回收濃縮液主要有兩種方法:一種是用吸管直接吸取并回收,另外一種是將離心管放入離心機(jī)反甩,將濃縮液甩入回收帽中,加蓋保存,因此超濾管常配合離心機(jī)使用。超濾管主要應(yīng)用有以下幾個方面:1.濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(單株或雙株DNA/RNA樣本)、微生物、洗出液和凈化樣本的生物標(biāo)本。2.凈化組織培養(yǎng)基提取液和細(xì)胞溶解液中的大分子成分,從反應(yīng)混合頁中去除引物、鏈接或分子標(biāo)記,在HPLC之前去除蛋白質(zhì),3.除鹽、更換緩沖液或滲濾。根據(jù)其材質(zhì)的不同總體可以分為塑料和玻璃的,塑料的離心管用的較多,又可以分為PP、PC、PS等,根據(jù)不同需要,生產(chǎn)廠家會選擇不同的塑料材料來進(jìn)行制作。離心機(jī)轉(zhuǎn)速會影響到超濾效果...
我用的是3500g,4度離心,時間可以自己控制,取決于你之后的濃縮體積,我一般是200ul左右。千萬別一下離心時間太長,不同的蛋白濃縮的速度不同,有的需要長時間離心,有的則一下子就好。當(dāng)然也和你的蛋白是否比較純,所用的是什么buffer,還有蛋白的濃度有關(guān)系。所以離心時要先短些時間觀察一下你的濃縮速度,不要一下子濃縮過了,甚至形成沉淀就得不償失了。另外其實他們的管子都設(shè)計的是一次性使用,所以如果想重復(fù)使用,不要離得速度太高,4000-4500RPM就差不多了,另外重復(fù)使用時要看看管壁上有沒有裂紋,現(xiàn)在的管子好像不如從前的結(jié)實了。超濾離心管是一種經(jīng)濟(jì)、有效且環(huán)保的分離技術(shù),具有普遍應(yīng)用前景。深圳...
超濾離心管的常見問題與解答,一:超濾離心管的膜材質(zhì)是什么?超濾離心管的膜材質(zhì)為特有的Ultracel再生纖維素膜,生產(chǎn)工藝嚴(yán)格,截留分子量明確而,蛋白吸附損失較小。二:如果要用超濾離心管的方法分離兩種蛋白,那么這兩個蛋白的大小需要相差多少?按照經(jīng)驗,建議兩個蛋白的分子量要相差一個數(shù)量級(10倍)。不保證超濾離心管不包含RNA酶,建議用0.1%DEPC在37度浸泡2小時,以完全滅活RNA酶;殘留的DEPC可以用Milli-Q超純水洗滌除去。去污劑因其獨特的性質(zhì),當(dāng)濃度大于臨界微團(tuán)濃度(Critical Micelle Concentration、CMC)時,去污劑分子會聚集形成微團(tuán)而改變分子構(gòu)象...
離心管主要有塑料、不銹鋼制成,塑料離心管常用資料有聚丙烯(PP).聚乙烯(PE),聚碳酸酯(PC)等。其中PP管性能較好,塑料離心管的優(yōu)點是透明(或半透明),硬度小,可用穿刺法取出梯度,缺陷是易變形,抗有機(jī)溶劑腐蝕性差,運用壽命短;不銹鋼離心管強(qiáng)度大,不變形,能抗凍,抗熱,抗化學(xué)腐蝕,但用時要防止接觸強(qiáng)腐蝕性的化學(xué)藥品、如強(qiáng)酸、強(qiáng)堿等化學(xué)試劑。這里主要介紹塑料離心管:塑料離心管都有管蓋,離心前管蓋必需蓋嚴(yán),倒置不漏液。管蓋有三種作用:①避免樣品外泄,用于有放射性或強(qiáng)腐蝕性的樣品時②避免樣品揮發(fā)③支持離心管,避免離心管變形。超濾離心管還可用于檢測環(huán)境樣本中的微生物、重金屬等有害物質(zhì)。山東小型超濾...
