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重慶醫(yī)用細胞培養(yǎng)基

來源: 發(fā)布時間:2024-05-11

    L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養(yǎng)中所必要的一種營養(yǎng),但其在溶液中不安定,會自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨對細胞危害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中格外的安定,不會自發(fā)的降解。細胞運用其機制是:在細胞培訓時,細胞會日益向培養(yǎng)液中獲釋一種肽酶,將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后細胞會將這兩種水解產物吸收運用。細胞運用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養(yǎng)方針相像,連續(xù)的將低濃度水準的L-谷氨酰胺加入到培養(yǎng)液中,從而提高了L-谷氨酰胺的利用率,且不會生成剩余的氨,更有利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以取而代之等摩爾的L-谷氨酰胺,適用于所有的細胞,幾乎無須適應,并且可以延長細胞的培養(yǎng)時間,縮減傳代次數,即節(jié)約了時間也節(jié)省了錢財。與添加L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基中培訓的細胞相比之下,活性減低得更慢。延滯期稍為延長的緣故是肽酶的釋放和二肽的消化需一定的時間。NEAA(非須要氨基酸),是在MEM培養(yǎng)基的基本上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(門)冬酰胺、L-天(門)冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA,能下降細胞培育時細胞自身生產非須要氨基酸的副作用,有效性推動細胞增殖代謝。葡萄糖可以根據研究需。M199特別適用于非轉化細胞的培養(yǎng),也常用于病毒學、以及大鼠胰腺上皮細胞和小鼠晶狀體組織的培養(yǎng)。重慶醫(yī)用細胞培養(yǎng)基

重慶醫(yī)用細胞培養(yǎng)基,細胞培養(yǎng)基

    RPMI-1640細胞培養(yǎng)基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀念研究所(RoswellParkMemorialInstitute,RPMI)開發(fā)出來的,RPMI是該研究所開發(fā)的一類細胞培養(yǎng)基,1640是培養(yǎng)基代號。RPMI-1640是改進型的McCoy‘s5A培養(yǎng)基,使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng),與大多數哺乳動物細胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養(yǎng)基常用初是為淋巴細胞培養(yǎng)專門設計的,現(xiàn)在已廣泛應用于各種正常細胞和ai細胞的培養(yǎng),包括HeLa細胞、Jurkat細胞、MCF-7細胞、PC12細胞、PBMC細胞、星形膠質細胞和ai細胞,是使用常用為比較多的培養(yǎng)基之一。RPMIRPMI1640培養(yǎng)基相比其他培養(yǎng)基之所以具有獨特的效果,是因為其中含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。RPMI1640培養(yǎng)基含有生物素、維生素B12以及PABA,這些成分是Eagle’sMEM和DMEM所不具備的。針對細胞培養(yǎng)應用,我們提供多種組分的RPMI1640改良培養(yǎng)基。貴州昆蟲細胞培養(yǎng)基批發(fā)廠M199有兩種平衡鹽成分,Earle’s鹽成分常用于CO2環(huán)境,Hank’s鹽成分用于非CO2的環(huán)境。

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    Leibovitz’sL-15培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)由磷酸鹽和游離堿基氨基酸組成,代替了傳統(tǒng)的碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng),同時,用半乳糖和**酸鈉代替葡萄糖可以防止酸性代謝副產物的形成,有助于維持培養(yǎng)液PH的穩(wěn)定,適合用于非CO2平衡環(huán)境的細胞培養(yǎng)。Leibovitz’sL-15培養(yǎng)基適用于猴腎細胞和HEP-2的培養(yǎng)、原代(如胚胎和成人組織)細胞分離、多種病毒的培養(yǎng)以及神經元的培養(yǎng)等。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”,是體外培養(yǎng)中為預防微生物污染常用的***,其中,青霉素能夠干擾細菌細胞壁的合成,對革蘭陽性菌特別有效;而鏈霉素能夠與細菌核糖體30S亞單位結合,抑制細菌蛋白質的合成,對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效,但對革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯(lián)合使用可以預防絕大部分的細菌污染。本產品含有多類細胞培養(yǎng)所需的氨基酸、維生素、無機鹽等多種成分,但不含蛋白質、脂類或任何生長因子,故此產品需搭配血清或無血清添加物使用。

