緩沖溶液是許多生化反應(yīng)、生產(chǎn)、實(shí)驗(yàn)過程中的重要溶液，對穩(wěn)定溶液的酸堿度有重要的影響。本文以**常見的幾種緩沖體系——磷酸鹽緩沖溶液、硼酸鹽緩沖溶液、三羥甲基氨基甲烷（簡稱Tris）-HCl緩沖溶液、羥乙基哌嗪乙磺酸（供注射用）（簡稱HEPES）緩沖溶液為例，介紹緩沖溶液的組成、緩沖原理及其在生物化學(xué)方面的應(yīng)用。HEPES緩沖溶液具有對細(xì)胞無毒性、不易穿過生物膜、不參與細(xì)胞內(nèi)生化過程等特點(diǎn)，所以在生化實(shí)驗(yàn)中具有***的應(yīng)用，如可用于開放式細(xì)胞生長、細(xì)胞的長期觀察、RNA或DNA提取試劑盒中。其次，相關(guān)研究表明以HEPES溶液做緩沖液有利于多肽在金納米粒子表面的偶聯(lián)反應(yīng)。另外，HEPES緩沖溶液對鎂生物降解影響的相關(guān)實(shí)驗(yàn)表明，HEPES能提高鎂的生物降解性以及抑制鎂不溶鹽層的形成。AVT長期穩(wěn)定供應(yīng)注射級海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保護(hù)劑與緩沖鹽。重慶備案登記號HEPES大批量采購

Tris-HCl緩沖液缺點(diǎn)：1、溫度效應(yīng)大，如4℃時(shí)pH=8.4，37℃時(shí)pH=7.42、pH值受溶液濃度影響較大，稀釋十倍，pH值的變化大于0.1；3、對某些pH電極發(fā)生一定的干擾作用，所以要使用與Tris溶液具有兼容性的電極。4、易吸收空氣中的CO2，所以配制的緩沖液要蓋嚴(yán)密封。HEPES緩沖液HEPES是一種非離子兩性緩沖液，其在pH7.2~7.4范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力，常用在生化診斷試劑盒、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里。HEPES緩沖液優(yōu)點(diǎn)：pKa值介于6.0和8.0之間；在水中具有高溶解度；具有膜不透性，不易穿透生物膜；對生化反應(yīng)影響有限，可耐化學(xué)和酶解作用，且不與金屬離子生成復(fù)合物或沉淀；有極低的可見光和紫外光吸收；離子濃度、溶液組成和溫度對解離的影響小;HEPES緩沖液缺點(diǎn)：如果將HEPES水溶液暴露于環(huán)境光下三小時(shí)，會產(chǎn)生細(xì)胞毒性的H2O2；HEPES水溶液必須遠(yuǎn)離光線以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；而配置成溶劑后，要在4℃下保存，建議在短期內(nèi)使用效果更佳；HEPES粉末放置的時(shí)候一般放于干燥的室內(nèi)，不能直接長時(shí)間照射陽光。廣西藥用HEPES大批量采購國內(nèi)艾偉拓注射用HEPES已登記。

關(guān)于HEPES緩沖溶液的配制，不同的文獻(xiàn)資料有不同的說法。根據(jù)用途，一種是單純的HEPES+NaOH，另一種是HEPES+鹽。各種配制方法總結(jié)如下：一、500ml1MHEPES,pH=7.0Stocksolution的配制119.15gHEPES溶解在400ml蒸餾水中，加0.5~1M的NaOH水溶液調(diào)節(jié)至少所需pH(HEPES的有效pH范圍是6.8~8.2)，然后用蒸餾水定容至500ml，于4攝氏度保存。二、加少量鹽的HEPESBuffer配方(500ml)HEPES6.5g、NaCl8.0g、Na2HPO4.7H2O0.198g、用0.5MNaOH水溶液調(diào)節(jié)pH值，***定容。三、2×HEPES緩沖鹽溶液的配制將1.6gNaCl、0.074gKCl、0.027gNa2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucanordextran)和1gHEPES溶解在90ml的蒸餾水，用0.5MNaOH調(diào)節(jié)至所需pH值，再用蒸餾水定容至100ml即可。

HEPES緩沖溶液的制備方法：一.500ml1MHEPES，pH=7.0Stocksolution的制備將19.15ghepes溶解在400ml蒸餾水中，加入0.5~1M的NaOH水溶液，調(diào)整至至少所需的pH(HePeS的有效ph范圍為6.8~8.2)，然后用蒸餾水定容至500ml，在4保存。二.加入少量鹽的HEPESBuffer***(500ml)用HEPES6.5g、NaCl8.0g、Na2HPO4.7H2O0.198g、0.5MNaOH水溶液調(diào)節(jié)pH，*后定容。.2HEPES緩沖鹽溶液的制備將1.6gNaCl、0.074gKCl、0.027gNa2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucanordextran)和1gHEPES溶解在90ml蒸餾水中，用0.5MNaOH調(diào)節(jié)至所需的pH值，再用蒸餾水定容至100ml即可。艾偉拓注射用HEPES已登記？

注射級HEPES使用方法有兩種：(1)HEPES可按所需的濃度直接加入到配制的培養(yǎng)液中，再過濾除菌。每1000ml培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES，待溶后用lNNaOH調(diào)pH至7.2，濾過除菌后使用。此時(shí)HEPES的使用濃度為10mmol/L。(2)亦可配成100x貯存液(lmol/L)，使用前取99ml培養(yǎng)液加入lml貯存液，**終應(yīng)用濃度仍為10mmol/L。lmol/L(100x)HEPES貯存液配制方法：取23.8gHEPES溶于90ml雙蒸水中，用lNNaOH調(diào)pH至7.5一8.0，然后用水定容至100ml，過濾除菌，分裝小瓶(2ml/瓶)，4℃或-20℃保存。需要注意的是，HEPES緩沖液的使用終濃度為10-50mmol/L，對細(xì)胞無毒性作用。一般情況下，濃度為20mmol/L的HEPES即可達(dá)到緩沖能力?，F(xiàn)在市售HEPES為約10g包裝的小瓶，大家根據(jù)實(shí)際情況正確靈活配制就OK了艾偉拓穩(wěn)定供應(yīng)注射級海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保護(hù)劑與緩沖鹽！重慶備案登記號HEPES大批量采購

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