外泌體(Exosome),是細胞外囊泡(EV)的一種主要類型,是直徑為30至150nm的納米大小的膜結構,大多數(shù)細胞都會分泌外泌體。外泌體存在于各種生物體液中,通過其攜帶的蛋白質、核酸、脂質和代謝物等來發(fā)揮細胞間通訊功能,參與免疫應答、代謝和心血管疾病、神經退行性疾病以及病癥進展等多種生理和病理過程。在內體轉變?yōu)槌墒於嗄遗輧润w(MVE)的過程中,內體膜向腔內出芽形成腔內囊泡(ILV),MVE與細胞膜融合釋放ILV到細胞外,即形成外泌體。外泌體分析會引起何種生理作用,這是進一步研究的發(fā)展方向。北京胸水外泌體
小鼠骨髓樹突狀細胞產生的外泌體中含有的中流多肽能夠啟動特異性細胞毒性T淋巴細胞,根除或抑制小鼠中流的生長,這一發(fā)現(xiàn)為中流免疫zhiliao提供了新的研究思路。另外,樹突狀細胞來源的外泌體也能夠通過激huo其他免疫細胞誘導抗中流反應,從而抑制中流。B細胞分泌的外泌體包含MHCⅡ-多肽復合物,能夠激huo人和小鼠抗原特異性T細胞,從而實現(xiàn)調節(jié)免疫響應的功能。細菌或病原體感ran的巨噬細胞外泌體能夠刺激巨噬細胞和中性粒細胞分泌炎性介質,在增強機體免疫監(jiān)督方面發(fā)揮重要作用。湖南外泌體miRNA測序突狀細胞釋放的外泌體可以強化殺傷性T細胞對癥狀細胞的特異性反應。
目前,在各種健康與疾病模型中都發(fā)現(xiàn),外泌體通過分子信息傳遞扮演著重要的角色。外泌體還越來越多地被認為是疾病的生物標志物和預后因子,具有重要的臨床診斷和治理意義。除此之外,它們還有潛力被用于臨床,作為基因和藥物遞送的載體。健康人和多種疾病的患者會將含有不同RNA和蛋白質成分的外泌體釋放到體液循環(huán)中,因其特殊性,外泌體可以作為生物標志物來對疾病進行檢測。例如,從血液或尿液中分離的外泌體可以用作病癥、心臟病的診斷和預后的指標。
外泌體的提取方法:超速離心法,這是外泌體提取比較常用的方法。超速離心法得到的外泌的體量比較多,但是純度不足,電鏡鑒定時發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊,由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標準,也有一些研究認為此種方法得到的是微泡而不是外泌體。過濾離心法,這種操作簡單、省時,不會影響外泌體的生物活性,但同樣存在純度不足的問題。密度梯度離心法,用此種方法分離到的外泌體純度高,但是前期的準備工作繁雜,比較耗時,量少。外泌體可參與到機體免疫應答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化等方方面面。
circZKSCAN1在肝ai細胞中低表達且抑制肝ai細胞的增殖,ciRS-7則被認為是非小細胞肺ai、結腸ai和胃ai等中流的預后指標,其高表達與較高的臨床分期和較差的總體生存期相關。目前已發(fā)現(xiàn)組織、血液和外泌體中的circRNA分子表達失調,而多種circRNA的聯(lián)合檢測會提高外泌體標志物的敏感性和特異性,甚至可達到90%左右。外泌體可作為納米載體來介導細胞間的信息傳遞,發(fā)揮信息傳遞作用的方式主要有:在細胞間轉移受體,通過配體受體介導的方式作用于受體細胞,向受體細胞轉移功能蛋白,通過膜融合方式向受體細胞傳遞mRNA、miRNAs或轉錄因子等信息。這些方式為中流靶向zhiliao開辟了新的途徑。應用Tim4的外泌體強結合能力,可用ELISA或FACS高靈敏度定性檢測、定量分析外泌體。血漿血清外泌體提取試劑盒公司
目前,提取外泌體的方法主要有超速離心法、PEG沉淀法。北京胸水外泌體
尋找肝臟疾病的新型分子標志物一直是研究熱點,也是難點。不同肝臟疾病中,細胞分泌的外泌體所攜帶的核酸和蛋白組分之間存在差異。這些不同生理狀態(tài)下外泌體所攜帶的特異性蛋白分子、miRNA等,是潛在的分子診斷和預后標志物。肝細胞患者中,血清外泌體miR-21、-18a、-221、-222和miR-224明顯上升,miR-101、-106b、-122和miR-195明顯下降。而HCC患者肝移植復發(fā)后,血清外泌體miR-718水平明顯下降。除外泌體外,微泡也有可能作為新型標志物,研究發(fā)現(xiàn)HCV患病者中CD4+和CD8+T細胞來源的微泡含量上升;而肝臟干細胞分泌的微泡中多種miRNAs上調。北京胸水外泌體