離心超濾裝置用于濃縮和澄清過濾生物樣品,蛋白純化,顆粒物去除,血漿或血清過濾,以及從細(xì)胞裂解液或細(xì)胞培養(yǎng)上清去除細(xì)胞或細(xì)胞碎片。提供一系列離心設(shè)備,快速安全處理100 μl到100ml樣品??蛇x拋棄型和可重復(fù)使用超濾裝置。超濾離心濃縮管,用于生物樣品濃縮。離心超濾管,簡單快速,一步離心完成樣品濃縮,起始樣品體積可達(dá)500μl。可放入2.2ml角轉(zhuǎn)子離心。垂直膜配合狹長的流道,有效地避免濾膜堵塞,提高濃縮速度,即使顆粒含量高的溶液,也同樣能達(dá)到快速濃縮。在30分鐘內(nèi)就可達(dá)到超過90%的濃縮回收率。死端結(jié)構(gòu)避免離心干燥樣品。0.5ml-20ml樣品處理量的超濾管,截留分子量2KDa-100KDa,...
市場上常見離心管主要分為兩種:即:塑料離心管 和玻璃離心管,也有少數(shù)是鋼制離心管。使用玻璃管時離心力不宜過大,需要墊橡膠墊,防止管子破碎,高速離心機(jī)一般不選用玻璃管。離心管蓋子封閉性不夠好,液體就不能加滿(針對高速離心機(jī)且使用角轉(zhuǎn)子)以防外溢,失去平衡。外溢后果是污染轉(zhuǎn)子和離心腔,影響感應(yīng)器正常工作。超速離心時,液體一定要加滿離心管,因為超離需要抽高真空,只有加滿才能避免離心管變形。而鋼制離心管強(qiáng)度大,不變形,能抗熱,抗凍,抗化學(xué)腐蝕,它的應(yīng)用也是相當(dāng)普遍但使用時同樣也應(yīng)避免接觸強(qiáng)腐蝕性的化學(xué)藥品,如強(qiáng)酸、強(qiáng)堿等。盡量避免這些化學(xué)物質(zhì)的腐蝕。超濾離心管的優(yōu)點包括速度快、效率高、易于操作和清洗等...
超濾管采用其特有的再生纖維素膜,定義為:一個確定NMWL 的超濾膜應(yīng)該截留至少90% 以上的這個大小的球形分子,即100kDa的球形蛋白用100k的再生纖維素膜得率超過90%。請仔細(xì)查看以下默克生命科學(xué)官方數(shù)據(jù):(以0.5mL的AU0.5為例,其它型號截留分子量的選擇原則一致,具體離心力和離心時間不同。截留分子量選小啦!看到這個表,你是否發(fā)現(xiàn)原來抱怨超濾管流速偏慢的根源來自對于截留分子量定義的誤解。膜孔徑要小于目的分子這是一原則。如果分子有近似球形的立體結(jié)構(gòu)(而非明顯的線性分子),在再生纖維素超濾膜體系內(nèi),選擇“等于”或“略小于”目的分子的截留分子量的超濾管是較佳選擇,這樣操作起來又快又好,既...
超濾離心管使用注意事項:(1)選擇合適的超濾管。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認(rèn)真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同。2)新買來的超濾是干燥的,使用前加入超純水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預(yù)冷。(3)平衡。質(zhì)量和重心二者都要達(dá)到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機(jī)...
