Dulbecco’s改良培養(yǎng)基–DMEM（Dulbecco’sModifiedEagleMedium）是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的，與MEM培養(yǎng)基相比，氨基酸的含量增加了2倍，維生素的含量增加了4倍，同時(shí)還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉。DMEM培養(yǎng)基**初設(shè)計(jì)葡萄糖含量為1000mg/L（低糖型），后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L（高糖型），現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng)。針對(duì)***的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用，我們提供多種組分的DMEM改良培養(yǎng)基。高糖型培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長快、粘附性低的細(xì)胞、雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞、克隆細(xì)胞、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞、各種原代病毒宿主細(xì)胞、單一細(xì)胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產(chǎn)，例如利用CHO細(xì)胞表達(dá)EPO和生產(chǎn)乙肝疫苗。低糖培養(yǎng)基更適合代謝作用較慢、依賴性貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。不含葡萄糖的培養(yǎng)基可以根據(jù)研究需要，隨意調(diào)節(jié)葡萄糖的濃度，方便快捷。L-谷氨酰胺（Glutamine）是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素，但其在溶液中不穩(wěn)定，會(huì)自發(fā)降解，不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基，可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量，在使用時(shí)添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細(xì)胞的生長。 RPMI-1640是改進(jìn)型的McCoy ‘s 5A培養(yǎng)基，使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng)。河南醫(yī)用細(xì)胞培養(yǎng)基廠家直銷

    Ham’sF-12K培養(yǎng)基是Ham’sF-12營養(yǎng)混合物的Kaighn’s改進(jìn)型，在Ham’sF-12的基礎(chǔ)上提高了氨基酸和**酸的濃度，降低了葡萄糖的用量，并修改了鹽的成分和含量（Konigsbergs）。Ham’sF-12K培養(yǎng)基**初設(shè)計(jì)用于培養(yǎng)原代人肝細(xì)胞以及分化的大鼠和雞的細(xì)胞。針對(duì)較廣的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用，我們提供多種組分的Ham’sF-12K改良培養(yǎng)基。L-谷氨酰胺（Glutamine）是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素，但其在溶液中不穩(wěn)定，會(huì)自發(fā)降解，不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基，可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量，在使用時(shí)添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細(xì)胞的生長。NEAA（非必須氨基酸），是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天（門）冬酰胺、L-天（門）冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA，能降低細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞自身生產(chǎn)非必須氨基酸的副作用，有效促進(jìn)細(xì)胞增殖代謝。 云南實(shí)驗(yàn)細(xì)胞培養(yǎng)基全國發(fā)貨Eagle培養(yǎng)基是一種基本、適用范圍廣的培養(yǎng)基，是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中常用的培養(yǎng)基之一。

    細(xì)胞培養(yǎng)基的種類按照細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史，細(xì)胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基、無血清細(xì)胞培養(yǎng)基、限定化學(xué)成分細(xì)胞培養(yǎng)基等幾大種類。（balancedsaltsolution，BSS）BSS主要是由無機(jī)鹽、葡萄糖組成，它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡，保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)。其主要用于細(xì)胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank's與Hank's的一個(gè)主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因?yàn)镃a2+、Mg2+是細(xì)胞膜的重要組成成份，參與細(xì)胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細(xì)胞結(jié)團(tuán)。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液，前者緩沖能力較弱，適合于密閉培養(yǎng)；后者緩沖能力較強(qiáng)，適合于5%CO2的培養(yǎng)條件。表1-1幾種常用的BSS配方。

    L-谷氨酰胺（Glutamine）是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)素，但其在溶液中不穩(wěn)定，會(huì)自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸，其中氨對(duì)細(xì)胞有害；而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩(wěn)定，不會(huì)自發(fā)的降解。細(xì)胞利用其機(jī)制是：在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞會(huì)逐漸向培養(yǎng)液中釋放一種肽酶，將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺，而后細(xì)胞會(huì)將這兩種水解產(chǎn)物吸收利用。細(xì)胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養(yǎng)策略相似，連續(xù)的將低濃度水平的L-谷氨酰胺加入到培養(yǎng)液中，從而提高了L-谷氨酰胺的利用率，且不會(huì)生成多余的氨，更利于細(xì)胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨?？梢源娴饶柕腖-谷氨酰胺，適用于所有的細(xì)胞，幾乎無需適應(yīng)，并且可以延長細(xì)胞的培養(yǎng)時(shí)間，減少傳代次數(shù)，即節(jié)省了時(shí)間也節(jié)約了金錢。與添加L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細(xì)胞相比，活性降低得更慢。延滯期略微延長的原因是肽酶的釋放和二肽的消化需要一定的時(shí)間。NEAA（非必須氨基酸），是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天（門）冬酰胺、L-天（門）冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA，能降低細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞自身生產(chǎn)非必須氨基酸的副作用，有效促進(jìn)細(xì)胞增殖代謝。葡萄糖可以根據(jù)研究需要。Dulbecco’s 改良培養(yǎng)基增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉。

