病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色免疫組化染色的分類:1)按標(biāo)記物質(zhì)的種類,如熒光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根過氧化物酶和堿性磷酸酶)、鐵蛋白、膠體金等,可分為免疫熒光法、放射免疫法、免疫酶標(biāo)法和免疫金銀法等。2)按染色步驟可分為直接法(又稱一步法)和間接法(二步、三步或多步法)。與直接法相比,間接法的靈敏度提高了許多。3)按結(jié)合方式可分為抗原-抗體結(jié)合,如過氧化物酶-抗過氧化物酶(***)法;親和連接,如卵白素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物(ABC)法、鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結(jié)(SP)法等,其中SP法是比較常用的方法;聚合物鏈接,如即用型二步法,此方法尤其適合于內(nèi)源性生物素含量高的組織抗原檢測。專注于整體的科研項(xiàng)目、病理實(shí)驗(yàn)外包檢測解決方案。海南專門做病理實(shí)驗(yàn)外包哪家好
病理實(shí)驗(yàn)外包,南京英瀚斯可開展冰凍切片免疫熒光染色1. 冰凍切片室溫晾干15 min,可用含10%正常山羊血清的PBS室溫封閉切片1小時(shí)(此步可不洗)。2. 滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗或一抗工作液(抗體的量視組織大小而定,原則是可以均勻覆蓋組織面,且保證整個(gè)過程中不會(huì)使組織干涸)。3. 將切片放在加了PBS的免疫組化濕盒,室溫孵育2小時(shí)或4℃過夜。4. 第二天先將濕盒放到37℃回溫1 h,然后吸取片上的一抗進(jìn)行回收,將切片插入到小染缸PBS沖洗。5. 滴加用PBS稀釋好的二抗(避光)置于分子雜交箱中37℃孵育1小時(shí)?;厥斩?,切片置于染缸內(nèi),PBS洗5 min×3次。6. 滴加DAPI工作液染核,室溫10~20 min(工作濃度0.1%染色15 min)。7. 回收DAPI,滴加5-10 μl 抗熒光衰減封片劑或中性樹膠,用處理干凈的蓋玻片封片,即可到熒光顯微鏡或者共聚焦顯微鏡下觀察拍照。8. 做好的片放在切片盒內(nèi),置于4℃冰箱,可保存一周左右。廣西比較好的病理實(shí)驗(yàn)外包推薦南京英瀚斯 -病理實(shí)驗(yàn)外包-提供高效檢測分析服務(wù)。
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色常見染色介紹甲苯胺藍(lán)染色:甲苯胺藍(lán)(Toloniumchloride),是一種化合物,分子式為C28H20N2O10S2·2Na,分子量為656.62,甲苯胺藍(lán)深綠色粉末,具古銅色光澤,易溶于水,呈藍(lán)紫色溶液。微溶于醇呈藍(lán)色,極微溶于氯仿,幾乎不溶于醚。商品大部分為氯化鋅復(fù)鹽。主要用于氧化還原指示劑。用于眼科檢查角膜缺陷和損傷部分,組織化學(xué)中用于測定脫氧核糖核酸和診斷白喉。甲苯胺藍(lán)是常用的人工合成染料的一種,屬于醌亞胺染料類,這類染料一般含有兩個(gè)發(fā)色團(tuán),一個(gè)是胺基,一個(gè)是醌型苯環(huán),來構(gòu)成色原顯色。染料除有發(fā)色團(tuán)外,還要有能使色原對組織及其他被染物產(chǎn)生親和力的原子團(tuán)即助色。助色團(tuán)能促使染料產(chǎn)生電離成鹽類,幫助發(fā)色團(tuán)對組織產(chǎn)生染色力,使切片上的組織細(xì)胞著色。甲苯胺藍(lán)不僅含有兩個(gè)發(fā)色團(tuán),還含有兩個(gè)助色團(tuán),為堿性染料,甲苯胺藍(lán)中的陽離子有染色作用,組織細(xì)胞的酸性物質(zhì)與其中的陽離子相結(jié)合而被染色。軟骨基質(zhì)對甲苯胺藍(lán)的異染性,是因?yàn)檐浌腔|(zhì)的主要成分是軟骨黏蛋白、多糖物質(zhì),而酸性硫酸根與嗜堿性染料有親和力。
