下面是處理和重復使用超濾管的步驟。將超濾管中的水倒出來,用Milliq水輕輕沖洗幾次。[如管底有可見蛋白質(zhì)沉淀,可先加水,再用設(shè)備頭吹氣,注意不要碰觸膜,吹氣至沉淀懸浮,再倒出,不要沖自來水。)然后加入0.2 mNaOH溶液,室溫放置20分鐘,平衡超濾。在此期間定量管。離心10分鐘。倒出剩余的MaOH溶液,將管芯浸入Milliq燒杯(1L或2L)中。放器數(shù)小時,然后用新水替換,放置數(shù)小時,不斷稀釋Na0E濃度。50ml管道和蓋子用自來水沖洗,內(nèi)壁用Milliq水沖洗。取出浸入水中的芯,并將其加入幾乎滿毫升的水中。在50毫升試管中注入毫升水。慢慢地將芯放入50毫升離心管中,排出一些水。超濾離心管...
樣本預處理是超濾離心管使用前不可或缺的一環(huán)。預處理的目的是去除樣本中的雜質(zhì)、調(diào)整pH值和鹽濃度,以確保樣本在離心過程中不會堵塞超濾膜,同時提高目標分子的純度和回收率。預處理步驟通常包括過濾、稀釋、濃縮、pH調(diào)整以及去除可能干擾分離的物質(zhì)等。這些步驟的恰當執(zhí)行對于后續(xù)實驗的順利進行和結(jié)果的準確性至關(guān)重要。此外,預處理還能保護超濾膜,延長其使用壽命。超濾離心管具有多種容量和規(guī)格,以滿足不同實驗需求。在選擇時,需綜合考慮樣本量、目標分子濃度、實驗?zāi)康囊约半x心機的規(guī)格等因素。在實驗教學中,要利用超濾離心管的實驗,培養(yǎng)學生的科學思維方式。衢州30K超濾離心管PES膜通常具有較高的截留分子量和良好的化學兼...
根據(jù)其大小,又分為1.5ml、2ml、5ml、10ml、15ml、50ml等,國產(chǎn)的離心管一般就是這幾個規(guī)格,用的較多的也就是10ml和50ml的。如果您的離心機是配30ml或者其他規(guī)格的離心管時,就要考慮進口的了。另外,離心管還有圓底和尖底,以及螺旋蓋和插蓋之分。螺旋蓋的離心管帶有較精細的刻度,插蓋的只有一個總體的容量標示。實驗室常用的離心管有塑料的和玻璃的,一般塑料的用的較多,因為玻璃的離心管不能用在高速或者超速離心機上。塑料的離心管又有PP(聚丙烯)、PC(聚碳酸酯),PE(聚乙烯)等材質(zhì)。PP的管子性能相對來說比較好。塑料的離心管透明或者半透明,可以直觀的看到樣品離心情況,但是比較容易...
由于單管價格并不便宜,不少人嘗試重復使用----經(jīng)驗是用蒸餾水清洗膜表面多次,離心一次到兩次,那種可以反向離心的小管子可以加蒸餾水浸泡后反向多離心一次,會好些??芍貜陀糜谕粯悠?,不用時可用蒸餾水浸泡,但是要防止細菌污染。不同樣品就不要混用了。有人說泡在20%酒精、1N的NaOH(氫氧化鈉)中,防止長菌,而且防干,只要超濾膜侵了水,就不可以再讓它干,但也有人說會破壞膜結(jié)構(gòu)。反正廠家一般不支持重復用。多次重復使用會堵塞濾膜上的孔徑,甚至出現(xiàn)漏液現(xiàn)象,影響實驗結(jié)果。使用超濾離心管時應(yīng)注意避免過度旋轉(zhuǎn)或操作不當導致樣品失效或污染,并及時更換膜和其他配件。杭州10K超濾離心管生產(chǎn)公司PES膜以其優(yōu)異的...