    RPMI-1640細胞培養(yǎng)基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀念研究所(RoswellParkMemorialInstitute,RPMI)開發(fā)出來的,RPMI是該研究所開發(fā)的一類細胞培養(yǎng)基,1640是培養(yǎng)基代號。RPMI-1640是改進型的McCoy‘s5A培養(yǎng)基,采用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng),與大多數哺乳動物細胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養(yǎng)基**初是為淋巴細胞培訓專門設計的,現(xiàn)在已普遍應用于各種正常細胞和惡性**的培養(yǎng),包括HeLa細胞、Jurkat細胞、MCF-7細胞、PC12細胞、PBMC細胞、星形膠質細胞和惡性**,是采用極其普遍的培養(yǎng)基之一。RPMIRPMI1640培養(yǎng)基相比之下其他培養(yǎng)基之所以具與眾不同的功效,是因為其中富含還原劑谷胱甘肽和高濃度的維他命。RPMI1640培養(yǎng)基包含生物素、維他命B12以及PABA,這些成份是Eagle’sMEM和DMEM所不具備的。針對普遍的細胞培養(yǎng)應用,我們提供多種組分的RPMI1640改進培養(yǎng)基。Dulbecco’s 改良培養(yǎng)基增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉。

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    培養(yǎng)液的滲透壓是一個非常重要的因素,細胞通??赡褪?60mOsm/kg~320mOsm/kg。標準培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內波動。特別注意:向培養(yǎng)液中加入其它物質有可能會明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓,特別是溶于強酸或強堿中的物質。向培養(yǎng)液中添加HEPES時需按以下方法調節(jié)鈉離子濃度。緩沖系統(tǒng)大多數細胞所需pH在-。但是,細胞培養(yǎng)適pH值隨培養(yǎng)的細胞種類不同而不同。成纖維細胞喜歡較高pH(-),而傳代轉化細胞系則需要偏酸pH(-)。由于多數培養(yǎng)液靠碳酸氫鈉(NaHCO3)與CO2體系進行緩沖,因此,氣相中的CO2濃度應與培養(yǎng)液中碳酸氫鈉濃度相平衡。如果氣相或培養(yǎng)箱空氣中CO2濃度設定在5%,培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為;如果CO2濃度維持在10%,培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為。細胞培養(yǎng)瓶蓋不應擰得太緊,以保證氣體交換。HEPES是一種非離子緩沖液,在pH-范圍內具有較好的緩沖能力,但是非常昂貴,在高濃度時對一些細胞可能有毒。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉()共用,以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加。在這種培養(yǎng)條件下,細胞培養(yǎng)瓶的蓋子應擰緊,以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。大多數培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH指示劑,酸性培養(yǎng)液呈橙黃色,堿性培養(yǎng)液呈深紅色。DMEM培養(yǎng)基**初設計葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型)。廣西華晨陽細胞培養(yǎng)基全國發(fā)貨

Ham’s F-10適合用于人二倍體細胞的培養(yǎng),低血清條件下細胞的克隆化培養(yǎng),及動物的原代細胞培養(yǎng)。重慶醫(yī)用細胞培養(yǎng)基

    可在血清含量低時用,適用于克隆化培養(yǎng)。F12適用于CHO細胞,也是無血清細胞培養(yǎng)基中常用的基礎細胞培養(yǎng)基。DMEM/F12細胞培養(yǎng)基將DMEM和F12按照1:1比例混合,混合后營養(yǎng)成份豐富,血清使用量也減少。常作為開發(fā)無血清細胞培養(yǎng)基時的基礎細胞培養(yǎng)基。與天然培養(yǎng)基相比,有些天然的未知成分尚無法用已知的化學成分所替代,因此,細胞培養(yǎng)中使用合成培養(yǎng)基時必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分,以克服合成培養(yǎng)基的不足。普遍的做法是添加5~10%的血清,這樣才能維持細胞活力,促進細胞增殖。針對不同的動物細胞,現(xiàn)已開發(fā)了多種商業(yè)化、個性化的低血清細胞培養(yǎng)基配方,營養(yǎng)成份更加豐富,血清使用量可降低至1~3%,由此可減少了血清等動物來源成份對生物制品安全性的影響。無血清細胞培養(yǎng)基(serumfreemedium,SFM)經歷了天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基后,無血清培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)成為當今細胞培養(yǎng)領域的一大趨勢。采用無血清培養(yǎng)可降低生產成本,簡化分離純化步驟,避免病毒污染造成的危害。無血清培養(yǎng)基,一般是在合成培養(yǎng)基的基礎上,加入成份完全明確的或部分明確的血清替代成份,達到既能滿足動物細胞培養(yǎng)的要求,又能有效克服使用血清所帶來問題的目的。重慶醫(yī)用細胞培養(yǎng)基

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