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來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-08-14

關(guān)于HEPES緩沖溶液的配制,不同的文獻(xiàn)資料有不同的說法。根據(jù)用途,一種是單純的HEPES+NaOH,另一種是HEPES+鹽。各種配制方法總結(jié)如下:一、500ml1MHEPES,pH=7.0Stocksolution的配制119.15gHEPES溶解在400ml蒸餾水中,加0.5~1M的NaOH水溶液調(diào)節(jié)至少所需pH(HEPES的有效pH范圍是6.8~8.2),然后用蒸餾水定容至500ml,于4攝氏度保存。二、加少量鹽的HEPESBuffer配方(500ml)HEPES6.5g、NaCl8.0g、Na2HPO4.7H2O0.198g、用0.5MNaOH水溶液調(diào)節(jié)pH值,***定容。三、2×HEPES緩沖鹽溶液的配制將1.6gNaCl、0.074gKCl、0.027gNa2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucanordextran)和1gHEPES溶解在90ml的蒸餾水,用0.5MNaOH調(diào)節(jié)至所需pH值,再用蒸餾水定容至100ml即可。AVT注射用HEPES已登記?北京高純HEPES醫(yī)院采購

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(5)緩沖溶液在穩(wěn)定性方面各顯利弊:①Tris-HCl緩沖溶液pH值受外界影響較大,一般現(xiàn)用現(xiàn)配。同時(shí)需要注意Tris是一級(jí)脂肪胺,分子結(jié)構(gòu)中的氨基易與醛類化合物發(fā)生縮合反應(yīng),是一些生化實(shí)驗(yàn)的抑制劑。②硼酸鹽緩沖液有一定毒性,不宜用做注射液或者口服液的緩沖液。③雖然磷酸鹽緩沖溶液穩(wěn)定性很好,但磷酸根具有一定的絡(luò)合能力會(huì)抑制一些與金屬離子有關(guān)的生化反應(yīng)。④HEPES緩沖溶液是較理想的生物緩沖劑,但其有多種生物學(xué)效應(yīng),如:縮短血液凝固時(shí)間、減緩平滑肌收縮頻率以及阻斷細(xì)胞膜上的陰離子通道等,在一定程度上會(huì)影響患者身體狀態(tài),使用時(shí)應(yīng)需注意。江蘇高純度HEPESAVT穩(wěn)定供貨注射級(jí)HEPES!

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注射級(jí)氨丁三醇緩沖液優(yōu)點(diǎn)如下:1.Tris堿的堿性較強(qiáng),所以可以只用這一種緩沖體系配制pH范圍由酸性到堿性的大范圍pH值的緩沖液,應(yīng)用范圍廣;2.Tris緩沖液對(duì)生物化學(xué)過程干擾很小,不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀;3.Tris在水中溶解度高,對(duì)很多酶的反應(yīng)是惰性的;4.Tris緩沖能力高,在pH7.5-9.0之間有較強(qiáng)的緩沖能力;5.Tris緩沖劑應(yīng)用***,在生物化學(xué)、分子生物學(xué)、體外診斷、化妝品、涂料等領(lǐng)域發(fā)揮重要作用。注射級(jí)HEPES!

Tris-HCl緩沖液缺點(diǎn):1、溫度效應(yīng)大,如4℃時(shí)pH=8.4,37℃時(shí)pH=7.42、pH值受溶液濃度影響較大,稀釋十倍,pH值的變化大于0.1;3、對(duì)某些pH電極發(fā)生一定的干擾作用,所以要使用與Tris溶液具有兼容性的電極。4、易吸收空氣中的CO2,所以配制的緩沖液要蓋嚴(yán)密封。HEPES緩沖液HEPES是一種非離子兩性緩沖液,其在pH7.2~7.4范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力,常用在生化診斷試劑盒、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里。HEPES緩沖液優(yōu)點(diǎn):pKa值介于6.0和8.0之間;在水中具有高溶解度;具有膜不透性,不易穿透生物膜;對(duì)生化反應(yīng)影響有限,可耐化學(xué)和酶解作用,且不與金屬離子生成復(fù)合物或沉淀;有極低的可見光和紫外光吸收;離子濃度、溶液組成和溫度對(duì)解離的影響小;HEPES緩沖液缺點(diǎn):如果將HEPES水溶液暴露于環(huán)境光下三小時(shí),會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞毒性的H2O2;HEPES水溶液必須遠(yuǎn)離光線以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果;而配置成溶劑后,要在4℃下保存,建議在短期內(nèi)使用效果更佳;HEPES粉末放置的時(shí)候一般放于干燥的室內(nèi),不能直接長(zhǎng)時(shí)間照射陽光。國(guó)內(nèi)艾偉拓穩(wěn)定供貨注射級(jí)HEPES!

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HEPES的使用方法:1)HEPES可以按所需濃度直接加入制備的培養(yǎng)液中進(jìn)行過濾除菌。每1000ml培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES,溶解后用lNNaOH調(diào)節(jié)ph7.2,過濾除菌后使用。此時(shí)HEPES的使用濃度為10mmol/L。2)亦可配成100x貯存液(lmol/L),使用前取99ml培養(yǎng)液加入lml貯存液,*終應(yīng)用濃度仍為10mmol/L。lmol/L(100x)HEPES貯存液配制方法:取23.8gHEPES溶于90ml雙蒸水中,用lNNaOH調(diào)pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,過濾除菌,分裝小瓶(2ml/瓶),4℃或-20℃保存。艾偉拓穩(wěn)定供貨注射級(jí)HEPES!山東有登記號(hào)HEPES市場(chǎng)價(jià)格

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(1)hepes緩沖液可按所需的濃度直接加入到配制的培養(yǎng)液中,再過濾除菌.每1000ml培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES,待溶后用lNNaOH調(diào)pH至7.2,濾過除菌后使用.此時(shí)HEPES的使用濃度為10mmol/L.(2)亦可配成100x貯存液(lmol/L),使用前取99ml培養(yǎng)液加入lml貯存液,**終應(yīng)用濃度仍為10mmol/L。lmol/L(100x)hepes緩沖液配制方法:取23.8gHEPES溶于90ml雙蒸水中,用lNNaOH調(diào)pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,過濾除菌,分裝小瓶(2ml/瓶),4℃或-20℃保存.作者:知乎用戶0mmkBe北京高純HEPES醫(yī)院采購

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