高溫可能導致蛋白質(zhì)變性、膜材料降解,從而影響分離效果和膜的壽命;而低溫則可能降低離心效率和膜的通透性。因此,在超濾離心過程中,需要嚴格控制溫度,以確保分離的穩(wěn)定性和可重復性。這通常通過離心機的溫度控制系統(tǒng)或外部加熱/冷卻裝置來實現(xiàn)。超濾離心管在使用后需要進行清洗和再生,以去除殘留的樣本和污垢,并恢復膜的通透性。清洗方法通常包括使用清洗劑、超聲波清洗、高壓水流沖洗等。再生方法則根據(jù)超濾膜的材質(zhì)和性質(zhì)來選擇,如使用化學試劑、熱處理或物理方法(如刮膜)等。正確的清洗和再生方法能夠延長超濾離心管的使用壽命,降低實驗成本。使用超濾離心管時應(yīng)注意保持其穩(wěn)定性并避免操作失誤導致實驗失敗或損壞設(shè)備。廣州100...
在使用超濾離心管時,離心速度和時間的選擇對分離效果具有明顯影響。過高的離心速度可能導致膜破裂、樣本過熱,進而影響分離效果和膜的壽命;而過低的離心速度則會延長分離時間,降低實驗效率。因此,需要根據(jù)超濾膜的材質(zhì)、孔徑大小、樣本性質(zhì)以及實驗?zāi)康模ㄟ^實驗優(yōu)化來確定較佳的離心條件。這一優(yōu)化過程需要綜合考慮多個因素,以確保分離效果的較佳化。樣本預處理是超濾離心管使用前不可或缺的一環(huán)。預處理的目的是去除樣本中的雜質(zhì)、調(diào)整pH值和鹽濃度,以確保樣本在離心過程中不會堵塞超濾膜,同時提高目標分子的純度和回收率。使用超濾離心管時應(yīng)注意避免振動或震動造成樣品混亂并影響分離效果。紹興30K超濾離心管哪里能買超濾離心管...
在生產(chǎn)和使用過程中,需要采取嚴格的無菌措施,如使用無菌水清洗、紫外線消毒、化學消毒劑浸泡等。同時,還需選擇符合生物安全標準的材質(zhì)和制造工藝,以避免對實驗人員、環(huán)境或樣本造成污染。此外,還需定期對超濾離心管進行生物安全檢測,以確保其符合相關(guān)標準和要求。無菌處理和生物安全性的確保對于保障實驗結(jié)果的準確性和可靠性具有重要意義。超濾離心管需要與其他實驗器材(如離心機、樣本容器、移液器等)兼容,以確保實驗的順利進行。在選擇時,需要評估超濾離心管與這些器材的兼容性,包括尺寸匹配、接口密封性、材質(zhì)相容性等方面。此外,還需考慮超濾離心管在離心過程中的穩(wěn)定性和耐用性,以確保其能夠承受離心力的作用而不發(fā)生破裂或變...
超濾離心管使用的加樣與平衡:使用移液槍將適量樣本輕輕加入超濾管中,注意避免產(chǎn)生泡沫和漏液。加入的樣本量應(yīng)不超過管頂?shù)陌拙€標記。如果超濾管中有少許殘留水,可將其倒置并以較低轉(zhuǎn)速(如1000×g)離心1分鐘,以去除殘留水分。在離心前,確保超濾離心管的質(zhì)量和重心達到平衡。這有助于減少離心過程中的震動和損壞風險。注意轉(zhuǎn)速和加速度的設(shè)置,避免過快導致超濾膜損壞。超濾離心管使用的注意事項:在整個使用過程中要注意無菌操作,避免污染樣本和實驗結(jié)果。離心過程中要注意安全,避免離心機發(fā)生意外情況。如果發(fā)現(xiàn)超濾管有破損或泄漏現(xiàn)象,應(yīng)立即停止使用并更換新的超濾管。超濾離心管的離心力一般不超過12000g,以避免濾膜破...
選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,較常見的是10kD。到底選擇多大截留分子量比較合適呢?10kDa、 5kDa、還是30kDa?通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾 管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學物質(zhì)的耐受程度有所不同,表格中有。新買來的超濾是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷...
超濾離心管具有多種容量和規(guī)格,以滿足不同實驗需求。在選擇時,需綜合考慮樣本量、目標分子濃度、實驗?zāi)康囊约半x心機的規(guī)格等因素。合適的容量和規(guī)格能夠確保實驗的順利進行,同時避免浪費和不必要的成本增加。此外,還需注意超濾離心管的密封性能和耐用性,以確保在實驗過程中不會出現(xiàn)泄漏或破損等問題。溫度控制是超濾離心過程中不可忽視的因素。高溫可能導致蛋白質(zhì)變性、膜材料降解,從而影響分離效果和膜的壽命;而低溫則可能降低離心效率和膜的通透性。因此,在超濾離心過程中,需要嚴格控制溫度,以確保分離的穩(wěn)定性和可重復性。這通常通過離心機的溫度控制系統(tǒng)或外部加熱/冷卻裝置來實現(xiàn),以確保樣本在適宜的溫度下進行分離。超濾離心管...
