甘氨酸培養(yǎng)基是一種專門用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基,其特點主要包括:1.**培養(yǎng)基成分**:甘氨酸培養(yǎng)基通常包含布氏肉湯、瓊脂和甘氨酸。其中,甘氨酸是該培養(yǎng)基的關(guān)鍵成分,通常添加量為10.0克/升。2.**pH調(diào)節(jié)**:甘氨酸培養(yǎng)基的pH值一般調(diào)節(jié)在7.0±0.2(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進行滅菌處理,通常采用121℃高壓滅菌15分鐘。4.**用途**:甘氨酸培養(yǎng)基主要用于彎曲桿菌甘氨酸耐受性試驗,如GB標準所規(guī)定的。它特別適用于空腸彎曲菌和大腸彎曲菌的分離和培養(yǎng),因為這些細菌對甘氨酸有耐受性。在微需氧環(huán)境下,于42℃培養(yǎng)48小時后,若培養(yǎng)基表面出現(xiàn)云霧狀現(xiàn)象,則為陽性結(jié)果。5.**培養(yǎng)特征**:在甘氨酸培養(yǎng)基上,空腸彎曲桿菌能夠產(chǎn)生灰色、濕潤、平鋪的菌落,并且可能帶有金色金屬光澤。6.**制備方法**:將甘氨酸培養(yǎng)基的粉末成分溶解在適量的蒸餾水中,加熱以幫助溶解,然后進行滅菌處理。在冷卻至大約50°C時,可以進行倒平板或分裝試管。7.**儲存條件**:甘氨酸培養(yǎng)基通常需要在干燥、避光的條件下儲存,以保持其有效性。海藻糖-脯氨酸培養(yǎng)基被推薦用于稀有放線菌的分離培養(yǎng)基,因為它有助于提高稀有放線菌的出菌率 。酵母氮源瓊脂平板
變異鏈球菌(Streptococcusmutans)是一種在口腔中發(fā)現(xiàn)的細菌,與齲齒的形成有關(guān)。它是一種革蘭陽性球菌,常以成對或短鏈狀排列。在胰蛋白胨培養(yǎng)基中和含有95%氮氣及5%二氧化碳混合氣體的環(huán)境下生長良好。對于變異鏈球菌的培養(yǎng),通常使用TSA+5%脫纖維蛋白羊血(血瓊脂平板)作為培養(yǎng)基。在這種培養(yǎng)基上,變異鏈球菌的菌落特征為較?。ㄖ睆郊s1mm)、灰白色、凸起、邊緣不齊、干燥、有α溶血環(huán)。在選擇培養(yǎng)基時,需要考慮培養(yǎng)基的pH值、營養(yǎng)成分、氧氣需求和抑制劑等因素,以確保目標細菌能夠在抑制雜菌的同時良好生長。例如,改良愛德華培養(yǎng)基(Edwardmodifiedmedium)是一種常用的培養(yǎng)基,它含有血液、血清或其它營養(yǎng)成分,適合于培養(yǎng)對營養(yǎng)要求較高的細菌,如鏈球菌。在實驗室中,變異鏈球菌的培養(yǎng)和鑒定是一個多步驟的過程,包括接種、培養(yǎng)、觀察菌落特征、進行生化試驗和藥敏分析等。通過這些步驟,可以準確地識別和鑒定變異鏈球菌,從而為臨床診斷提供依據(jù)??耸想p糖鐵瓊脂(KI)平板克氏雙糖鐵試驗時間通??刂圃?8-24小時,以確保細菌發(fā)酵充分且不過度,避免影響判斷結(jié)果。
富集培養(yǎng)基是一種特殊的培養(yǎng)基,它的設(shè)計旨在促進某類特定微生物的生長和繁殖,同時抑制或阻止其他微生物的生長。這種培養(yǎng)基常用于從環(huán)境樣品中分離和富集目標微生物,如細菌、或古菌等。以下是富集培養(yǎng)基的一些關(guān)鍵特點和應用:1.**特定營養(yǎng)添加**:富集培養(yǎng)基通常包含有利于目標微生物生長的特定營養(yǎng)物質(zhì),如有機和無機營養(yǎng)物、酸堿度調(diào)節(jié)劑、抗生物質(zhì)等。2.**選擇性抑制**:通過添加某些化學物質(zhì),如染色劑、結(jié)構(gòu)類似物和食鹽等,抑制非目標微生物的生長。3.**環(huán)境條件控制**:根據(jù)目標微生物對pH、溫度、氧氣需求等條件的特殊要求,調(diào)節(jié)培養(yǎng)條件以促進其生長。4.**促進復蘇**:某些情況下,富集培養(yǎng)基可以用來促進處于休眠狀態(tài)的微生物復蘇,從而提高分離效率。5.**應用廣**:富集培養(yǎng)基在微生物學研究、醫(yī)學診斷、環(huán)境保護、食品檢測等領(lǐng)域有廣泛應用。6.**操作過程**:包括樣本采集、稀釋、選擇適當?shù)母患囵B(yǎng)基和培養(yǎng)條件、以及后續(xù)的分離和鑒定。7.**連續(xù)富集培養(yǎng)**:有時需要通過連續(xù)轉(zhuǎn)移培養(yǎng)來逐步提高目標微生物的比例,尤其是在處理難以培養(yǎng)的微生物時。
