緩沖溶液是許多生化反應(yīng)、生產(chǎn)、實驗過程中的重要溶液，對穩(wěn)定溶液的酸堿度有重要的影響。本文以**常見的幾種緩沖體系——磷酸鹽緩沖溶液、硼酸鹽緩沖溶液、三羥甲基氨基甲烷（簡稱Tris）-HCl緩沖溶液、羥乙基哌嗪乙磺酸（供注射用）（簡稱HEPES）緩沖溶液為例，介紹緩沖溶液的組成、緩沖原理及其在生物化學(xué)方面的應(yīng)用。對于絕大多數(shù)生物制劑（如疫苗、抗體、ADC偶聯(lián)藥物、脂質(zhì)體等）而言，實驗操作、實際生產(chǎn)以及生物體內(nèi)的生化反應(yīng)等都需要在特定的pH值范圍內(nèi)才能正常有效地進(jìn)行，從而得到準(zhǔn)確的實驗結(jié)論或發(fā)揮比較好的***效果。在這些反應(yīng)過程中酸堿緩沖溶液經(jīng)常發(fā)揮著非常重要的作用。如人體血漿中存在NaHCO3-H2CO3、蛋白質(zhì)鈉鹽-蛋白質(zhì)、氧合血紅蛋白鉀鹽-氧合血紅蛋白等緩沖對構(gòu)成血漿的酸堿緩沖系統(tǒng)，以維持正常人血漿的pH值在7.35~7.45。若血漿pH值低于7.35或者高于7.45則分別會引起酸中毒和堿中毒，危及生命。艾偉拓穩(wěn)定供貨注射級HEPES！海南輔料HEPES市場價格

HEPES的使用方法：1)HEPES可以按所需濃度直接加入制備的培養(yǎng)液中進(jìn)行過濾除菌。每1000ml培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES，溶解后用lNNaOH調(diào)節(jié)ph7.2，過濾除菌后使用。此時HEPES的使用濃度為10mmol/L。2)亦可配成100x貯存液(lmol/L)，使用前取99ml培養(yǎng)液加入lml貯存液，*終應(yīng)用濃度仍為10mmol/L。lmol/L(100x)HEPES貯存液配制方法：取23.8gHEPES溶于90ml雙蒸水中，用lNNaOH調(diào)pH至7.5一8.0，然后用水定容至100ml，過濾除菌，分裝小瓶(2ml/瓶)，4℃或-20℃保存。黑龍江7365-45-9HEPES市場價格注射級，低內(nèi)***、國產(chǎn)化穩(wěn)定供應(yīng)、高性價比注射級HEPES找AVT！

外源基因?qū)胝婧思?xì)胞的方法有很多種，如磷酸鈣轉(zhuǎn)染法、DEAE-葡聚糖轉(zhuǎn)染法、脂質(zhì)體法、電穿孔法、顯微注射法等。2×HEPES緩沖鹽溶液主要用于磷酸鈣轉(zhuǎn)染，其主要成分為HEPES，HEPES是一種非離子兩性緩沖劑，能有效控制pH在范圍，尤其在pH具有較好的緩沖能力，終濃度一般為mmol/L，培養(yǎng)液內(nèi)含mmol/LHEPES 即可達(dá)到較好的緩沖能力。Leagene HEPES緩沖鹽溶液(2×HeBS)是一種常用的細(xì)胞轉(zhuǎn)染溶液，主要由HEPES、氯化鈉、磷酸鹽等組成，其**適pH值為，經(jīng)過濾除菌處理。影響磷酸鈣轉(zhuǎn)染效率的因素主要有沉淀中DNA含量、DNA 在細(xì)胞上停留的時間、休克時間。Leagene 2xHeBS要求DNA濃度在為宜，Hela、BALB等細(xì)胞沉淀放置，CHO、DUKX、BⅡ等細(xì)胞可以通過甘油、DMSO進(jìn)行熱休克處理以提高轉(zhuǎn)染效率。

