●原因:①組織脫水,透明不夠。②浸蠟時間過長、浸蠟溫度過高。③組織脫出是由于脫水、透明時間不夠,或組織中含有乙醇等,石蠟不易滲入組織中故導(dǎo)致石蠟與組織分離。④二甲苯使用時間過久?!窠鉀Q方法:①必須按組織大小厚薄選擇脫水、透明時間。②依組織的性質(zhì)和結(jié)構(gòu)特點確定浸蠟時間、控制包埋溫度。一般這種情況難以補救。③脫水,透明滲蠟不夠,應(yīng)重新熔化,退回入二甲苯和酒精,再進行滲蠟包埋。④更換二甲苯。2.切片皺褶太多且不能完全展開●原因:①石蠟太軟或室溫過高。②切片刀上粘有殘余的石蠟,刀口不干凈。③組織浸蠟時間不夠或脫水、透明不夠。④切片刀不鋒利。●解決方法:①可將蠟塊放入冰箱中冰凍后切片。并在切片時一邊切片一邊用冰塊冰凍或換蠟。如室溫過高,可開空調(diào)降低室溫。②切片刀不干凈,可用棉花沾少許二甲苯將刀口拭干凈。③組織浸蠟不夠,可重復(fù)浸蠟過程。④將切片刀磨銳利再行切片。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。病理實驗外包檢測,一站式生物病理實驗外包檢測平臺。內(nèi)蒙古整體病理實驗外包哪家好
病理實驗外包,病理染色HE染色常見問題:Q3:細(xì)胞核染色過淺,顏色暗淡答:切片在蘇木素染液中停留過短,或蘇木素過度氧化失效,或分化時間太長。對策:重新染色。將組織切片放入0.01%氫氧化鈉、0.5%氨水、飽和的碳酸氫鈉溶液、乙醇溶液,每個3-5min即可,接著重新染色??梢赃m當(dāng)?shù)亟M織的嗜堿性以增強核染色,如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中3h,自來水沖洗5-10min染色,或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中1h,自來水沖洗10min染色。Q4:細(xì)胞核染色過深,胞漿著藍(lán)色答:切片在蘇木素染液中停留過長;或切片太厚;或分化時間太短。這種情況首先鏡下看看切片厚度(比較好厚度1-2層細(xì)胞核),要么重新染色,要么重新制片。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。山東哪家做病理實驗外包實驗外包、病理實驗外包檢測、細(xì)胞實驗外包、分子實驗外包。
病理實驗外包,病理染色HE染色常見問題:Q1:HE染色比較常見的紅藍(lán)失調(diào)答:(1)偏藍(lán)色:蘇木素染色過深,分化不夠;伊紅試劑過期;伊紅染色時間太短,分化過度。(2)偏紅色:蘇木素染色過淺,分化過度;組織固定不佳,細(xì)胞核不著色;脫蠟不徹底,蘇木素染不上;蘇木素氧化成熟不夠;伊紅染色過深,分化不足。Q2:HE染色后出現(xiàn)的大白色斑塊或斑點答:脫蠟前烤片溫度偏低,時間過短,蠟未完全融化;切片在脫蠟溶劑中停留時間過短;脫蠟溶劑使用太久,得更新。
病理實驗外包常見染色介紹Warthin-Starry銀染:Warthin-Starry銀染染色原理在于螺旋體表面的黏蛋白與銀結(jié)合,呈黑色。染色結(jié)果:菌絲及顆粒呈黑色,背景呈黃色。銀染一種是檢測聚丙烯酰胺凝膠中蛋白質(zhì)的方法,其原理是銀離子在堿性pH環(huán)境下被還原成金屬銀,沉淀在蛋白質(zhì)的表面上顯色。銀染的方法種類很多,有文獻報道的就有100多種。但是其準(zhǔn)確的染色機制還不是特別地清楚。由于銀染的靈敏度很高,可染出膠上低于1ng的蛋白質(zhì)點,故普遍地用在2D凝膠分析上,及極低蛋白含量測定的垂直凝膠中。主要是用于垂直凝膠電泳中低豐度蛋白的檢測,如內(nèi)源性GST-Pulldown、Co-IP等實驗中相互作用蛋白的研究。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。病理實驗外包檢測,選擇一家專業(yè)放心的實驗平臺,真實靠譜。
病理實驗外包,病理染色膠原纖維染色法1.VanGieson(V.G)***-酸性品紅法鮮紅色:膠原纖維黃色:肌纖維、細(xì)胞質(zhì)、紅細(xì)胞藍(lán)褐色:胞核2.天狼星紅(Siriusred)***染色法紅色:膠原纖維綠色:細(xì)胞核黃色:其他另:天狼星紅***染色法:(偏光顯微鏡)Ⅰ型:強雙折光性,呈黃色或紅色纖維Ⅱ型:弱雙折光,呈多種色彩疏網(wǎng)狀分布Ⅲ型:弱雙折光,呈綠色的細(xì)纖維Ⅳ型:弱雙折光的基膜,呈淡黃色 公司自建有標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞培養(yǎng)房,配備有生物安全柜、超凈工作臺、三氣細(xì)胞培養(yǎng)箱、二氧化碳細(xì)胞培養(yǎng)箱、熒光倒置顯微鏡、體視鏡、酶標(biāo)儀、流式細(xì)胞儀等設(shè)備。病理實驗外包,醫(yī)學(xué)實驗外包,動物實驗外包,就找南京英瀚斯。內(nèi)蒙古整體病理實驗外包哪家好
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病理實驗外包,病理染色HE染色常見問題:Q5:細(xì)胞核呈棕紅色改變答:蘇木素染液過度氧化;或蘇木素染色后反藍(lán)不足導(dǎo)致。應(yīng)該立即更換蘇木素染色液?;蛟诹鲃幼詠硭?一般自來水PH7.5-7.8),或在稀釋的氨水溶液,或在0.2%碳酸氫鈉中適當(dāng)浸泡,這些步驟均可一定程度地加強蘇木素染色后的反藍(lán)效果。Q6:伊紅染色較淡答:伊紅的PH改變了(PH可能已大于5);或反藍(lán)液體未漂洗干凈,殘留后影響胞漿嗜酸性染色;或者切片太薄并且在隨后的脫水步驟停留過久。對策:檢查伊紅染色液PH,可采用乙酸調(diào)至4.6-5.0。根據(jù)以上提示,調(diào)整實驗步驟。內(nèi)蒙古整體病理實驗外包哪家好