在生物學(xué)領(lǐng)域中,常常被用于細(xì)胞培養(yǎng)液的去除和濃縮。在細(xì)胞培養(yǎng)液中,存在著許多細(xì)胞代謝產(chǎn)物和廢物。使用超濾離心管可以將這些雜質(zhì)去除并濃縮目標(biāo)物質(zhì),從而方便后續(xù)的實驗操作。此外,還可以用來分離、濃縮和純化單個蛋白質(zhì)或核酸分子。在化學(xué)工業(yè)生產(chǎn)中,它同樣具有重要的應(yīng)用價值。例如,在醫(yī)藥工業(yè)生產(chǎn)中,可以使用對某些藥物進(jìn)行純化和分離。此外,在飲料生產(chǎn)中,也可以用于去除懸浮物和有機(jī)色素,提高飲料的透明度和口感。超濾離心管是一種高效、精密的分離設(shè)備,普遍應(yīng)用于生物和化學(xué)實驗研究以及工業(yè)生產(chǎn)中。它提供了一種快速、簡便且高效的離心濾膜技術(shù),可以有效地分離目標(biāo)物質(zhì)并提高實驗效率。超濾離心管可用于分離細(xì)胞培養(yǎng)上清中的...
超濾離心管的常見問題與解答,一:超濾離心管的膜材質(zhì)是什么?超濾離心管的膜材質(zhì)為特有的Ultracel再生纖維素膜,生產(chǎn)工藝嚴(yán)格,截留分子量明確而,蛋白吸附損失較小。二:如果要用超濾離心管的方法分離兩種蛋白,那么這兩個蛋白的大小需要相差多少?按照經(jīng)驗,建議兩個蛋白的分子量要相差一個數(shù)量級(10倍)。不保證超濾離心管不包含RNA酶,建議用0.1%DEPC在37度浸泡2小時,以完全滅活RNA酶;殘留的DEPC可以用Milli-Q超純水洗滌除去。去污劑因其獨特的性質(zhì),當(dāng)濃度大于臨界微團(tuán)濃度(Critical Micelle Concentration、CMC)時,去污劑分子會聚集形成微團(tuán)而改變分子構(gòu)象...
一般來說,超濾的回收率可達(dá)90%以上。樣本損失大多是由于濾膜表面和容器表面的非特異性吸附引起的。因此,選擇口碑好、優(yōu)良品質(zhì)的濃縮離心管非常重要。作為過濾方面的老牌公司,提供了多種濃縮離心管,可對50 μl到60 ml的樣本進(jìn)行高效的濃縮和脫鹽。它配備了(改良的聚醚砜)膜,確保低的非特異性吸附和高的回收率。當(dāng)然,這個的前提是你選對了濃縮離心管。濃縮離心管,適合處理不同體積的樣本。你可以根據(jù)你的樣本量來選擇。不過,如果樣本濃度低體積大,可以選擇較小容積的濃縮離心管多次重復(fù)加樣離心。一旦樣本體積確定,下一步就是選擇適當(dāng)?shù)腗WCO。對于蛋白質(zhì)而言,建議所選濾膜的MWCO是欲截留分子大小的1/6-1/3...
超濾是大分子脫鹽、濃縮較方便的方法,重復(fù)性好,得率有保障,已經(jīng)在蛋白、抗體、病毒、核酸、囊泡等樣品制備中建立標(biāo)準(zhǔn)操作;在目前大熱的外泌體制備中也已經(jīng)成為主流方法。超濾管采用離心方式快速處理樣品,是很多科研小伙伴們每天要用到的基本裝備。但是,在默克生命科學(xué)團(tuán)隊推出超濾管中文說明書(AU0.5/4/15)之前,我們發(fā)現(xiàn)近90%的使用者在選擇和使用過程中因為缺乏必要信息而沒有獲得較佳體驗,更重要的是,寶貴的樣本會遭受本可避免的損失!如果目的蛋白是120kDa,請問應(yīng)該選擇的超濾管規(guī)格是100k,50k,還是30k甚至10k?你采用的是1/2,1/3抑或1/6算法?這些沒有統(tǒng)一的說法,是因為不同廠家的...
