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植物外泌體iTRAQ

來源: 發(fā)布時間:2023-11-27

外泌體攜帶的與疾病進展緊密關聯(lián)的分子標志物可用于疾病進展的監(jiān)視、檢測和診斷,是一種潛在的非侵入性生物標志物。由于外泌體本身可以作為抗原提呈小泡,且有較長的循環(huán)半衰期,可用于免疫學相關研究,同時,源自ai細胞的外泌體可以被工程化,發(fā)揮免疫刺激作用,可作為中流疫苗應用于ai癥的免疫zhiliao。此外,外泌體穩(wěn)定而廣fan地分布在qi官和組織中,具有低免疫原性、高耐受性等特點,且良好的膜滲透性可使其通過血腦屏障,因此可用作組織和qi官特異藥物輸送系統(tǒng),兼有高輸送效率和低副作用。因此,外泌體適合用作藥物載體遞送zhiliao劑(如阿霉素或姜黃素),zhiliao性miRNA、siRNA等核酸和蛋白質,運送至靶位點后實現(xiàn)靶向zhiliao。外泌體并作為癥狀早期診斷技術,應用于與癥狀進展相關的研究。植物外泌體iTRAQ

植物外泌體iTRAQ,外泌體提取試劑盒

外泌體的組成較為復雜,其內含有多種生物大分子,如:核酸(雙鏈DNA和各種RNA亞型)、蛋白質和脂質。這些分子被外泌體攜帶進入血液循環(huán),而后被靶細胞吸收,從而調節(jié)靶細胞基因表達和細胞功能。此外,外泌體相關的miRNA作為短單鏈和非編碼RNA分子,調節(jié)致病基因或抑病基因的表達,參與細胞分化、細胞凋亡及細胞信號的傳導。有研究表明,外泌體能影響種瘤微環(huán)境的形成、增強種瘤細胞的侵襲和轉移能力、介導種瘤免疫壓制及參與種瘤放化療抵抗進而促進種瘤的發(fā)展。江西外泌體測序外泌體天然的可以攜帶遺傳到靶細胞中,從而在生物學和致病過程中誘導遺傳修飾。

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外泌體(exosomes)是一類由細胞分泌到胞外的囊泡。與其他兩種胞外囊泡(微囊泡和凋亡小體)相比,外泌體在產(chǎn)生方式、尺寸、密度和內容物等方面存在明顯差異。不同于微囊泡“出芽”的形成方式,外泌體主要通過胞吐過程釋放至細胞外:首先細胞膜向內凹陷形成早期核內體(earlyendosomes),早期核內體進一步內陷形成多泡體(multivesicularbodies,MVBs),其中一部分多泡體與溶酶體(lysosome)融合,進而降解;另一部分與細胞膜融合,將其內部所包含的囊泡釋放至胞外,即為外泌體。外泌體具有獨特的物理化學性質,其直徑為30~200nm,密度為1.13~1.19g/mL,組成包括細胞來源相關的脂質、蛋白質、RNA、DNA等物質,在其表面連接有大量的糖鏈,如甘露糖、聚乳糖胺和α2,6-唾液酸等。

外泌體特指直徑在30-150nm的囊泡,其主要來源于細胞內多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。外泌體膜上富含參與外泌體運輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63,CD81和CD9)、熱休克蛋白家族(HSP60,HSP70和HSP90),本示蹤病毒使用CD9作為生物標記,通過將CD9與熒光蛋白偶聯(lián),帶熒光的膜蛋白會在表達至外泌體膜上,便于后續(xù)進行、觀察內化或其他實驗。攜帶有外源基因的慢病毒載體在慢病毒包裝質粒、細胞系的輔助下,經(jīng)過病毒包裝成為有ganran力的病毒顆粒,通過ganran細胞或組織,實現(xiàn)外源基因在細胞或組織中表達。外泌體觀察到它們可以在體內刺激免疫應答。

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外泌體可以由體內或體外培養(yǎng)的幾乎所有類型的細胞分泌,并廣fan存在于血漿、膽汁、尿液、母乳、唾液、胸腔積液、淋巴、胃酸、支氣管肺泡灌洗液、腦脊液、眼淚、滑膜液、羊水、腹水、鼻分泌物和子宮抽吸物液體等體液中。目前,基于不同的分離原理,研究者建立了五種主要的提取純化技術,分別為基于質量密度的超速離心技術、基于粒徑大小的分離技術、基于溶解性質的聚合物沉淀技術、基于免疫親和原理的分離技術和基于流體性質的微流控技術。蛋白質分子在外泌體信號傳遞過程中起到了非常重要的作用。CD81外泌體慢病毒包裝

外泌體的復雜性,為疾病檢測和監(jiān)測提供了一個多指標的診斷窗口。植物外泌體iTRAQ

外泌體是新型治理劑,瘤轉移是一個包括病細胞侵入、血管中存活和殖民化等多步驟的復雜過程。外泌體能夠影響這個級聯(lián)反應的每一步,因此可作為瘤治理的靶點。瘤細胞在轉移到其他組織時需要在間質細胞間移動并到達血管中,在這個過程中,瘤細胞外泌體通過纖維連接蛋白促進瘤細胞的運動性,再通過蛋白酶促進細胞外基質的分解、血管生成,進而促進瘤轉移。多數(shù)瘤細胞對轉移的組織具有指向性,而外泌體表面的整合素就是決定其指向性的因子,如外泌體αvβ5整合素決定了對肝臟的指向性,而外泌體α6β4?α6β1整合素決定了對肺部的指向性。植物外泌體iTRAQ