正確的存儲和保養(yǎng)對于延長超濾離心管的使用壽命和保持其性能至關(guān)重要。應(yīng)將超濾離心管存放在干燥、通風、避光的環(huán)境中,避免陽光直射和高溫。同時,需要定期檢查超濾離心管的完整性和密封性,及時更換損壞或老化的部件。超濾離心管,作為生物化學和分子生物學實驗中的重要工具,其關(guān)鍵應(yīng)用在于利用超濾技術(shù)和離心力的作用,對生物樣本進行高效的分離、純化和濃縮。這種技術(shù)基于分子大小差異,通過超濾膜的篩分作用,將樣本中的大分子物質(zhì)(如蛋白質(zhì)、核酸)與小分子物質(zhì)(如鹽類、代謝物)有效分離,為后續(xù)的實驗分析提供高質(zhì)量的樣本基礎(chǔ)。超濾離心管在臨床診斷中也具有重要作用,如腎功能檢測、腦脊液分析等領(lǐng)域。重慶10K超濾離心管哪家強市...
超濾離心管需要與其他實驗器材(如離心機、樣本容器、移液器等)兼容使用,以確保實驗的順利進行。在選擇時,需要評估超濾離心管與這些器材的兼容性,包括尺寸匹配、接口密封性、材質(zhì)相容性等方面。此外,還需考慮超濾離心管在離心過程中的穩(wěn)定性和耐用性,以確保其能夠承受離心力的作用而不發(fā)生破裂或變形,保障實驗的安全性和準確性。超濾離心管在蛋白質(zhì)純化過程中具有普遍應(yīng)用。通過選擇合適的超濾膜孔徑和離心條件,可以有效地去除蛋白質(zhì)樣本中的低分子量雜質(zhì)和鹽類,同時濃縮目標蛋白質(zhì)。這種方法操作簡便、分離效率高,且對蛋白質(zhì)活性影響小,為蛋白質(zhì)的進一步純化和分析提供了便利。此外,超濾離心管還可以用于蛋白質(zhì)的換液和緩沖液交換等...
在使用超濾離心管時,離心速度和時間的選擇對分離效果至關(guān)重要。過高的離心速度可能導致膜破裂、樣本過熱,進而影響分離效果和膜的壽命;而過低的離心速度則會延長分離時間,降低實驗效率。因此,需要根據(jù)超濾膜的材質(zhì)、孔徑大小、樣本性質(zhì)以及實驗?zāi)康?,通過實驗優(yōu)化來確定較佳的離心條件。樣本預處理是超濾離心管使用前不可或缺的一環(huán)。預處理的目的是去除樣本中的雜質(zhì)、調(diào)整pH值和鹽濃度,以確保樣本在離心過程中不會堵塞超濾膜,同時提高目標分子的純度和回收率。預處理步驟通常包括過濾、稀釋、濃縮、pH調(diào)整以及去除可能干擾分離的物質(zhì)等。超濾離心管可以通過調(diào)整旋轉(zhuǎn)速度、溫度等參數(shù)來控制分子篩選效果。山東濃縮超濾離心管生產(chǎn)公司超...
吸頭:十萬級凈化車間生產(chǎn);電子束滅菌;無DNA/RNA酶,無熱源;低殘留。 凍存管:FDA、USP標準醫(yī)療級聚丙烯原料;分內(nèi)旋和外旋型;專利設(shè)計一體式醫(yī)用級密封圈,潔凈無污染;適用范圍:-200℃到121℃;負壓測試-90kpa無漏液;輻照滅菌,無DNA/RNA酶,無熱源。 二維碼凍存管:FDA、USP標準醫(yī)療級聚丙烯原料;專利設(shè)計一體式醫(yī)用級密封圈,潔凈無污染;底部二維碼、管身條形碼、數(shù)字碼三碼合一;適用范圍:-200℃到121℃;負壓測試-90kpa無漏液;輻照滅菌,無DNA/RNA酶,無熱源。按照實驗要求設(shè)定好離心機的轉(zhuǎn)速和時間,然后啟動離心機對超濾離心管進行離心操作。成都100K超濾離...