超濾離心管是內(nèi)部裝有超濾膜的用于濃縮和凈化生物樣本的一次性耗材。15ML的超濾離心管可處理樣品量達(dá)20ML,具有快速超過濾功能,能夠達(dá)到較高的濃縮系數(shù),易于從稀釋液和復(fù)雜的樣本組合進(jìn)行濃縮液回收。豎式設(shè)計以及其雙面的超大過濾面積能提供快速的樣本處理和較高的樣本回收率(通常大于90%稀薄的初始溶液),并能進(jìn)行80倍濃縮。典型的處理時間為15至40分鐘。豎式設(shè)計將溶質(zhì)極化和之后造成的濾膜結(jié)垢降至低,過濾裝置中的物理止濾點防止過濾器旋轉(zhuǎn)過度使樣本干燥和造成樣本損失。濃縮液用移液管從過濾器的樣本槽中收集,而超過濾濾出液則收集到所提供的離心管中。該裝置可在擺桶或定角轉(zhuǎn)子中旋轉(zhuǎn)。的離心管有超過7種不同的截...
超濾離心管的分子量選擇:按照樣品量和目標(biāo)分子量選擇適當(dāng)?shù)某瑸V離心管,為了得到較高的收率,所選濾膜的截留分子量MWCO建議選擇所需截留分子大小的1/3左右,不超過目標(biāo)分子量的一半。因為超濾膜上孔徑是平均孔徑,膜上的孔并非均勻,離心高壓下也可能滲漏,因此截留孔徑越小,流速越慢但截留比例更大。如果樣本濃度低體積大,可選擇較小容積的超濾管多次重復(fù)加樣離心。如果同時需要脫鹽和去除可溶小分子雜質(zhì),可將待濃縮樣品稀釋到超濾管較大容積再離心,重復(fù)2次可除去99%鹽。避免過長時間或者過速離心,雖然優(yōu)良品質(zhì)的產(chǎn)品都有防死端設(shè)計,可避免過度離心造成膜表面干而造成不可逆吸附。超濾離心管可以用于分離各種生物樣品,如血漿...
超濾管采用其特有的再生纖維素膜,定義為:一個確定NMWL 的超濾膜應(yīng)該截留至少90% 以上的這個大小的球形分子,即100kDa的球形蛋白用100k的再生纖維素膜得率超過90%。請仔細(xì)查看以下默克生命科學(xué)官方數(shù)據(jù):(以0.5mL的AU0.5為例,其它型號截留分子量的選擇原則一致,具體離心力和離心時間不同。截留分子量選小啦!看到這個表,你是否發(fā)現(xiàn)原來抱怨超濾管流速偏慢的根源來自對于截留分子量定義的誤解。膜孔徑要小于目的分子這是一原則。如果分子有近似球形的立體結(jié)構(gòu)(而非明顯的線性分子),在再生纖維素超濾膜體系內(nèi),選擇“等于”或“略小于”目的分子的截留分子量的超濾管是較佳選擇,這樣操作起來又快又好,既...
在生物學(xué)領(lǐng)域中,常常被用于細(xì)胞培養(yǎng)液的去除和濃縮。在細(xì)胞培養(yǎng)液中,存在著許多細(xì)胞代謝產(chǎn)物和廢物。使用超濾離心管可以將這些雜質(zhì)去除并濃縮目標(biāo)物質(zhì),從而方便后續(xù)的實驗操作。此外,還可以用來分離、濃縮和純化單個蛋白質(zhì)或核酸分子。在化學(xué)工業(yè)生產(chǎn)中,它同樣具有重要的應(yīng)用價值。例如,在醫(yī)藥工業(yè)生產(chǎn)中,可以使用對某些藥物進(jìn)行純化和分離。此外,在飲料生產(chǎn)中,也可以用于去除懸浮物和有機(jī)色素,提高飲料的透明度和口感。超濾離心管是一種高效、精密的分離設(shè)備,普遍應(yīng)用于生物和化學(xué)實驗研究以及工業(yè)生產(chǎn)中。它提供了一種快速、簡便且高效的離心濾膜技術(shù),可以有效地分離目標(biāo)物質(zhì)并提高實驗效率。超濾離心管通常有不同孔徑大小的超濾膜...
