小動(dòng)物***熒光成像技術(shù)是現(xiàn)***物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的一項(xiàng)重要技術(shù)，因其具有操作簡(jiǎn)單、實(shí)時(shí)直觀、靈敏度高、實(shí)驗(yàn)成本低等特點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)研究及藥物開發(fā)等方面。納米材料在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用，旨在解決傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)面臨的各種醫(yī)學(xué)挑戰(zhàn)，包括生物利用度差，靶向特異性受損，全身和***毒性等。納米材料具有很多與眾不同的優(yōu)點(diǎn)，比如多功能性、大的負(fù)載量、靶向性、血液循環(huán)時(shí)間長(zhǎng)等。納米材料在生物醫(yī)學(xué)中起著關(guān)鍵作用，可以有效攜帶成像探針、***劑或生物材料并傳遞至靶點(diǎn)，如特定的***、組織甚至細(xì)胞。光學(xué)成像主要包括生物發(fā)光（ｂｉｏｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅｉｍａｇｉｎｇ，ＢＬＩ）和焚光成像（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｍａｇｉｎｇ，Ｆ１）兩種技術(shù)。前者利用焚光素酶基因（如ＦＬＵＣ，ＲＬＵＣ，ＧＬＵＣ）標(biāo)記細(xì)胞或ＤＮＡ，其表達(dá)產(chǎn)物與莖火蟲素類底物反應(yīng)產(chǎn)生熒光。后者包括多種熒光蛋白基因（如ＧＦＰ，ＲＦＰ，ＹＦＰ等）、有機(jī)熒光染料、熒光上轉(zhuǎn)換納米粒子、量子點(diǎn)等的應(yīng)用。 D-熒光素（D-Luciferin）是螢火熒光素酶底物，其量子效率為0.88，是Luminol的20倍。ivis熒光染料流式細(xì)胞

琥珀酰亞胺酯（Succinimidylesters）/NHS酯活性熒光染料用于標(biāo)記抗體，蛋白質(zhì)，肽，胺修飾的寡核苷酸和其他生物分子上的游離氨基（-NH2）2、馬來(lái)酰亞胺（Maleimides）活性熒光染料用于標(biāo)記抗體，蛋白質(zhì)和肽上的巰基3、疊氮化物(Azides)活性熒光染料通過(guò)點(diǎn)擊化學(xué)法（Click）標(biāo)記乙烯基4、炔烴(Alkynes)活性熒光染料通過(guò)點(diǎn)擊化學(xué)方法標(biāo)記疊氮化物5、羧酸(Carboxylicacids)活性熒光染料經(jīng)碳二亞胺預(yù)活化后用于標(biāo)記胺或用于醇的Steglich酯化6、氨基(Amines)活性熒光染料具有游離氨基的熒光染料，用于與各種親電子化合物（如活化的酯和環(huán)氧化物）偶聯(lián)。陜西高分子熒光染料目前常用標(biāo)記蛋白/抗體的熒光素主要有BODIPY類、香豆素類、羅丹明類、近紅外類、NBD胺類以及菁染料等。

CY5.5-NHS熒光染料是一種廣泛應(yīng)用于生物標(biāo)記和成像的熒光染料，CY5.5-NHS熒光染料具有優(yōu)異的熒光性能。其激發(fā)波長(zhǎng)約為675nm，發(fā)射波長(zhǎng)約為695nm，位于紅色光譜區(qū)域，這使得它在生物樣本中具有較強(qiáng)的穿透力，能夠深入組織內(nèi)部進(jìn)行標(biāo)記和成像。此外，CY5.5-NHS熒光染料具有較高的熒光量子產(chǎn)率和光穩(wěn)定性，可以在較長(zhǎng)時(shí)間的激發(fā)下保持穩(wěn)定的熒光信號(hào)，從而確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。CY5.5-NHS熒光染料作為一種***的熒光染料，在生物科學(xué)研究領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。其優(yōu)異的熒光性能、良好的生物相容性、***的適用范圍以及易于合成和修飾的優(yōu)點(diǎn)，使得它成為生物醫(yī)學(xué)研究中不可或缺的重要工具。