正確的清洗和再生方法能夠延長超濾離心管的使用壽命,降低實驗成本,并提高實驗的準確性和可靠性。由于超濾離心管直接接觸生物樣本,因此其無菌處理和生物安全性是需要嚴格確保的。在生產(chǎn)和使用過程中,需要采取嚴格的無菌措施,如使用無菌水清洗、紫外線消毒、化學消毒劑浸泡等。同時,還需要選擇符合生物安全標準的材質(zhì)和制造工藝,以避免對實驗人員、環(huán)境或樣本造成污染。這些措施對于保障實驗的安全性和結(jié)果的準確性具有重要意義。超濾離心管需要與其他實驗器材(如離心機、樣本容器、移液器等)兼容,以確保實驗的順利進行。在實驗教學中,要根據(jù)實驗教學大綱,合理安排超濾離心管的實驗教學內(nèi)容。成都高離心力離心管價格根據(jù)靶蛋白的分子量...
2. 不能121℃滅菌,否則會變形,不論是是密理博、頗爾還是賽多利斯的都不能。3. 超濾管應(yīng)當干燥保存,買回來的時候就是干的。當然也可以濕潤保存,但是應(yīng)當保存在20%的乙醇中,是為了防止沒洗去的殘留的液體長菌堵膜。4. 有人說濕潤保存不能干,指的是卷式和板式超濾膜。離心管是一個簡單的可以承受高轉(zhuǎn)速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀。超濾離心管會有一個類似于內(nèi)管和外管的兩個部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當高速離心時,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內(nèi)管中),就是超濾的原理.常用于濃縮樣品。超濾離心管也可用于從血漿或尿液中提取蛋白質(zhì)和核酸等大...
吸頭:十萬級凈化車間生產(chǎn);電子束滅菌;無DNA/RNA酶,無熱源;低殘留。 凍存管:FDA、USP標準醫(yī)療級聚丙烯原料;分內(nèi)旋和外旋型;專利設(shè)計一體式醫(yī)用級密封圈,潔凈無污染;適用范圍:-200℃到121℃;負壓測試-90kpa無漏液;輻照滅菌,無DNA/RNA酶,無熱源。 二維碼凍存管:FDA、USP標準醫(yī)療級聚丙烯原料;專利設(shè)計一體式醫(yī)用級密封圈,潔凈無污染;底部二維碼、管身條形碼、數(shù)字碼三碼合一;適用范圍:-200℃到121℃;負壓測試-90kpa無漏液;輻照滅菌,無DNA/RNA酶,無熱源。超濾離心管通常由聚碳酸酯等材料制成,可承受高速旋轉(zhuǎn)和高溫高壓。紹興100K超濾離心管生產(chǎn)公司我們...
我用的是3500g,4度離心,時間可以自己控制,取決于你之后的濃縮體積,我一般是200ul左右。千萬別一下離心時間太長,不同的蛋白濃縮的速度不同,有的需要長時間離心,有的則一下子就好。當然也和你的蛋白是否比較純,所用的是什么buffer,還有蛋白的濃度有關(guān)系。所以離心時要先短些時間觀察一下你的濃縮速度,不要一下子濃縮過了,甚至形成沉淀就得不償失了。另外其實他們的管子都設(shè)計的是一次性使用,所以如果想重復使用,不要離得速度太高,4000-4500RPM就差不多了,另外重復使用時要看看管壁上有沒有裂紋,現(xiàn)在的管子好像不如從前的結(jié)實了。使用超濾離心管時應(yīng)注意保持其穩(wěn)定性并避免操作失誤導致實驗失敗或損壞...
離心管:FDA、USP標準醫(yī)療級聚丙烯原料;管蓋雙螺紋設(shè)計,增強密封性、適合單手操作;適用范圍:-80℃到121℃;負壓測試-90kpa無漏液;輻照滅菌,無DNA/RNA酶,無熱源;耐受離心力: 15ml: 12000G,50ml: 9500G。 超濾離心管:濃縮倍數(shù)高,可輕松達到80-100倍的濃縮倍數(shù);濃縮速度快,一般濃縮時間在10-60min;回收率搞,可以達到90%以上的回收率;蛋白吸附低,RC膜和光滑內(nèi)壁設(shè)計具有極低的蛋白吸附;規(guī)格全,具有3K, 10K, 100K四種規(guī)格。格柵膜:也叫微生物檢測膜;適合微生物截留和生長,微生物恢復率>90%;兩種顏色可選:白色/黑色;格柵無毒,不會...