超濾離心管可以滅菌嗎?1. 超濾離心管使用75%的乙醇消毒。2. 不能121℃滅菌,否則會變形,不論是是密理博、頗爾還是賽多利斯的都不能。3. 超濾管應(yīng)當(dāng)干燥保存,買回來的時候就是干的。當(dāng)然也可以濕潤保存,但是應(yīng)當(dāng)保存在20%的乙醇中,是為了防止沒洗去的殘留的液體長菌堵膜。4. 有人說濕潤保存不能干,指的是卷式和板式超濾膜。離心管是一個簡單的可以承受高轉(zhuǎn)速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀。超濾離心管會有一個類似于內(nèi)管和外管的兩個部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當(dāng)高速離心時,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內(nèi)管中),就是超濾的原理.常用于濃...
超濾離心管可以滅菌嗎?1. 超濾離心管使用75%的乙醇消毒。2. 不能121℃滅菌,否則會變形,不論是是密理博、頗爾還是賽多利斯的都不能。3. 超濾管應(yīng)當(dāng)干燥保存,買回來的時候就是干的。當(dāng)然也可以濕潤保存,但是應(yīng)當(dāng)保存在20%的乙醇中,是為了防止沒洗去的殘留的液體長菌堵膜。4. 有人說濕潤保存不能干,指的是卷式和板式超濾膜。離心管是一個簡單的可以承受高轉(zhuǎn)速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀。超濾離心管會有一個類似于內(nèi)管和外管的兩個部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當(dāng)高速離心時,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內(nèi)管中),就是超濾的原理.常用于濃...
超濾離心管也稱為超濾器,是一種用于分離物質(zhì)的設(shè)備。它采用離心力和孔徑較小的濾膜,可以將物質(zhì)中的大分子過濾出去,從而得到高純度的溶液。這種設(shè)備普遍應(yīng)用于生物和化學(xué)領(lǐng)域的實驗研究及工業(yè)生產(chǎn)中。工作原理是利用離心力使樣品中的分子向離心管的外側(cè)沉積,與超濾膜發(fā)生作用。超濾膜是一種擁有精密孔徑的薄膜,可以將分子按照大小分離。此時,分子將被分為兩個部分,一部分是通過超濾膜的小分子,另一部分是被卡在濾膜上的大分子。與傳統(tǒng)的過濾器相比,它具有更高的分離效率和更強(qiáng)的選擇性。超濾膜的孔徑可以根據(jù)需要調(diào)整,從而實現(xiàn)對不同分子的精確分離。使用它可以得到高濃度和高純度的分離物,同時還可以快速地分離樣品中的各個分子成分,...
我們通常會以1/3到1/6甚至更低的區(qū)間來選擇超濾管的孔徑,通常更小的孔徑會使回收率提高但是超濾的時間也會比較長。一定范圍內(nèi),超濾的回收率和速度是一對矛盾體,因此可以通過優(yōu)化孔徑的選擇,在回收率可以接受的條件下選擇較大的孔徑,來提高超濾的速度。低溫如< 10 ℃,液體的粘度會增加,流動性會降低,因此液體的跨膜速率也會降低。適當(dāng)提高超濾溫度,往往能夠提高超濾的速度。有些客戶需要做幾十ml到幾百ml樣品的濃縮或者緩沖液置換,但是卻使用1支或幾支15ml的超濾管反復(fù)離心來完成操作,這樣必然造成時間上的浪費。怎么辦?一定要挑選適合處理量的產(chǎn)品,減少不必要的反復(fù)離心從而提升超濾的效率。超濾離心管還可用于...
