)檢查光度的濾光片和三個(gè)校正波長的濾光片。每個(gè)濾光片的吸光值是相對空白濾光片測定的。這個(gè)試劑盒不僅能讓用戶獲得測量準(zhǔn)確性的信息,也能提供精確度的信息,包括平均值和變異系數(shù)。在測量準(zhǔn)確性和精確度時(shí),將空白濾光片和樣品濾光片放入插槽內(nèi)。將測得的輸出吸光度值與允許值范圍比較。在檢查波長時(shí),測定三個(gè)測試濾光片在對應(yīng)波長(260nm、280nm和800nm)下的吸光度,以確定每個(gè)波長的變異系數(shù)。許多分光光度計(jì),包括Eppendorf的所有儀器,都帶有一個(gè)特殊的功能——自檢。Eppendorf建議用戶至少每周運(yùn)行一次自檢,但自動自檢的頻率可根據(jù)需要進(jìn)行設(shè)定。自檢主要檢查儀器的幾個(gè)部分。它通過測定現(xiàn)有波長的隨機(jī)誤差來校驗(yàn)檢測器,通過檢查大能量、隨機(jī)誤差、基準(zhǔn)傳感器的信號和光強(qiáng)度來校驗(yàn)光源。它還通過測定紫外光譜范圍內(nèi)強(qiáng)度峰值位置的精確度來確定波長的系統(tǒng)及隨機(jī)誤差。遵照這些建議來維護(hù)分光光度計(jì),那么在今后的使用過程中再也不用擔(dān)心測量結(jié)果有問題啦。紫外可見分光光度計(jì)是理化實(shí)驗(yàn)室常用的分析儀器。吉林原子吸收分光分光光度計(jì)選購
在使用紫外可見分光光度計(jì)測試過程中可能出現(xiàn)出現(xiàn)自檢時(shí)提示波長自檢出錯的情況。海南國產(chǎn)分光光度計(jì)
點(diǎn)擊上方藍(lán)字關(guān)注“公眾號”分光光度計(jì)分光光度計(jì)是實(shí)驗(yàn)室檢測核酸或者蛋白樣品濃度**常用的工具之一。儀器使用頻繁,但甚少見到有人維護(hù)。其實(shí),保持分光光度計(jì)清潔、無污染是成功操作的關(guān)鍵。清潔儀器我們應(yīng)該用蘸有中性清潔劑的軟布擦拭分光光度計(jì)的表面。刺激性的清潔劑可能會損壞儀器表面。你也可以清潔比色皿本身。比色皿插槽只能用蘸有乙醇或異丙醇的無絨棉簽來清潔。這可防止液體進(jìn)入內(nèi)部。如果你必須要用水清潔,那么可用蘸有乙醇或異丙醇的棉簽來加速干燥。比色皿插槽的蓋子也可以清潔,但不是泡在清潔劑中。如有必要,拆下蓋子,用蘸有溫和清潔劑的軟布或無絨棉簽來清潔。此外,平時(shí)不使用時(shí),應(yīng)蓋上比色皿插槽的蓋子,以免灰塵或其他污染物落入。消毒和凈化如果分光光度計(jì)被微生物所污染,那么可采用下列步驟進(jìn)行消毒和凈化。首先,利用溫和的清潔劑來清潔設(shè)備。然后,用蘸有消毒劑(通常是酒精溶液)的軟布擦拭表面。如有必要,拆下并清潔比色皿插槽。檢查組件維護(hù)的另一方面在于檢查分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確性。Eppendorf提供了一個(gè)濾光片系統(tǒng)(BioSpectrometerreferencefilterkit),以評估光度準(zhǔn)確性和系統(tǒng)的波長誤差。海南國產(chǎn)分光光度計(jì)