根據(jù)其大小,又分為1.5ml、2ml、5ml、10ml、15ml、50ml等,國產(chǎn)的離心管一般就是這幾個規(guī)格,用的較多的也就是10ml和50ml的。如果您的離心機是配30ml或者其他規(guī)格的離心管時,就要考慮進口的了。另外,離心管還有圓底和尖底,以及螺旋蓋和插蓋之分。螺旋蓋的離心管帶有較精細的刻度,插蓋的只有一個總體的容量標示。實驗室常用的離心管有塑料的和玻璃的,一般塑料的用的較多,因為玻璃的離心管不能用在高速或者超速離心機上。塑料的離心管又有PP(聚丙烯)、PC(聚碳酸酯),PE(聚乙烯)等材質(zhì)。PP的管子性能相對來說比較好。塑料的離心管透明或者半透明,可以直觀的看到樣品離心情況,但是比較容易...
超濾離心管的膜材質(zhì)為特有的Ultracel再生纖維素膜,生產(chǎn)工藝嚴格,截留分子量明確而,蛋白吸附損失較小。二:如果要用超濾離心管的方法分離兩種蛋白,那么這兩個蛋白的大小需要相差多少?按照經(jīng)驗,建議兩個蛋白的分子量要相差一個數(shù)量級(10倍)。不保證超濾離心管不包含RNA酶,建議用0.1%DEPC在37度浸泡2小時,以完全滅活RNA酶;殘留的DEPC可以用Milli-Q超純水洗滌除去。去污劑因其獨特的性質(zhì),當濃度大于臨界微團濃度(Critical Micelle Concentration、CMC)時,去污劑分子會聚集形成微團而改變分子構(gòu)象,這有可能會影響去污劑的去除效果,具體的操作步驟請垂詢我們...
蛋白和多肽超濾離心管,垂直設(shè)計和有效的膜表面積提供了快速的樣品處理,較高的樣品回收率(> 90% 的樣品回收率),以及 80~100 倍濃縮的能力。濃縮物使用吸液器從過濾裝置中收集,而超濾液則在提供的離心管中收集。超濾離心管是一種可以為蛋白質(zhì)樣本的濃縮和緩沖交換提供可靠準確結(jié)果的一次性超濾離心式過濾裝置,與層析、透析等方法相比,超濾對被處理的分子更加溫和,不需要有機萃取,不會導致蛋白變性,且簡單高效。規(guī)格超濾濃縮器可處理體積4mL 以內(nèi)的樣本,離心管內(nèi)包含一個內(nèi)置豎直的聚醚砜(PES)膜過濾裝置,聚醚砜膜具備低蛋白附著、高通量的特點,可應(yīng)用在3KD、5KD、10KD、30KD、50KD、100...
超濾離心管,備有四種材質(zhì)的超濾膜:聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據(jù)不同要求靈活選用。 使用注意事項 (1)選擇合適的超濾管。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學物質(zhì)的耐受程度有所不同。 (2)新買來的超濾是干燥的,使用前加入超純水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷...
根據(jù)其大小,又分為1.5ml、2ml、5ml、10ml、15ml、50ml等,國產(chǎn)的離心管一般就是這幾個規(guī)格,用的較多的也就是10ml和50ml的。如果您的離心機是配30ml或者其他規(guī)格的離心管時,就要考慮進口的了。另外,離心管還有圓底和尖底,以及螺旋蓋和插蓋之分。螺旋蓋的離心管帶有較精細的刻度,插蓋的只有一個總體的容量標示。實驗室常用的離心管有塑料的和玻璃的,一般塑料的用的較多,因為玻璃的離心管不能用在高速或者超速離心機上。塑料的離心管又有PP(聚丙烯)、PC(聚碳酸酯),PE(聚乙烯)等材質(zhì)。PP的管子性能相對來說比較好。塑料的離心管透明或者半透明,可以直觀的看到樣品離心情況,但是比較容易...