超濾離心管只需5到15分鐘,即可對50到500L樣本進(jìn)行簡便、可靠的濃縮與脫鹽處理:快速處理樣本。通常,回收率高于90%;備有低蛋白質(zhì)結(jié)合的Omega、Bio-Inert或GHP濾膜可供選擇。對應(yīng)各種截留分子量,備有各種編碼以供輕松識別的顏色可供選擇。結(jié)構(gòu)材料為低結(jié)合聚丙烯。超聲焊接密封,防止側(cè)流或密封不嚴(yán)。適用于配合1.5mL試管的標(biāo)準(zhǔn)離心轉(zhuǎn)子。超濾離心管通常不需要預(yù)處理即可使用,不過對于蛋白質(zhì)樣本處理,特別是較稀的蛋白質(zhì)溶液來說( 90% 的樣品回收率),以及 80~100 倍濃縮的能力。濃縮物使用吸液器從過濾裝置中收集,而超濾液則在提供的離心管中收集。超濾離心管是一種可以為蛋白質(zhì)樣本的濃...
玻璃離心管玻璃離心管是由玻璃制成的,不同廠家可能使用的玻璃成分不同,所以強(qiáng)度上可能會略有差異。我們的普通玻璃試管可以承受的相對離心力(RCF) 通常小于3000g ,而硼硅玻璃管一般可以承受超過10000g 以上的相對離心力。但由于玻璃離心管質(zhì)量易碎,所以玻璃管一般不用于高速離心機(jī),用得也不多。由于玻璃本身的特性,它具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性,能與酸、堿和有機(jī)溶劑和平共存。玻璃管外形穩(wěn)定,能承受一定程度的擠壓,但不能抵抗碰撞,在 高速離心時容易破碎,雖然能抵抗高溫,能抵抗熱沖擊,但在溫度突然劇烈變化的環(huán)境中也很容易斷裂。超濾離心管通常具有不同材質(zhì)的選擇,以適應(yīng)不同化學(xué)環(huán)境下的使用需求。紹興高離心力離...
選擇合適的超濾管。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認(rèn)真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同。新買來的超濾是干燥的,使用前加入超純水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預(yù)冷。平衡。質(zhì)量和重心二者都要達(dá)到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機(jī)預(yù)冷至4度)。超濾離心管可以用于提取土壤...
超濾離心管(JetSpinTM -5、15)分別可處理體積5mL和15mL以內(nèi)的樣本,離心管包含一個內(nèi)置聚醚砜(PES)膜過濾裝置,聚醚砜膜具備低蛋白附著、高通量的特點,可應(yīng)用在多種不同的截留分子量中,一般來說回收率能夠達(dá)到90%以上。超濾離心管是一種用于分離液體的工具,常用于生物學(xué)和化學(xué)研究中。它的使用方法如下:1.將樣品液體加入超濾離心管內(nèi)。2.將超濾離心管放入離心機(jī)中進(jìn)行離心。3.離心結(jié)束后,打開離心管,收集離心液。4.根據(jù)需要,可以在使用前或使用后對超濾離心管進(jìn)行清洗和消毒。注意:每個研究史都有丕回要求:縣體操作應(yīng)根據(jù)實驗所盂進(jìn)行調(diào)整。超濾離心管還可以用于濃縮樣品,減少其體積并提高濃度...
超濾作為一種膜分離技術(shù),普遍應(yīng)用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換,其原理是溶液在力的作用下,通過超濾膜孔徑的篩濾,大分子量的顆粒被截留下來,而水、溶劑和低分子量溶質(zhì)則允許透過膜,從而達(dá)到濃縮、脫鹽和緩沖液置換的目的,這種方法較大的特點是操作簡便、快速、高效,可同時濃縮和純化分子,一般來說超濾的回收率能夠達(dá)到90%以上,因此得到許多人的青睞。超濾濃縮器是一種可以為蛋白質(zhì)樣本的濃縮和緩沖交換提供可靠準(zhǔn)確結(jié)果的一次性超濾離心式過濾裝置,與層析、透析等方法相比,超濾對被處理的分子更加溫和,不需要有機(jī)萃取,不會導(dǎo)致蛋白變性,且簡單高效。潔特6mL規(guī)格超濾濃縮器可處理體積4mL以內(nèi)的樣本,離心管內(nèi)包含一...
