為什么具有“脆性卵膜”的卵子ICSI后容易退化?如下:一、卵子成熟度不足。卵子的成熟包括核成熟(以排出***極體為標(biāo)志)以及胞質(zhì)成熟,而胞質(zhì)成熟往往滯后于核成熟,兩者并不完全同步。有對照研究表明,脆性卵膜組的成熟卵細胞比例***低于正常破膜組,ICSI后卵子退化率也高于正常破膜組,這提示了卵子成熟度與卵膜脆性具有一定的相關(guān)性,并**終影響了卵子ICSI后是否存活。二、雌***水平。到目前為止,關(guān)于雌***水平對脆性卵膜的影響,現(xiàn)有的研究結(jié)論并不一致,但歸根到底仍然可能是通過影響卵子成熟來改變卵膜的特性。三、ICSI機械操作。一方面ICSI是侵襲性操作,可能破壞卵膜、細胞骨架等細胞器,另一方面是具有脆性卵膜的卵子缺乏“漏斗”的保護作用,細胞骨架和卵膜更容易在ICSI過程中崩解。為避免脆性卵膜卵子ICSI后退化,除了改善注射方式(如進針前利用激光穿透或削薄透明帶,操作盡可能輕柔等),還可采用改進的Piezo-ICSI(壓電脈沖破膜輔助ICSI),能有效改善注射后卵子退化的情況。此外,在臨床促排卵方面,也可考慮調(diào)整藥物用量,在保證卵泡大小均勻的情況下,盡量推遲扳機時間,提高卵母細胞成熟度,減輕ICSI后卵子退化的比例,以盡可能保證ART***的效果。壓電顯微操作儀PMM 6可用于兔子卵母細胞和胚胎的ICSI等實驗。日本精子制動壓電小鼠ICSI
有一類十分有趣的晶體,當(dāng)你對它擠壓或拉伸時,它的兩端就會產(chǎn)生不同的電荷。這種效應(yīng)被稱為壓電效應(yīng)。能產(chǎn)生壓電效應(yīng)的晶體就叫壓電晶體。水晶(α-石英)是一種有名的壓電晶體。如果按一定方向?qū)λЬw上切下的薄片施加壓力,那么在此薄片上將會產(chǎn)生電荷。如果按相反方向拉伸這一薄片,在此薄片上也會出現(xiàn)電荷,不過符號相反。擠壓或拉伸的力愈大,晶體上的電荷也會愈多。如果在薄片的兩端鍍上電極,并通以交流電,那么薄片將會作周期性的伸長或縮短,即開始振動。這種逆壓電效應(yīng)在科學(xué)技術(shù)中已得到了廣泛的應(yīng)用。用水晶可以制作壓電石英薄片,其面積不過數(shù)平方毫米,厚度則只有零點幾毫米。別小看這小小的晶片,它在無線電技術(shù)中卻發(fā)揮著巨大作用。如前所述,在交變電場中,這種薄片的振動頻率絲毫不變。這種穩(wěn)定不變的振動正是無線電技術(shù)中控制頻率所必須的,你家中的彩色電視機等許多電器設(shè)備中都有用壓電晶片制作的濾波器,保證了圖像和聲音的清晰度。你手上戴的石英電子表中有一個**部件叫石英振子。就是這個關(guān)鍵部件保證了石英表比其他機械表更高的走時準(zhǔn)確度。透明帶壓電平口針PRIME TECH PMM 6可用于DNA注射。
壓電式破膜儀的原理壓電式破膜儀的原理基于壓電效應(yīng)。當(dāng)壓電陶瓷通電后,它會產(chǎn)生高頻振動。這種振動被傳遞到顯微操作針上,使針產(chǎn)生振動。這種振動用于在顯微操作過程中打孔或穿孔細胞膜,特別是在哺乳動物胚胎透明帶細胞膜的穿孔任務(wù)中。壓電式破膜儀可以配合顯微操作臂和顯微注射儀使用,以提高克隆動物中核移植、小鼠ICSI等工作的成功率。由于壓電脈沖能直接無損失地傳輸?shù)讲僮麽樕?,使得細胞膜的穿孔更加精確和可靠。這種顯微操作方式提高了多種實驗的成功率,包括胚胎干細胞或誘導(dǎo)多能干細胞的寒胚移植、小鼠ICSI等。此外,壓電式破膜儀操作直觀、簡單快捷,具有可重復(fù)性的參數(shù)設(shè)置,實驗參數(shù)可記憶,也可以選用人體工程學(xué)腳踏或儀器上的旋鈕進行操作。
