外泌體的納米球膜型結構由雙層脂質形成。它也由各種類型的脂質和蛋白質組成，這些脂質和蛋白質衍生自形成外泌體的親代細胞。根據外泌體數據庫ExoCarta的資料，目前已知約有8000種蛋白質和194種脂質與外泌體相關。外泌體通過生物體液被多種不同類型的細胞分泌，包括滑膜液，母乳，血液，尿液，唾液，羊水和血液中的血清，這表明它們在細胞間通訊和觸發(fā)生理反應中起著重要的作用。外泌體功能在研究初期階段發(fā)現是參與細胞成熟過程中去除不必要的蛋白質。簡而言之，它們是天然膜囊泡，將蛋白質，RNA，DNA和脂質從一個細胞攜帶到另一個細胞，調節(jié)受體細胞的生物功能。外泌體具有抗原提呈、免疫逃逸、誘導正常細胞轉化、促進瘤子發(fā)生和轉移等作用。體液外泌體質譜

外泌體的提取、純化和鑒定：每一個外泌體研究者較初都要為外泌體的分離提取而煩惱。選擇的分離方式是利用超速離心的方式分離外泌體，并且可以選用梯度密度離心法得到純度更高的外泌體。另外利用外泌體自身的物理化學性質所研發(fā)的各種市售的外泌體分離提取試劑盒也能達到分離效果。提取的外泌體的鑒定方式主要是通過形態(tài)學（電子顯微鏡技術）、粒子大小以及標志蛋白等方式實現的。近來的研究發(fā)現外泌體在比較多生理病理上起著重要的作用，如免疫中抗原呈遞、瘤子的生長與遷移、組織損傷的修復等。不同細胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能，可作為疾病診斷的生物標志物。外泌體具有脂質雙層膜結構，能比較好的保護其包被的物質，且能靶向特定細胞或組織，因此是一種比較好靶向給藥系統(tǒng)。腹水外泌體融合實驗外泌體的膜蛋白有可能與細胞膜蛋白作用，活躍細胞內通路。福建海洋生物外泌體外泌體屬于胞外囊泡類，除了外泌體之外細胞還分泌微泡以及其它的膜囊泡。

外泌體的生物發(fā)生和鑒定。液體和細胞外成分，如蛋白質、脂類、代謝物、小分子和離子，可以通過內吞作用和質膜內陷，與細胞表面蛋白一起進入細胞。由此產生的胞腔側質膜芽的形成表現為質膜的外-內取向。這一出芽過程導致芽的形成可能與內質網(ER)、跨高爾基網絡(TGN)和線粒體預先形成的早期核內體融合。ESEs也可以與ER和TGN融合，這可能解釋了內吞物如何到達它們的。因此，一些ESEs可以包含膜和腔的成分，可以表示不同的起源。外泌體表面蛋白包括四聚體蛋白、整合蛋白、免疫調節(jié)蛋白等。外泌體可以包含不同類型的細胞表面蛋白、細胞內蛋白、RNA、DNA、氨基酸和代謝物。

AFC自動收集器是將qEV分離法這一過程自動化的儀器，將用來收集外泌體樣本的微量離心管放置在AFC的中間轉盤內，根據稱重精確測量流體體積，可精確的測量到樣品中每一個液滴的重量并精確測量總重量。將在空隙體積之前從qEV柱洗脫的流體收集到AFC轉盤的單獨中心孔中并送至廢液桶，避免將不需要的空隙部分收集到微量離心管中。在提取期間，當達到設定的提取體積后，轉盤會自動旋轉到下一個微量離心管繼續(xù)收集，到收集完成后自動停止。微滴式數字PCR技術不佳有效提高了核酸分子的擴增效率，而且由于采用微滴計數的方法進行定量，可以不依賴與RT-PCR的熒光信號和Ct值，對所測樣品中的核酸分子進行一定定量。外泌體產生于細胞中的多泡體。

肉瘤細胞可以通過產生異常的抗肉瘤或肉瘤免疫應答并促進瘤子細胞的活動而大量產生外泌體，這些外泌體富含促病的細胞成分，例如PD-L1、mRNA和micro-RNA等免疫阻止蛋白，參與病癥的發(fā)展、轉移和耐藥性。值得注意的是，肉瘤分泌的外泌體表面和外泌體顆粒中均存在的PD-L1。ESCRT（運輸所需的內體分選復合體）參與將生物分子包裝到外泌體中，nSMase2（中性鞘磷脂酶2）和Rab蛋白調節(jié)外泌體分泌。已確定ESCRT、Rab27a和nSMase2參與外泌體PD-L1的包裝和分泌。外泌體可以將PD-L1轉運至其他PD-L1表達低或沒有PD-L1的細胞，并可能與PD-1結合。外泌體顯示出了在診療各種疾病（如心肌病和神經?。┓矫娴臐摿ΑＬ旖蛲饷隗w

外泌體研究使用血漿樣本進行實驗較好。體液外泌體質譜

外泌體的提取分離方法：1、超濾離心：由于外泌體是一個大小約幾十納米的囊狀小體，大于一般蛋白質，利用不同截留相對分子質量(MWCO)的超濾膜對樣品進行選擇性分離，便可獲得外泌體。超濾離心法簡單高效，且不影響外泌體的生物活性，是提取細胞外泌體的一種新方法。2、磁珠免疫法：外泌體表面有其特異性標記物（如CD63、CD9蛋白），用包被抗標記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結合，即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡便、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點，但是效率低，外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響，不利于下游實驗，難以普遍普及。體液外泌體質譜

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