Hoechst33342是一種可透過(guò)細(xì)胞膜并對(duì)DNA染色的細(xì)胞核染色試劑，它在嵌入雙鏈DNA后釋放強(qiáng)烈的藍(lán)色熒光。Hoechst33342常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。Hoechst33342-DNA的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為350nm和460nm?？扇苡谒?。4.染色程序：（1）用PBS或合適的緩沖液制備10～50μMHoechst33342染料。（2）將1/10細(xì)胞培養(yǎng)基體積的Hoechst染料溶液加入細(xì)胞培養(yǎng)物中（可以用1/10濃度的Hoechst染料緩沖液代替培養(yǎng)基）。（3）在37℃培養(yǎng)細(xì)胞10～20分鐘。（4）用PBS或合適的緩沖液洗細(xì)胞兩次。（5）用帶有350nm激發(fā)波長(zhǎng)，460nm發(fā)射波長(zhǎng)的濾光片的熒光顯微鏡觀察細(xì)胞。DiD，DiO，DiI，DiR和DiS染料是一族親脂性的熒光染料，可以用來(lái)染細(xì)胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。

FITC熒光標(biāo)記蛋白的應(yīng)用及特點(diǎn):活性熒光染料，如FITC、7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)、羅丹明B(RhodamineB)或AlexaFluor染料，可用于標(biāo)記抗體或蛋白質(zhì)功能基團(tuán)，生成分子探針，并通過(guò)熒光成像進(jìn)行檢測(cè)。當(dāng)用熒光染料化學(xué)標(biāo)記特異性抗體或其他純化生物分子時(shí)，它們成為用于檢測(cè)靶抗原或相互作用配偶體的熒光探針，用于細(xì)胞成像、流式細(xì)胞手術(shù)、蛋白質(zhì)痕跡和酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)。由于熒光標(biāo)記物具有無(wú)放射物污染、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)，在蛋白質(zhì)功能研究、藥物篩選等許多研究領(lǐng)域得到了越來(lái)越廣泛的應(yīng)用。

南京星葉生物科技有限公司Super Fluor 系列（效果同Alexa Fluor系列）

且Super Fluor活化酯（與Invitrogen的Alexa Fluor活化酯完全相同） 羅丹明123一種可對(duì)活細(xì)胞線粒體染色的細(xì)胞染色試劑。廈門熒光染料Cy5.5

FITC熒光染料標(biāo)記方法。ivis熒光染料流式細(xì)胞

選擇熒光染料時(shí)要考慮那些因素：激發(fā)波長(zhǎng)處的消光系數(shù)應(yīng)盡可能高：消光系數(shù)是衡量可以吸收多少光子的量度。量子產(chǎn)率應(yīng)該盡可能高：這是吸收光子與發(fā)射光子的比率。消光系數(shù)和量子產(chǎn)率的乘積就是亮度。熒光染料應(yīng)該是光穩(wěn)定的：遺憾的是，比較不同公司染料的光穩(wěn)定性的研究并不多。光致變色行為：對(duì)于STORM實(shí)驗(yàn)，您需要一個(gè)閃爍的熒光團(tuán)。但是，對(duì)于分子跟蹤實(shí)驗(yàn)，您***不想要閃爍的熒光團(tuán)?；?死細(xì)胞滲透性。您想要的反應(yīng)側(cè)基（例如HaloTag、抗體等）。當(dāng)您使用多個(gè)熒光探針時(shí)，尤其是當(dāng)您量化共定位時(shí)，請(qǐng)謹(jǐn)慎處理其他顏色通道中的滲色。單獨(dú)測(cè)試所有熒光探針以評(píng)估滲透。ivis熒光染料流式細(xì)胞