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由于細胞可以在體內以依賴 NEO1 的方式同時遇到 RGM 和 NET1，作者探究細胞表面是否存在穩(wěn)定的三元NEO1-NET1-RGM復合物，或者NET1和RGM是否會競爭結合NEO1。為了探究這兩種區(qū)別，作者采用Proximity Ligation Assay（***）實驗，將經過細胞表達并純化的全長的NEO1與NETNTR以及全長的胞外RGMB進行相互培養(yǎng)，觀察到遇到***現(xiàn)象，并且只有當NET1與RGMB非常接近且距離＜40nm時才會產生。當RGMB突變?yōu)椴豢涉溄覰ET1時，***現(xiàn)象明顯減少。結果表明，NEO1是連接NET1和RGMB所必需的，并且會在細胞表面形成三元復合物。

王慧嘉等人開發(fā)了一種高壓離子色譜-電導檢測器(HPIC-CD)測定鹽酸伊立替康脂質體注射液中蔗糖八硫酸酯的含量的方法。該法采用DionexInPacTMAS11-HC陰離子交換柱，以氫氧化鈉溶液為淋洗液，結果表明HPIC-CD法的專屬性、檢測限、定量限、精密度、準確度、線性、穩(wěn)定性以及耐用性驗證均符合要求，可準確定量鹽酸伊立替康脂質體注射液中蔗糖八硫酸酯的含量，與HPLC-RID法相比，HPIC-CD法靈敏度更高，因避免了樣品基質的干擾,可直接進樣分析,縮短了前處理時間、操作更簡便，分析過程未使用有機試劑更加環(huán)保。此法可簡單、快速、準確測定鹽酸伊立替康脂質體注射液中蔗糖八硫酸酯的含量，為鹽酸伊立替康脂質體注射液仿制藥開發(fā)中蔗糖八硫酸酯的含量測定提供了新的思路。

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“3-3”超級復合體的主體本質上是由NEO1和NET1之間的相互作用形成的。NET1是細長的且剛性的分子，使得與兩個相鄰NEO1分子接觸，以彌合超復合物。冷凍電鏡結果顯示，有四個N連接上蔗糖，另外有四個位置通過非共價連接了八硫酸酯鹽（SOS）分子，蔗糖八硫酸酯協(xié)助確認三元聚合物超級復合體比例。NET1和RGMB分子形成非常小的相互作用，同時也未觀察到NET1與溶液中RGMA以及RGMB的相互作用。這也表明了NET1-NEO1相互作用是形成“3-3“超級復合體的驅動力。蔗糖八硫酸酯鉀含量:100.7%.新疆有登記號蔗糖八硫酸酯鉀醫(yī)院采購

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