    無血清培養(yǎng)基中通常需要添加一些額外的組分，才能幫助細(xì)胞貼壁生長，包括以下幾大類物質(zhì)：1）促貼壁物質(zhì)：一般為細(xì)胞外基質(zhì)，如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細(xì)胞功能的分化因子，對(duì)許多細(xì)胞的繁殖和分化，起著重要作用。纖連蛋白主要促進(jìn)來自中胚層細(xì)胞的貼壁與分化，這些細(xì)胞包括成纖維細(xì)胞、肉瘤細(xì)胞、粒細(xì)胞、腎上皮細(xì)胞、腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞、CHO細(xì)胞、成肌細(xì)胞等。2）促生長因子：針對(duì)不同細(xì)胞添加不同的生長因子。也是刺激細(xì)胞生長、維持細(xì)胞功能的重要物質(zhì)，有些是許多細(xì)胞必不可少的，如胰島素。3）酶抑制劑：培養(yǎng)貼壁生長的細(xì)胞，需要用胰酶消化傳代，在無血清培養(yǎng)基中需含酶抑制劑，以終止酶的消化作用，達(dá)到保護(hù)細(xì)胞的目的。常用的是大豆胰酶抑制劑。4）結(jié)合蛋白和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白：常見如轉(zhuǎn)鐵蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比較大，可增加培養(yǎng)基的粘度，保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷。許多旋轉(zhuǎn)式培養(yǎng)的無血清培養(yǎng)基都含有牛血清白蛋白。5）微量元素：硒是常見的。RPMI-1640培養(yǎng)基初是為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)專門設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在已應(yīng)用于各種正常細(xì)胞ai細(xì)胞的培養(yǎng)。云南實(shí)驗(yàn)細(xì)胞培養(yǎng)基全國發(fā)貨

Ham’s F-12營養(yǎng)混合物（Ham’s F-12 Nutrient Mixture）是由Ham以Ham’s F-10營養(yǎng)混合物為基礎(chǔ)設(shè)計(jì)而成的。河南醫(yī)用細(xì)胞培養(yǎng)基廠家直銷

    Ham’sF-12K培養(yǎng)基是Ham’sF-12營養(yǎng)混合物的Kaighn’s改進(jìn)型，在Ham’sF-12的基礎(chǔ)上提高了氨基酸和**酸的濃度，降低了葡萄糖的用量，并修改了鹽的成分和含量（Konigsbergs）。Ham’sF-12K培養(yǎng)基**初設(shè)計(jì)用于培養(yǎng)原代人肝細(xì)胞以及分化的大鼠和雞的細(xì)胞。針對(duì)***的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用，我們提供多種組分的Ham’sF-12K改良培養(yǎng)基。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑，用以持續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)液的酸堿度，在低PH值時(shí)酚紅使培養(yǎng)液呈黃色，而較高的PH值時(shí)使培養(yǎng)液呈紫色，PH值～，**適合細(xì)胞培養(yǎng)。但酚紅也有一些缺點(diǎn)，研究表明酚紅可以模擬固醇類***（特別是雌***）的作用，因此在用到雌***敏感的細(xì)胞時(shí)（如乳腺組織），比較好使用不含酚紅的培養(yǎng)基。酚紅會(huì)干擾流式細(xì)胞分析時(shí)候的檢測。此外，一些無血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會(huì)干擾鈉-鉀平衡。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”，是體外培養(yǎng)中為預(yù)防微生物污染**常用的***，其中，青霉素能夠干擾細(xì)菌細(xì)胞壁的合成，對(duì)革蘭陽性菌特別有效；而鏈霉素能夠與細(xì)菌核糖體30S亞單位結(jié)合，抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成，對(duì)革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效，但對(duì)革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯(lián)合使用可以預(yù)防絕大部分的細(xì)菌污染。 河南醫(yī)用細(xì)胞培養(yǎng)基廠家直銷

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