DTA培養(yǎng)基,也稱為葡萄糖胰蛋白胨瓊脂,是一種用于分離培養(yǎng)嗜熱菌芽孢的培養(yǎng)基。以下是它的一些主要特點:1.**用途**:DTA培養(yǎng)基主要用于乳制品中嗜熱需氧芽孢菌計數(shù),以及嗜熱菌芽孢(包括需氧芽孢總數(shù)、平酸芽孢和厭氧芽孢)的分離培養(yǎng)。2.**成分**:其配方包含胰酪蛋白胨、葡萄糖、瓊脂和溴甲酚紫。具體成分為每升培養(yǎng)基中包含胰酪蛋白胨10.0克、葡萄糖5.0克、瓊脂15.0克和溴甲酚紫0.04克。3.**pH值**:DTA培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在6.7±0.1(25℃)。4.**檢驗原理**:胰酪蛋白胨提供碳氮源、維生素和生長因子;葡萄糖作為可發(fā)酵的糖,溴甲酚紫作為酸堿指示劑;瓊脂作為凝固劑。5.**用法**:稱取DTA培養(yǎng)基30.0g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。6.**生長特征**:嗜熱脂肪芽孢桿菌在DTA培養(yǎng)基上的生長特征為黃色菌落。7.**質(zhì)量控制**:進行微生物靈敏度試驗時,按標簽用法制備培養(yǎng)基,接種質(zhì)控菌株,放置55℃需氧培養(yǎng)48小時。回收率計算時,用TSA瓊脂做對照培養(yǎng)基。8.**儲存條件**:DTA培養(yǎng)基應貯存于避光、干燥處,用后立即旋緊瓶蓋;貯存期三年。CVT瓊脂含有胰酪蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、結(jié)晶紫、TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)和瓊脂等成分。
TYC培養(yǎng)基(TryptoneYeastCystineMedium)是一種用于分離口腔中鏈球菌(Streptococcusspp)的選擇性培養(yǎng)基。除了用于分離血鏈球菌外,TYC培養(yǎng)基也可以用于制備變形鏈球菌(Streptococcusmutans)的分離培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基的配方包含胰蛋白胨、酵母浸粉、L-胱氨酸、亞硫酸鈉、氯化鈉、磷酸氫二鈉、碳酸氫鈉、無水乙酸鈉和蔗糖等成分,瓊脂作為凝固劑,pH值調(diào)整至7.3±0.2(25℃)。TYC培養(yǎng)基通過其成分提供了細菌生長所需的氮源、碳源、維生素和生長因子。其中,L-胱氨酸和亞硫酸鈉有助于抑制某些非目標細菌的生長,而促進目標鏈球菌的生長。此外,TYC培養(yǎng)基也可以添加桿菌肽(0.2U/ml)以增加其選擇性。在實驗室中,TYC培養(yǎng)基通常按照以下方法配制:1.稱取98.0g培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水中。2.加熱煮沸至完全溶解。3.分裝后,在121℃高壓下滅菌15分鐘。4.滅菌結(jié)束后搖勻,以防瓊脂沉積于器皿底部而凝固。5.如有需要,培養(yǎng)基冷卻至50~55℃時,可選擇性添加過濾除菌的桿菌肽0.2U/ml以增加選擇性。TYC培養(yǎng)基在微生物學研究和臨床診斷中具有重要應用,特別是在口腔微生物的檢測和研究中。長雙歧桿菌和嬰兒雙歧桿菌在PYG培養(yǎng)基上的生長情況通常表現(xiàn)為圓形凸起,奶油色,邊緣整齊光滑的菌落 。GVPC瓊脂培養(yǎng)皿
PK瓊脂培養(yǎng)基的制備通常包括將干燥的培養(yǎng)基粉末與適量的水混合,加熱至瓊脂完全溶解,然后分裝到培養(yǎng)皿中。酵母氮源瓊脂平板
使用TCBS瓊脂進行細菌分離實驗的步驟如下:1.**準備工作**:-確保實驗室無菌操作條件,穿戴適當?shù)膶嶒灧褪痔住?準備無菌的接種環(huán)、涂布器、無菌吸管和移液器等工具。2.**配制培養(yǎng)基**:-按照培養(yǎng)基包裝上的說明,稱取適量的TCBS瓊脂粉末。-將稱取的TCBS瓊脂粉末加入到適量的蒸餾水中,通常為100mL。-將混合物加熱至沸騰,以確保瓊脂完全溶解。3.**冷卻和傾注平板**:-將溶解好的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右(避免過熱,以免殺死細菌),此時瓊脂應該仍然是液體狀態(tài)。-將冷卻的培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中,一般傾注量為15-20mL/平皿。-等待瓊脂凝固,形成固體培養(yǎng)基平板。4.**接種樣品**:-使用無菌操作,將待檢測的樣品涂布或劃線接種到TCBS瓊脂平板上。-可以使用稀釋涂布法、螺旋接種法或其他適當?shù)慕臃N方法。5.**培養(yǎng)**:-將接種后的平板倒置,放入恒溫培養(yǎng)箱中。-根據(jù)實驗要求,通常在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時。6.**觀察和選擇菌落**:-培養(yǎng)結(jié)束后,觀察平板上的生長情況,記錄不同類型菌落的特征。-選擇性地挑選出特定的菌落,如藍綠色或黃色菌落,這些可能是目標弧菌。