病理實驗外包,病理染色切片常見問題及解決方法:1.切片彎曲且不能形成直帶●原因:①蠟塊上下或左右兩邊不平行。②蠟塊與切片刀刀口不平行。③組織塊外形不整齊。④切片刀各處的鋒利程度不一致。●解決方法:①將蠟塊四邊反復(fù)修平對稱。②調(diào)節(jié)蠟塊夾持器,使其與切片刀平行。③修整組織塊時,注意修切整齊。④移動切片刀,更換刀口位置。2.切片上出現(xiàn)裂紋●原因:①切片刀上有小缺口,或刀口不平整。②組織中可能含有較硬之物質(zhì),如固定液之結(jié)晶石灰質(zhì)。③包埋時石蠟凍結(jié)太慢?!窠鉀Q方法:①切片刀某處有缺口,可調(diào)換刀口部位或重新磨刀。刀口上缺口過多且不平整,可先將刀鋒垂直在磨刀石上輕輕磨數(shù)次,然后按常規(guī)磨刀田。②組織中硬性物質(zhì)太多,則不宜用。③糾正包埋時的缺點。一般待蠟塊周圍凝結(jié)一層,即可放入冷水中。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。病理實驗外包檢測-價格低-周期短-數(shù)據(jù)清晰。海南推薦的病理實驗外包哪家好
病理實驗外包,病理染色組織處理的要求:恰當?shù)慕M織處理是做好免疫組化染色的先決條件,也是決定染色成敗的內(nèi)部因素,在組織細胞材料準備的過程中,不僅要求保持組織細胞形態(tài)完整,更要保持組織細胞的抗原性不受損或彌漫,防止組織自溶。如果出現(xiàn)自溶壞死的組織,抗原已經(jīng)丟失,即使用很靈敏的檢測抗體和高超的技術(shù),也很難檢出所需的抗原,反而往往由于組織的壞死或制片時的刀痕擠壓,在上述區(qū)域易出現(xiàn)假陽性結(jié)果。組織及時取材和固定組織標本及時的取材和固定是做好免疫組化染色的關(guān)鍵第一步,是有效防止組織自溶壞死,抗原丟失的開始,離體組織應(yīng)盡快的進行取材,比較好2h內(nèi),取材時所用的刀應(yīng)銳利,要一刀下去切開組織,不可反復(fù)切拉組織,造成組織的擠壓,組織塊大小要適中,一般在2.5cm×2.5cm×0.2cm,切記取材時組織塊寧可面積大,千萬不能厚的原則,(也就是說組織塊的面積可以大到3cm×5cm,但組織塊的厚度千萬不能超過0.2cm,否則將不利于組織的均勻固定)。固定液快速滲透到組織內(nèi)部使組織蛋白能在一定時間內(nèi)迅速凝固。從而完好的保存抗原和組織細胞形態(tài)。吉林專業(yè)的病理實驗外包檢測病理實驗外包的條件,南京英瀚斯。
●原因:①組織脫水,透明不夠。②浸蠟時間過長、浸蠟溫度過高。③組織脫出是由于脫水、透明時間不夠,或組織中含有乙醇等,石蠟不易滲入組織中故導(dǎo)致石蠟與組織分離。④二甲苯使用時間過久?!窠鉀Q方法:①必須按組織大小厚薄選擇脫水、透明時間。②依組織的性質(zhì)和結(jié)構(gòu)特點確定浸蠟時間、控制包埋溫度。一般這種情況難以補救。③脫水,透明滲蠟不夠,應(yīng)重新熔化,退回入二甲苯和酒精,再進行滲蠟包埋。④更換二甲苯。2.切片皺褶太多且不能完全展開●原因:①石蠟太軟或室溫過高。②切片刀上粘有殘余的石蠟,刀口不干凈。③組織浸蠟時間不夠或脫水、透明不夠。④切片刀不鋒利?!窠鉀Q方法:①可將蠟塊放入冰箱中冰凍后切片。并在切片時一邊切片一邊用冰塊冰凍或換蠟。如室溫過高,可開空調(diào)降低室溫。②切片刀不干凈,可用棉花沾少許二甲苯將刀口拭干凈。③組織浸蠟不夠,可重復(fù)浸蠟過程。④將切片刀磨銳利再行切片。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。
病理實驗外包,病理染色常見染色介紹VonKossa染色:簡介:鈣結(jié)節(jié)的形成為成骨細胞特有,Vonkossa染色法是染色礦化結(jié)節(jié)的經(jīng)典方法,利用硝酸銀與鈣鹽的復(fù)分解反應(yīng)形成可被還原的銀鹽,在強光或紫外光下或者強還原劑作用下使其還原為黑色的金屬銀。簡要流程:石蠟切片/細胞爬片/冷凍切片→脫蠟至水→硝酸銀滴染→蘇木素染核→伊紅染色→脫水、透明、封片(中性樹膠)→Vonkossa染**(鈣鹽沉積區(qū)域呈黑色或棕黑色,細胞核呈藍色,背景呈紅色;或者鈣鹽沉積區(qū)域呈黑色或棕黑色,背景呈紅色)。VonKossa染色利用金屬離子置換反應(yīng)檢測組織中鈣鹽沉積,由硝酸銀溶液中的銀離子置換組織中沉積的鈣離子。該染色可用于血管鈣化的檢測病理實驗外包檢測服務(wù)介紹,醫(yī)學造模以及評價。
病理實驗外包,病理染色HE染色常見問題:Q1:HE染色比較常見的紅藍失調(diào)答:(1)偏藍色:蘇木素染色過深,分化不夠;伊紅試劑過期;伊紅染色時間太短,分化過度。(2)偏紅色:蘇木素染色過淺,分化過度;組織固定不佳,細胞核不著色;脫蠟不徹底,蘇木素染不上;蘇木素氧化成熟不夠;伊紅染色過深,分化不足。Q2:HE染色后出現(xiàn)的大白色斑塊或斑點答:脫蠟前烤片溫度偏低,時間過短,蠟未完全融化;切片在脫蠟溶劑中停留時間過短;脫蠟溶劑使用太久,得更新。病理實驗外包,組織檢測,南京英瀚斯生物科技有限公司。湖北生物病理實驗外包哪家好
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病理實驗外包,病理染色常見染色介紹PAS染色:PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學上,主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色。PAS染色利用高碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色,顯示糖原定位。染色步驟1.石蠟切片脫蠟至水(細胞涂片,冰凍切片直接水洗);2.蒸餾水洗;3.過碘酸酒清夜10min;4.自來水沖洗10min;5.Schiff氏液10min;6.流水沖洗5min;7.用哈瑞蘇木精或邁耶蘇木精染核3min(細胞核染色過深可用鹽酸酒精分化);8.流水沖洗5min;9.常規(guī)脫水、透明、封固。結(jié)果PAS陽性為紅色,細胞核藍色。海南推薦的病理實驗外包哪家好
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