病理實(shí)驗(yàn)外包,染色常見染色介紹天狼星紅染色:主要由天狼星紅染色液、Mayer蘇木素染色液組成,主要用于各種組織病變時(shí)對膠原纖維異?;蚶w維增生的研究中,在普通光學(xué)顯微鏡下心臟血管等組織的膠原纖維被染成紅色,在偏振光鏡下對各種纖維化病變的分型和分級研究有一定的幫助作用。采用免疫組化技術(shù)也可顯示Ⅰ、Ⅲ型膠原纖維,但所用抗體昂貴,操作費(fèi)時(shí),而采用天狼星紅染色試劑便宜,操作簡單。天狼星紅染色液操作步驟1、組織固定于10%福爾馬林固定液,常規(guī)脫水包埋。2、切片厚6μm,常規(guī)脫蠟至水。3、天狼星紅染色液滴染1h。4、流水稍沖洗,去除切片表面染液。5、Mayer蘇木素染色液染細(xì)胞核8~10min。6、流水沖洗10min。7、常規(guī)脫水透明,中性樹膠封固。天狼星紅染色可用作肝纖維化以及腎纖維化模型的定性與膠原纖維沉積的半定量分析。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。病理實(shí)驗(yàn)外包檢測,實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)豐富,認(rèn)真負(fù)責(zé),方便高效。
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色HE染色常見問題:Q1:HE染色比較常見的紅藍(lán)失調(diào)答:(1)偏藍(lán)色:蘇木素染色過深,分化不夠;伊紅試劑過期;伊紅染色時(shí)間太短,分化過度。(2)偏紅色:蘇木素染色過淺,分化過度;組織固定不佳,細(xì)胞核不著色;脫蠟不徹底,蘇木素染不上;蘇木素氧化成熟不夠;伊紅染色過深,分化不足。Q2:HE染色后出現(xiàn)的大白色斑塊或斑點(diǎn)答:脫蠟前烤片溫度偏低,時(shí)間過短,蠟未完全融化;切片在脫蠟溶劑中停留時(shí)間過短;脫蠟溶劑使用太久,得更新。代做實(shí)驗(yàn),病理實(shí)驗(yàn)外包檢測,實(shí)驗(yàn)樣本檢測。河南整體病理實(shí)驗(yàn)外包檢測
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病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色fish染色介紹,熒光原位雜交技術(shù)(fluorescence in situ hybridization),簡稱FISH。 是利用熒光標(biāo)記的特異核酸探針與細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的靶DNA分子或RNA分子雜交,通過在熒光顯微鏡或共聚焦激光掃描儀下觀察熒光信號(hào),來確定與特異探針雜交后被染色的細(xì)胞或細(xì)胞器的形態(tài)和分布,或者是結(jié)合了熒光探針的DNA區(qū)域或RNA分子在染色體或其他細(xì)胞器中的定位。FISH比較常使用的靶序列是16S rRNA,根據(jù)rRNA目標(biāo)區(qū)域可設(shè)計(jì)寡核苷酸探針,進(jìn)行種屬特異性鑒定;將處理好的樣品置于熒光顯微鏡下,選擇分散較好的區(qū)域來觀察。三色(或者更多)熒光激發(fā)下,觀察到不同顏色的熒光圖像。通常選用20X物鏡來掃描樣品雜交區(qū)域,40X或100X物鏡下觀察樣品,從一定的方向進(jìn)行計(jì)數(shù),并對計(jì)數(shù)情況進(jìn)行分析。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。海南專門做病理實(shí)驗(yàn)外包哪家好
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