實驗室常用的離心管有塑料的和玻璃的,一般塑料的用得較多,因為玻璃的離心管不能用在高速或者超速離心機上。塑料的離心管又有PC (聚碳酸酯)、PE (聚乙烯)、PP(聚丙烯)等材質(zhì)。PP的管子性能相對來說比較好。塑料的離心管透明或者半透明,可以直觀地看到樣品的離心情況,但是比較容易變形,抗有機溶劑的腐蝕性較差,所以使用壽命較短。因此,實驗室一般會經(jīng)常購買離心管。PC (聚碳酸酯):透明度較好,硬度大,可以高溫消毒,但不耐強酸強堿以及一些有機溶劑如酒精之類。主要用于5萬轉(zhuǎn)以上的超高速離心。PE(聚乙烯):不透明。和丙銅、醋酸、鹽酸等不反應(yīng),較為穩(wěn)定,高溫下容易變軟。PP(聚丙烯):半透明,化學及溫度...
選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,較常見的是10kD。到底選擇多大截留分子量比較合適呢?10kDa、 5kDa、還是30kDa?通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾 管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學物質(zhì)的耐受程度有所不同,表格中有。新買來的超濾是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷...
脫鹽、更換緩沖液或滲濾是從含有生物分子的溶液中去除鹽分或溶劑的重要方法。鹽分去除或緩沖液更換可通過超濾管來完成,具體過程是濃縮樣本,棄去濾出液,然后向濃縮液中加入任何所需的溶劑,恢復到樣本原先的體積。"洗出"的過程可反復進行,直到雜質(zhì)的濃度被充分降低。關(guān)于超濾管的常見問題與解答:Q:超濾管的膜材質(zhì)是什么?A:超濾管的膜材質(zhì)為默克密理博特有的Ultracel再生纖維素膜,生產(chǎn)工藝嚴格,截留分子量明確而準, 蛋白吸附損失小。Q:如果要用超濾的方法分離兩種蛋白,那么這兩個蛋白的大小需要相差多少?A:按照經(jīng)驗,建議兩個蛋白的分子量要相差 一個數(shù)量級(10倍)。超濾離心管可用于分離細胞培養(yǎng)上清中的蛋白質(zhì)...
我用的是3500g,4度離心,時間可以自己控制,取決于你之后的濃縮體積,我一般是200ul左右。千萬別一下離心時間太長,不同的蛋白濃縮的速度不同,有的需要長時間離心,有的則一下子就好。當然也和你的蛋白是否比較純,所用的是什么buffer,還有蛋白的濃度有關(guān)系。所以離心時要先短些時間觀察一下你的濃縮速度,不要一下子濃縮過了,甚至形成沉淀就得不償失了。另外其實他們的管子都設(shè)計的是一次性使用,所以如果想重復使用,不要離得速度太高,4000-4500RPM就差不多了,另外重復使用時要看看管壁上有沒有裂紋,現(xiàn)在的管子好像不如從前的結(jié)實了。超濾離心管還可以用于濃縮樣品,減少其體積并提高濃度。蘇州濃縮超濾離...
超濾作為一種膜分離技術(shù),普遍應(yīng)用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換,其原理是溶液在力的作用下,通過超濾膜孔徑的篩濾,大分子量的顆粒被截留下來,而水、溶劑和低分子量溶質(zhì)則允許透過膜,從而達到濃縮、脫鹽和緩沖液置換的目的,這種方法較大的特點是操作簡便、快速、高效,可同時濃縮和純化分子。如何使用超濾心離心管?1. 使用角轉(zhuǎn)子加到超濾裝置上,較大樣本量為15 毫升(Anavo Ultra-15)。2. 將帶蓋過濾裝置放入離心機轉(zhuǎn)子內(nèi); 用一個類似的裝置來平衡。3. 使用定角轉(zhuǎn)子時,將薄膜面板朝上定位,較大旋轉(zhuǎn) 5000 xg,旋轉(zhuǎn) 30 分鐘。4. 為了回收濃縮的溶質(zhì),在過濾裝置的底部插入一個移液管,...
當濃縮到剩下1ml時,取50ul緩沖溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mgml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測,繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀,導致堵管。若發(fā)生沉淀,要確定沉淀的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,后者的方法是換不同的緩沖溶液,直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。超濾離心管可以用于分離提取動植物組織中的DNA、RNA等...