在生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,卵母細胞冷凍保存技術(shù)作為輔助生殖技術(shù)的重要組成部分,近年來取得了進展。尤其是針對成熟卵母細胞紡錘體的冷凍保存研究,不僅關(guān)乎女性生育能力的保存,還涉及到遺傳學(xué)的穩(wěn)定性和安全性。成熟卵母細胞,即處于第二次減數(shù)分裂中期(MII期)的卵母細胞,其內(nèi)部包含一個高度復(fù)雜且精細的紡錘體結(jié)構(gòu)。紡錘體由微管組成,這些微管通過動態(tài)變化,將染色體緊密地聯(lián)系在一起,并確保在細胞分裂過程中染色體的正確分離。成熟卵母細胞的紡錘體對溫度變化和機械刺激極為敏感,這使得其冷凍保存過程充滿了挑戰(zhàn)。紡錘體微管與細胞內(nèi)的其他細胞器存在復(fù)雜的相互作用。上海雙折射性紡錘體價格
胞質(zhì)膜
在動物細胞的細胞分裂結(jié)束時,母細胞在一個被稱為“胞質(zhì)分裂”的過程中分裂成兩個子細胞和分區(qū)隔離的染色體。有絲分裂紡錘體控制胞質(zhì)膜上的“胞質(zhì)分裂”事件,但連接這兩個宏觀結(jié)構(gòu)的機制一直不清楚。Mark Petronczki及其同事提供了一個結(jié)構(gòu)和功能分析結(jié)果,他們發(fā)現(xiàn)**紡錘體蛋白(紡錘體中間區(qū)域和中間體中的一個蛋白復(fù)合物)是有絲分裂紡錘體與胞質(zhì)膜間所缺失的聯(lián)系環(huán)節(jié),這個聯(lián)系環(huán)節(jié)確?!鞍|(zhì)分裂”過程的***結(jié)果。本文作者還發(fā)現(xiàn),**紡錘體蛋白的MgcRac***亞單元中的一個區(qū)域為一個“系繩”,它連接到胞質(zhì)膜中的磷酸肌醇脂質(zhì)上。 [4] 香港偏光成像紡錘體卵質(zhì)量評估在有絲分裂中,紡錘體形成并維持著染色體的穩(wěn)定性。
在生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,卵母細胞的冷凍保存技術(shù)一直是研究的熱點,旨在提高女性生育能力的保存與利用。然而,傳統(tǒng)的紡錘體觀察方法往往需要對卵母細胞進行固定和染色處理,這不僅破壞了細胞的活性,還限制了對其發(fā)育潛能的深入評估。偏光成像技術(shù),特別是Polscope偏振光顯微成像系統(tǒng),通過利用紡錘體微管結(jié)構(gòu)的雙折射性,實現(xiàn)了對紡錘體的無損觀察。這種技術(shù)無需對卵母細胞進行固定和染色,能夠在保持細胞活性的同時,實時、動態(tài)地觀察紡錘體的形態(tài)和變化。這不僅提高了觀察的準(zhǔn)確性和可靠性,還避免了傳統(tǒng)染色方法可能帶來的細胞損傷和誤差。
對卵子進行評估:胚胎學(xué)家指出:有紡錘體出現(xiàn)的卵母細胞有較高的受精率和胚胎發(fā)育率,也就是說紡錘體的存在與否,可以用來評價卵母細胞胞漿的成熟度。因此胚胎學(xué)家有三次通過紡錘體對我們的卵子進行評估的機會: (1)胚胎學(xué)家可以利用偏振光顯微鏡對卵子的紡錘體進行觀察,通過定量分析數(shù)據(jù)對卵子進行分級,挑選出正常分裂的卵子,也就是出現(xiàn)紡錘體的卵子,進而提高試管嬰兒的受精率。 (2)胚胎學(xué)家還可以通過紡錘體來確定體外培養(yǎng)成熟卵子(IVM)的成熟期,進而為體外成熟卵子進行評估,***提高試管嬰兒的受精率和胚胎發(fā)育率。 (3)由于紡錘體對環(huán)境溫度的改變非常敏感。溫度降至25℃時,只需要10分鐘的時間,就會紡錘體造成不可逆的損傷。所以冷凍復(fù)蘇過程中溫度改變很有可能對卵母細胞紡錘體和染色體造成損傷。因此胚胎學(xué)家可以應(yīng)用紡錘體成像幫助選擇復(fù)蘇后具有正常紡錘體的卵母細胞,進而可以提高受精率、卵裂率和臨床妊娠率。
綜上所述,通過***細胞的紡錘體成像技術(shù)可以避免輔助生殖技術(shù)對卵母細胞紡錘體的損傷,有助于選擇具有正常紡錘體的卵母細胞,有利于提高受精率、卵裂率和臨床妊娠率,利用更科學(xué)的方式,將讓求子路的終點不再那么遙遠。 紡錘體形成的精確性對于維持生物體遺傳穩(wěn)定性至關(guān)重要。
哺乳動物卵母細胞的紡錘體由微管組成,這些微管結(jié)構(gòu)精細且高度動態(tài),對溫度、滲透壓和機械力等外界因素極為敏感。在冷凍過程中,紡錘體容易因冰晶形成、滲透壓變化或機械損傷而遭到破壞,導(dǎo)致染色體分離異常,進而影響卵母細胞的發(fā)育潛力和受精后的胚胎質(zhì)量。選擇合適的冷凍保護劑是減少紡錘體損傷的關(guān)鍵。然而,不同濃度的冷凍保護劑對紡錘體的影響各異,且不同哺乳動物種類之間也存在差異。因此,需要通過大量實驗來優(yōu)化冷凍保護劑的配方,以大限度地保護紡錘體的完整性。紡錘體微管網(wǎng)絡(luò)的動態(tài)變化揭示了細胞分裂過程中分子層面的奧秘。深圳輔助生殖紡錘體Hoechst染料
紡錘體在細胞分裂中的精確調(diào)控是生物體發(fā)育的基礎(chǔ)。上海雙折射性紡錘體價格
紡錘體觀測儀使ICSI更加安全可靠
在進行單精子卵胞漿內(nèi)注射(ICSI)授精時,**初人們觀察人體內(nèi)成熟的卵母細胞時,通常認為,卵母細胞紡錘**于***極體附近,故傳統(tǒng)的ICSI操作是轉(zhuǎn)動卵母細胞使其***極**于6點或12點處,然后在3點處注入精子。但是,在大量使用紡錘體觀測儀后發(fā)現(xiàn),***極體并不能很好地預(yù)測紡錘體的位置。一項研究提示,在ICSI后,用紡錘體觀測儀觀察紡錘體與***極體的夾角,結(jié)果發(fā)現(xiàn)小于30°這組卵母細胞的正常受精率更高。極體在卵周隙中的移動,或者紡錘體在胞質(zhì)中的易位都使兩者的位置關(guān)系發(fā)生改變,普通光學(xué)顯微鏡下ICSI穿刺部位的選擇,可能會損傷紡錘體和(或)造成染色體的異常。通過紡錘體觀測儀,可以精確地對卵母細胞中紡錘體的位置進行定位,從而避免在ICSI過程中損傷紡錘體,使ICSI更加安全可靠。有文獻報道,在進行ICSI時,觀察到“雙折射紡錘體”的成熟卵母細胞的受精率和質(zhì)量胚胎率***高于未觀察到雙折射紡錘體組。也有學(xué)者發(fā)現(xiàn),有些卵母細胞在普通光學(xué)顯微鏡下看到是正常的,但在紡錘體觀測儀這個“照妖鏡”下,就能顯出原形,表現(xiàn)為有***極體、但缺乏雙折射的紡錘體,這類卵母細胞ICSI后的受精率和妊娠率極低。 上海雙折射性紡錘體價格
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