羥乙基哌嗪乙磺酸（供注射用）（HEPES）4-羥乙基哌嗪乙磺酸（簡稱HEPES），分子式為C8H18N2O4S。分子結(jié)構(gòu)中既含有酸性的磺酸基（－SO3H），又含有兩個堿性叔胺氮，所以呈現(xiàn)兩性，可用來配制兩性離子緩沖液。該緩沖溶液一般由一定量的HEPES溶于蒸餾水中，再用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至適當(dāng)值。其pH緩沖范圍一般為6.8~8.2。緩沖溶液的濃度以及外界溫度對其pH值影響不大，因此能夠較長時間維持穩(wěn)定的pH值。因HEPES分子中的-SO3H呈現(xiàn)較強(qiáng)的酸性，易給出H+；兩個叔胺氮各含有一個孤對電子，呈現(xiàn)堿性，可以接受H+生成季銨鹽。所以磺酸基和叔胺在水溶液中互為緩沖對。而且，單個HEPES分子中的叔胺和磺酸基也可傳遞H+生成內(nèi)鹽，即兩性離子。在水溶液中，HEPES分子、內(nèi)鹽以及磺酸基和叔胺各自產(chǎn)生的離子之間因H+或OH-的轉(zhuǎn)移而能夠相互轉(zhuǎn)化建立平衡關(guān)系，憑借該平衡關(guān)系的移動來抵御外來酸堿的影響來調(diào)節(jié)溶液pH值穩(wěn)定，所以具有緩沖作用，其平衡轉(zhuǎn)化關(guān)系見下圖。艾偉拓長期穩(wěn)定供應(yīng)注射級HEPES生物保護(hù)劑與緩沖鹽。

制劑研發(fā)、醫(yī)學(xué)檢測，藥物生產(chǎn)與保存以及分析實驗等，幾乎都需要緩沖溶液的參與才能正常進(jìn)行，同時所需要的緩沖液又各有不同。因此對于制劑研發(fā)人員來說，只有掌握緩沖溶液的相關(guān)知識及用途，才能正確地根據(jù)實際需要選擇一定濃度和pH值的緩沖溶液來使用。在選擇緩沖溶液時，既要考慮它的毒性、穩(wěn)定性、有效的緩沖范圍，還要考慮所選緩沖溶液是否與主體物質(zhì)反應(yīng)、對主體物質(zhì)的干擾性以及是否與主藥發(fā)生配伍禁忌等。經(jīng)過上述分析，在四種常見緩沖體系中，Tris-HCl緩沖溶液和HEPES緩沖液是較為理想的生物緩沖劑，在抗體藥物，mRNA疫苗，脂質(zhì)體藥物等生物制劑中均有所應(yīng)用，但都有一定的限制，制劑開發(fā)時需進(jìn)行充分考量及比對。國內(nèi)艾偉拓穩(wěn)定供貨HEPES！河南7365-45-9HEPES批量

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HEPES緩沖溶液的制備方法：一.500ml1MHEPES，pH=7.0Stocksolution的制備將19.15ghepes溶解在400ml蒸餾水中，加入0.5~1M的NaOH水溶液，調(diào)整至至少所需的pH(HePeS的有效ph范圍為6.8~8.2)，然后用蒸餾水定容至500ml，在4保存。二.加入少量鹽的HEPESBuffer***(500ml)用HEPES6.5g、NaCl8.0g、Na2HPO4.7H2O0.198g、0.5MNaOH水溶液調(diào)節(jié)pH，*后定容。.2HEPES緩沖鹽溶液的制備將1.6gNaCl、0.074gKCl、0.027gNa2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucanordextran)和1gHEPES溶解在90ml蒸餾水中，用0.5MNaOH調(diào)節(jié)至所需的pH值，再用蒸餾水定容至100ml即可。海南輔料HEPES市場價格

【關(guān)于我們】艾偉拓(上海)醫(yī)藥科技有限公司AVT.是國內(nèi)一家專營磷脂類藥用輔料的科技公司，旗下產(chǎn)品覆蓋天然磷脂、合成磷脂、功能化磷脂等細(xì)分領(lǐng)域，并提供諸如油酸、油酸鈉、膽固醇等相關(guān)輔料產(chǎn)品。A.V.T.專注脂質(zhì)體、脂肪乳、微納米靶向制劑等遞藥體系，是國內(nèi)藥企、高校、研究所等單位主要磷脂供應(yīng)商。

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