注：建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學曲線，從而確定比較高信號檢測時間和信號平臺期。保存和操作的過程中都要避光。另外水溶性儲存液過濾除菌后，可以-20℃或-80℃分裝凍存，避免反復凍融。如果有條件，對儲存液充氮氣或氬氣（防止氧化），穩(wěn)定性和保存時間更長。 注射方式，動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射，因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學曲線，確定比較好信號平臺期和比較好的檢測時間。熒光素鉀鹽和熒光素鈉鹽應用上沒有差別，兩者的差別在于物理性狀上如外形和溶解性。鈉鹽的水溶性高于鉀鹽。從目前發(fā)表的文獻來看，鉀鹽的使用率遠高于鈉鹽，尤其是體內(nèi)實驗。兩者功效相同。 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作?；ㄇ囝悷晒馊玖蠈儆诠舱袢玖希涮卣髟谟诰哂须x域電荷的氮原子（兩個氮原子）之間的聚甲炔染料。海南熒光染料Fluor 750

一、體外生物發(fā)光試驗熒光素試劑的制備：D-熒光素，鉀鹽，無菌純水，完全培養(yǎng)基（自行配置）1、用無菌水制備100X熒光素原液（15mg/ml），輕輕顛倒搖動至熒光素完全溶解?；靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b后-20℃凍存。2、將D-luciferin，potassiumsalt溶解于預熱好的組織培養(yǎng)基中制備成濃度為150μg/ml的工作液。用組織培養(yǎng)基1∶100稀釋儲存液，配置工作液(終濃度150μg/mL)3、去除培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基圖像分析前，向細胞培養(yǎng)板中添加1×熒光素工作液，然后進行圖像分析-注射器濾膜過濾除菌，0.2μm注：成像前在37℃下對細胞進行短時間孵育可增強信號。海南熒光染料Fluor 750羅丹明123一種可對活細胞線粒體染色的細胞染色試劑。

熒光染料，由于靈敏度高，操作方便，逐漸取代了放射性同位素作為檢測標記，其廣泛應用于熒光免疫，熒光探針，細胞染色等。包括特異性的DNA染色，用于染色體分析、細胞周期、細胞凋亡等相關研究。另有很多核酸染料在多色染色系統(tǒng)中是非常有用的復染劑，可作為背景對照，標記細胞核使細胞內(nèi)結構的空間關系一目了然。熒光標記的單克隆抗體技術為流式細胞儀在研究細胞膜和細胞內(nèi)各種功能性抗原、**基因蛋白等領域擴展了無限的應用空間。熒光探針可以通過蛋白質交聯(lián)劑共價結合在單克隆抗體上。免疫熒光標記**常用的染料有異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)、藻紅蛋白(PE)以及AlexaFluor系列染料等。核酸熒光染料對細胞核染色后定量測量細胞所發(fā)出的熒光強度，就可以確定細胞核中DNA、RNA的含量，并可以對細胞周期和細胞的增殖狀況進行分析。有多種熒光染料可以對細胞中的DNA或RNA染色，常用的DNA染料包括碘化丙啶(PI)、DAPI、Hoechst33342等，RNA染料有噻唑橙、吖啶橙等。

DiD，DiO，DiI，DiR和DiS染料是一族親脂性的熒光染料，可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結構。當與細胞膜結合后其熒光強度**增強，這類染料有著很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。一旦對細胞染色，這類染料在整個細胞膜上擴散，比較好濃度時可以使整個細胞膜染色。它們的熒光顏**分明顯：DiI（橙色熒光），DiO（綠色熒光），DiD（紅色熒光）和 DiR （深紅色熒光）這使得他們可以用來對活細胞進行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分別用標準的 FITC和TRITC的濾光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激發(fā)，有著比DiI更長的激發(fā)波長和發(fā)射波長，在細胞和組織染色中更有價值。 DiR的紅外熒光可以穿透細胞和組織，在***成像中用來示蹤。D-熒光素鉀鹽南京星葉生物科技有限公司。

藻紅蛋白-藻紅蛋白(PE)是一種紅色蛋白色素復合物，屬于藻膽蛋白家族。它可以在紅藻和隱植物中找到，它作為葉綠素色素的附屬物。在生物科學中，熒光團可以與蛋白質結合，例如用于抗原檢測的抗體等，因為它能夠發(fā)出明亮的熒光。由于熒光團往往會很快發(fā)生光漂白，因此很少在熒光顯微鏡中使用。它經(jīng)常用于流式細胞術。※別藻藍蛋白(APC)-與藻紅蛋白一樣，別藻藍蛋白也屬于藻膽蛋白家族，是從紅藻中分離出來的。在594和633nm的激光線激發(fā)下，熒光團的比較大吸光度在650nm處，而熒光發(fā)射峰在66nm處。與熒光素偶聯(lián)物相比，熒光團的靈敏度已顯示高5至10倍，并具有許多其他有益特性，包括大斯托克斯位移、高水溶性、長波長發(fā)射和耐猝滅。雖然別藻藍蛋白通常不用于需要光穩(wěn)定性的應用，但它***用于流式細胞術、ELISA、微陣列等過程以及各種依賴高靈敏度的應用。PI是一種可對DNA染色的細胞核染色試劑，它在嵌入雙鏈DNA后釋放紅色熒光。湖南熒光染料Fluor 555

非磺化花青類染料- 該組中的一些染料包括 cy3、cy3.3、cy5、cy5.5、cy7 和 cy7.5。海南熒光染料Fluor 750

其他細胞結構常用染料生物染料在細胞結構和組分鑒定中有著廣泛的應用，除細胞膜研究外，我們經(jīng)常也會對一些其它細胞結構及成分進行探索，例如線粒體、溶酶體、蛋白質、細胞核等，而對于不同的細胞結構有不同的染料進行染色細胞染色神器DAPI+PhalloidinDAPI染色液（DAPIStainingSolution）常用于細胞核染色，可將細胞核染成藍色。鬼筆環(huán)肽（Phalloidin）是細胞骨架的染色神器，羅丹明標記的Phalloidin（TRITC-Phalloidin）可將細胞染成橙紅色，DAPI與Phalloidin染色液是研究細胞形態(tài)變化時經(jīng)常用到的兩種共染的試劑，染色效果可見A1-E1用TRITC-鬼筆環(huán)肽（橙紅）染色的細胞骨架免疫熒光圖；A2-E2用DAPI（藍色）染色的細胞核免疫熒光圖；A3-E3合并的L929細胞免疫熒光染色圖。是S100A16過表達或下調(diào)前后PDAC細胞形態(tài)的變化。海南熒光染料Fluor 750

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