時值壓電效應(yīng)發(fā)現(xiàn)的一百周年,特參考馬遜(W.P.Mason)之作撰寫本文,簡介壓電性之歷史及其應(yīng)用。早期壓電效應(yīng)*止于學(xué)術(shù)上的趣味性研究,而如今則已成為非常有用的效應(yīng),用它制出各式各樣的聲電換能器,其操作頻譜可由100Hz起涵蓋至幾個GHz,依頻率的不同而有不同的用途。聲納、反潛、海底通訊、電話通訊等是低頻(聲頻、AF波段)訊號**典型的應(yīng)用。在幾個MHz范圍,其波長在毫米范圍,適合用來作非破壞性的檢驗材料(nondestructivetesting,簡稱NDT)與醫(yī)學(xué)診斷上,所謂超聲波成像術(shù)、全像攝影術(shù)、計算機輔助聲波斷層攝影術(shù)等就是針對這些用途而研究的。頻率在VHF、UHF波段則使用壓電性所研制出來的表面聲波電子組件。如延遲線、各式濾波器、回旋器(convolver)、相關(guān)器(correlator)等訊號處理組件,在通訊上與訊號處理上具有重要的應(yīng)用。當(dāng)頻率高至低微波波段,其對應(yīng)波長在微米范圍,用來制作聲學(xué)顯微鏡,其解像力可和傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡比美,而其機械波而非電磁波的獨特性質(zhì),則可彌補光學(xué)顯微鏡在應(yīng)用上的不足。“PIEZO PMM 6”是一種壓電顯微操作系統(tǒng),作為壓電注射的先驅(qū),投入了大量的資源進行其研發(fā)。
已有的流行病學(xué)研究顯示,單精子胞漿注射技術(shù)(Intracytoplasmic sperm injection,ICSI)可能導(dǎo)致出生小孩泌尿系統(tǒng)疾病的發(fā)生率增加.印記基因印記狀態(tài)的改變與泌尿系統(tǒng)疾病相關(guān),而ICSI操作正是發(fā)生在印記基因甲基化重新建立的關(guān)鍵時期,所以本研究的目的是研究ICSI技術(shù)對小鼠腎臟印記基因表達及甲基化狀況的影響,從分子水平上研究ICSI技術(shù)對子代泌尿系統(tǒng)的影響,建立ICSI小鼠模型,以2-細胞移植組和自然妊娠組為對照,分別取10周,1.5年小鼠腎臟,用real-time RT-PCR的方法測定h19,igf2,mest,peg3和snrpn的mRNA表達水平,對h19和snrpn進一步用亞硫酸鹽測序方法測定甲基化水平.我們的結(jié)果顯示***促排卵和單精子胞漿注射都能影響h19,mest,peg3和snrpn的mRNA表達水平,而mRNA表達水平的改變主要不是通過甲基化調(diào)控,提示ICSI操作確實會導(dǎo)致子代腎臟印記基因表達水平的改變,而引起這種改變的機制還需要進一步研究。PMM PIEZO-ICSI是一種先進的技術(shù),用于輔助生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的人工受孕過程。香港精子制動壓電胚胎干細胞
PMM通過將精子尾部與頭部割離,精子頭部吸入平口,在中低檔能量下即可穿透透明帶,進行單精子顯微注射。日本精子制動壓電小鼠ICSI
傳統(tǒng)的ICSI是通過授精針刺破卵子,將挑選好的精子注入使之受精。本質(zhì)上對卵子來說是一種物理性侵入,特別對于幼弱老化的卵子可能會有一定損傷的風(fēng)險。而全新的壓電式胞漿內(nèi)單精子注射(Piezo-ICSI)技術(shù),可以減少對卵子的傷害,相較于常規(guī)式的ICSI相比更能提高受精率。
Piezo-ICSI超音振動顯微受精法,采用極細(0.908毫米)的平口注射針,比常規(guī)的注射針(1.473mm)細小了將近一半,能夠?qū)⒙殉驳膫档奖容^低。另一方面,精子注射的過程對卵子的影響也極其重要。Piezo-ICSI技術(shù)通過超音振動來打開卵子透明帶再將精子注入,減少了對卵子的損傷,也能夠提高胚胎成功受精的幾率。研究數(shù)據(jù)顯示,以原有的人工授精療法ICSI與Piezo-ICSI進行比較,受精率從83.1%提高到90.3%,細胞分裂優(yōu)化由84.60%提高到88.10%。 日本精子制動壓電小鼠ICSI