5.熒光標記的定量分析：通過測量熒光信號的強度，可以對載藥脂質體中藥物的含量進行定量分析。這對于確定藥物的釋放量、藥物在體內的濃度以及載藥脂質體的穩(wěn)定性等方面至關重要。熒光標記可以提供一個快速、準確的定量檢測方法，為藥物輸送系統的研究和應用提供了便利。6.探索藥物的藥代動力學：熒光標記的載藥脂質體可以用于研究藥物的藥代動力學，包括藥物的吸收、分布、代謝和排泄過程。通過監(jiān)測熒光信號的變化，可以跟蹤藥物在體內的動態(tài)變化，從而更好地理解藥物的藥效學特性。7.提高***效果：熒光標記的載藥脂質體還可以用于提高***效果。通過熒光標記，可以實現對***部位的精確定位和定量釋放，從而提高藥物的局部濃度和***效果，減少對健康組織的損傷和副作用。8.研究藥物的靶向性：熒光標記的載藥脂質體可以用于研究藥物的靶向性。通過將靶向配體或抗體與熒光標記的載藥脂質體結合，可以實現對靶向部位的定位和跟蹤，從而更好地了解藥物的靶向性和作用機制。脂質體制備方法：薄膜?化法。綠色熒光脂質體載藥注射

1脂質體結構

脂質體根據室室結構和層狀結構可分為單層囊泡(ULVs)、寡層囊泡(OLVs)、多層囊泡(MLV)和多泡脂質體(MVLs)。OLVs和MLV呈陰離?樣結構，但分別存在2-5和>5個同?脂質雙分?層。與MLV不同，MVLs包括數百個由單層脂質膜包圍的?同??室，并呈現蜂窩狀結構。根據顆粒??，ULVs可進?步分為?單層囊泡(SUVs，30-100nm)、?單層囊泡(LUVs，>100nm)和?單層囊泡(LUVs，>1000nm)。Arikaye(阿?卡星脂質體吸?懸浮液)因其?粒徑(200-300nm)?被認為是LUV。Vyxeos(注射?柔紅霉素:阿糖胞苷脂質體)是?種雙層脂質體系統(，它是在第?次藥物阿糖胞苷裝載過程中產?的。內部?層形成的機制被解釋為脂質雙層的熱?學響應，以減少脂質體的表?積體積?，這是由于?的流出?引起的，以應對外部滲透挑戰(zhàn)。Myocet(阿霉素脂質體)和Mepact(?法莫肽脂質體粉劑?于濃縮分散輸注)為MLV。豐富的?層為親脂化合物的包封提供了較?的空間。直徑為微?的產品有Mepact、DepoCyt(阿糖胞苷脂質體混懸液)、DepoDur(硫酸**緩釋脂質體注射液)和expel(布?卡因脂質體注射混懸液)四種。Mepactis為?菌凍?餅，?0.9%的?理鹽?溶液重構后，會形成粒徑為2.0-3.5μm的多層脂質體。 綠色熒光脂質體載藥注射由于在巨噬細胞上發(fā)現了甘露糖受體， 因此甘露糖已被用于修飾陽離子脂質體以靶向巨噬細胞遞送。

脂質體的Zeta電位Zeta電位被認為是影響細胞攝取和藥物傳遞的重要因素之一。與帶電系統相比，膜緊密包裹的中性電荷脂質體往往在循環(huán)中停留更長時間，并表現出更高的藥物保留率。某些血漿蛋白對脂質體具有親和力如果脂質體帶電，這種親和力就會增強。特別是陽離子系統有望迅速與體循環(huán)中的各種成分相互作用，從而在體內具有更短的半衰期。眾所周知，陰離子脂體含有帶負電荷的脂質，如磷脂酰絲氨酸(PS)、磷脂酰二酸(PA)和磷脂酰甘油(PG)，會被巨噬細胞吸收，從而在短時間內從循環(huán)中消失。

遞送核酸的脂質體中的脂質成分脂質體的脂質組成可以影響陽離子脂質的結構性質及其轉染效率。由3β[N(N',N'Dimethylaminoethane)carbamoyl]cholesterol,(DC-Chol)和DOPE組成的陽離子脂質體被認為是高效基因傳遞的代表性脂質體。對于質粒DNA傳遞，DC-Chol與DOPE的***摩爾比被發(fā)現為1:2。質粒DNA的轉染效率隨著DC-Chol與質粒DNA質量比的增大而降低，比較高轉染效率為3:1。**近的一項研究報道了不同的內吞途徑對陽離子脂質體組成的可能依賴性。由質粒DNA加DC-Chol或DOPE為基礎的陽離子脂質組成的脂質體優(yōu)先通過內吞作用進入細胞，而包括1,2-二酰-3-三甲基丙烷胺(DOTAP)或DistearoylPhosphatidylcholine(DSPC)為基礎的陽離子脂質體的脂質體則被非特異性的液相巨胞飲作用所吸收。通過連接劑將藥物分?與脂質共價連接是另?種在脂質體內裝載藥物的有效策略。

基于堿性氨基酸的陽離子脂質體已被研究其增強血清中陽離子脂質體穩(wěn)定性的潛力。對賴氨酸化膽固醇、組氨酸化膽固醇和精氨酸化膽固醇進行了檢測， 賴氨酸化膽固醇和精氨酸化膽固醇脂基陽離子脂質體在含血清培養(yǎng)基中表現出  更有效的轉染質粒DNA。精胺與膽固醇或長鏈碳氫化合物的偶聯物已配制成脂質體。 將精氨酸標記的陽離子脂質和DOPE(1:1比例)與EGFP編碼質粒DNA或RNA復配，電脈沖注入未成熟樹突狀細胞或樹突狀細胞前祖細胞。將核酸脈沖樹突狀細胞靜脈注射到荷瘤小鼠體內，可誘導產生抗腫瘤細胞因子，提示陽離子脂質體  可用于生成核酸脈沖樹突狀抗**疫苗。膽固醇衍生物陽離子脂質DMHAPC-Chol，并表明其可促進血管內皮生長因子(VEGF) 特異性sirna進入腫瘤細胞。綠色熒光脂質體載藥注射

脂質體疫苗可以機器體內的免疫應答。綠色熒光脂質體載藥注射

脂質體核酸疫苗的穩(wěn)定性和儲存性脂質納米顆粒-mrna制劑的儲存條件是其臨床轉化的重要考慮因素，因為儲存(水、冷凍和凍干儲存)和冷凍保護劑(蔗糖、海藻糖或甘露醇)的類型會影響脂質納米顆粒-mrna制劑的長期穩(wěn)定性168。例如，將5%(w/v)的蔗糖或海藻糖添加到脂質納米顆粒-mRNA配方中，儲存在液氮中，可以維持mRNA在體內至少3個月的遞送效率168。值得注意的是，授權的COVID-19mRNA疫苗都是在蔗糖存在的冷凍條件下儲存17。mRNA-1273保存在-15°C至-20°C，解凍后直接注射17，而BNT162b2保存在-60°C至-80°C，注射前需要解凍和生理鹽水稀釋17。**近，根據新的穩(wěn)定性數據，歐洲藥品管理局(EMA)已批準BNT162b2在-15°C至-25°C下儲存2周。盡管冷鏈運輸可以維持疫苗活性，但不需要冷藏或冷凍儲存的脂質納米顆粒-mrna制劑的開發(fā)不僅可以降低生產和運輸成本，還可以加快疫苗接種過程。因此，研究影響脂質納米顆粒-mrna配方長期儲存的因素是很重要的。綠色熒光脂質體載藥注射