超濾作為一種膜分離技術(shù),普遍應(yīng)用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換,其原理是溶液在力的作用下,通過超濾膜孔徑的篩濾,大分子量的顆粒被截留下來,而水、溶劑和低分子量溶質(zhì)則允許透過膜,從而達(dá)到濃縮、脫鹽和緩沖液置換的目的,這種方法較大的特點是操作簡便、快速、高效,可同時濃縮和純化分子,一般來說超濾的回收率能夠達(dá)到90%以上,因此得到許多人的青睞。超濾濃縮器是一種可以為蛋白質(zhì)樣本的濃縮和緩沖交換提供可靠準(zhǔn)確結(jié)果的一次性超濾離心式過濾裝置,與層析、透析等方法相比,超濾對被處理的分子更加溫和,不需要有機(jī)萃取,不會導(dǎo)致蛋白變性,且簡單高效。潔特6mL規(guī)格超濾濃縮器可處理體積4mL以內(nèi)的樣本,離心管內(nèi)包含一...
超濾離心管,備有四種材質(zhì)的超濾膜:聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據(jù)不同要求靈活選用;兩種回收濃縮液的方法:既可用吸管直接吸取并回收,又可將離心管放入離心機(jī)反甩,將濃縮液甩入回收帽中,加蓋保存。這兩種方法都可使?jié)饪s液達(dá)到近乎完全回收;截留分子量普遍,配有3K、5K、10k、30K、50K、100K、300K、1000K、0.2μl的聚醚砜膜;新推出產(chǎn)品膜2K型,具有極低的蛋白吸附特性,高流速、高通量,是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜。用以濃縮蛋白,如果要換Buffer,在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候,輕輕加入新的Buffer(經(jīng)0.22um超濾膜超濾),再 濃縮至1...
超濾離心管的分子量選擇:按照樣品量和目標(biāo)分子量選擇適當(dāng)?shù)某瑸V離心管,為了得到較高的收率,所選濾膜的截留分子量MWCO建議選擇所需截留分子大小的1/3左右,不超過目標(biāo)分子量的一半。因為超濾膜上孔徑是平均孔徑,膜上的孔并非均勻,離心高壓下也可能滲漏,因此截留孔徑越小,流速越慢但截留比例更大。如果樣本濃度低體積大,可選擇較小容積的超濾管多次重復(fù)加樣離心。如果同時需要脫鹽和去除可溶小分子雜質(zhì),可將待濃縮樣品稀釋到超濾管較大容積再離心,重復(fù)2次可除去99%鹽。避免過長時間或者過速離心,雖然優(yōu)良品質(zhì)的產(chǎn)品都有防死端設(shè)計,可避免過度離心造成膜表面干而造成不可逆吸附。避免過度濃縮,體積越小,越容易因表面吸附而...
當(dāng)濃縮到剩下1ml時,取50ul緩沖溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍(lán)色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mgml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測,繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀,導(dǎo)致堵管。若發(fā)生沉淀,要確定沉淀的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,后者的方法是換不同的緩沖溶液,直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。超濾離心管通常被用于天然藥物研究和制備中。寧波再生纖維素...
超濾管產(chǎn)品系列包括5種不同的截留分子量(即標(biāo)稱分子量限值, NMWL)。這些超濾管只供研究使用,不適用于診斷程序。1).濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(DNA/RNA樣本,單鏈或雙鏈)、噬菌體等微生物樣本。2).純化組織培養(yǎng)提取液或細(xì)胞裂解液中的大分子成分,去除反應(yīng)液中的引物、接頭或分子標(biāo)記,在HPLC前去除蛋白質(zhì)。3).除鹽,緩沖液更換,或滲濾。超濾管提供了兩個微量離心管。在操作過程中,一個用于收集濾出液,而另一個用于回收濃縮后的樣本。超濾管的超濾膜含有微量甘油。如果擔(dān)心干擾后續(xù)分析,可用緩沖液或Milli-Q水進(jìn)行預(yù)清洗。如果干擾仍然存在,可用0.1M NaOH清洗,再用緩沖液或Milli-...