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  • 黑龍江胰酶供應(yīng)商
    黑龍江胰酶供應(yīng)商

    6.磷酸酶EDTA相對不溶??梢杂么帕嚢杵鲾嚢瑁?qū)⑵渲糜?度的冰箱中,溶解后過濾并**。7.可配備2-3倍血漿酶,節(jié)省時間和過濾器。使用時,請對PBS消毒。8.將儲存溶液儲存在-20°C的冰箱中,然后將溶液儲存在4°C。使用時,請勿將其放在27°C的水浴中,因為這會使自由基酶迅速無法使用。使用前放置一次。是的,因為添加的數(shù)量很少,因此通常不會凍結(jié)細(xì)胞。9.在消化過程中,向培養(yǎng)瓶中加入適量的胰酶。個人經(jīng)驗,一般在10cm培養(yǎng)皿中加。加入后,立即搖動培養(yǎng)皿蓋住胰酶。一旦充滿,用負(fù)壓吸引多余的胰酶排出,將其加入37度培養(yǎng)箱中進(jìn)行消化。10.請注意,過量的胰酶對細(xì)胞有害,而過量的EDTA也...

  • 貴州胰酶生產(chǎn)企業(yè)
    貴州胰酶生產(chǎn)企業(yè)

    胰酶操作步驟: (*供參考) :1. 吸取培養(yǎng)基,用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以除去殘余的血清。2. 加入適量的胰蛋白酶消化液,略蓋過細(xì)胞即可。根據(jù)細(xì)胞的特性可以增加或減少胰酶用量,室溫放置30秒至2分鐘。(不同的細(xì)胞消化時間有所不同)3. 顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化呈白茫狀;或者用***吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來。4. 此時吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的完全細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗。如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入胰酶細(xì)胞消化液重新消化。 胰酶和胰蛋白酶不一樣,前者包括后者。貴州...

  • 寧夏進(jìn)口胰酶價格信息
    寧夏進(jìn)口胰酶價格信息

    胰蛋白酶(Trypsin)是由胰臟產(chǎn)生沒有活性的胰蛋白酶原分泌到小腸后,小腸內(nèi)的腸肽酶會活化該酶原,形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特點(diǎn)在于已經(jīng)活化的胰蛋白酶,能夠繼續(xù)活化更多胰蛋白酶原,這種過程即自動催化。胰蛋白酶在小腸工作,它會將蛋白質(zhì)水解為肽進(jìn)而分解為氨基酸,其**適溫度約為 37°℃。Trypsin solution(2.5%)由 2.5%胰酶組成,不含 EDTA,經(jīng)過濾除菌。本試劑可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,或者一些組織的消化,通常室溫下 1min 左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞。該溶液濃度較高,可以稀釋到相應(yīng)濃度后使用。胰酶用0.05%還是0.25%的?需不需要含酚紅的?寧夏進(jìn)口胰酶價格信...

  • 青海胰酶聯(lián)系方式
    青海胰酶聯(lián)系方式

    0.25%胰酶是細(xì)胞生物學(xué)中常用的一種生物試劑,下面匯總一下胰酶使用過程中常見的一些問題。胰酶的使用濃度是多少?胰酶濃度:常用0.25%胰酶+0.02%EDTA作為消化液。為什么收到的胰酶會有顏色差異?商品化胰酶溶液需要用干冰運(yùn)輸,在運(yùn)輸過程中,胰酶溶液中的二氧化碳與干冰揮發(fā)的二氧化碳可能會極少部分的氣體交換,導(dǎo)致溶液PH的漂移。有些胰酶溶液里含有酚紅作為PH值指示劑,因此胰酶PH的變化是肉眼可觀察到的。由干冰運(yùn)輸過程中導(dǎo)致的PH值的變化很小,PH值會從7.2-8.0變化到了6.8左右,在PH值7.2-8.0的時候,溶液呈淡紅色;PH值6.8左右時呈淡黃色。因此胰酶顏色的變化是由PH值的變化引...

  • 中國香港EDTA胰酶介紹
    中國香港EDTA胰酶介紹

    乙二胺四乙酸:(EDTA)是一種有機(jī)化合物,常溫常壓下為白色粉末。它是一種能與Mg2+、Ca2+、Mn2+、Fe2+等二價金屬離子結(jié)合的螯合劑。動物細(xì)胞在粘附的時候,需要有Ca或Mg離子的參與,EDTA與他們結(jié)合后,導(dǎo)致動物細(xì)胞粘附能力降低,再加上胰蛋白酶的消化作用,使得細(xì)胞與瓶壁快速脫離。兩者起到了協(xié)同消化的作用。難消化的細(xì)胞,胰酶中可填加EDTA。EDTA對細(xì)胞貼壁性有影響,因此使用時要甚重。如果影響貼壁,但消化時必須要用,那么在用完全培養(yǎng)基終止消化后,可離心棄上清,再加完全培養(yǎng)基培養(yǎng),可去除EDTA。如果對貼壁沒影響,那么可不離心。如果消化液中含有胰酶和EDTA,好去除。中國香港EDTA...

  • 新疆進(jìn)口胰酶報價
    新疆進(jìn)口胰酶報價

    淡黃色的胰酶溶液能放心使用嗎?能,對于胰酶呈黃色的問題,不同品牌也都對此現(xiàn)象進(jìn)行了測試實(shí)驗。變色的胰酶同樣能很好的用于細(xì)胞的解離,請放心使用。細(xì)胞消化時,胰酶不去除對細(xì)胞的影響?細(xì)胞消化時,如果消化液中只有胰酶,不含EDTA,不去除是沒有問題的。如果消化液中含有胰酶和EDTA,比較好去除。EDTA是一種化學(xué)螯合劑,主要作用在于能螯合Ca、Mg離子,使細(xì)胞分離。但EDTA不能被血清中和,消化后要徹底清洗去除,否則細(xì)胞易脫壁。胰酶胰酶和EDTA聯(lián)合使用可提高消化效率,所以常二者合用。胰酶的保存0.25%胰酶細(xì)胞消化液(含有EDTA,含酚紅)消化細(xì)胞時間不宜過長。新疆進(jìn)口胰酶報價 只斷裂賴氨酸...

  • 江西重組胰酶生產(chǎn)企業(yè)
    江西重組胰酶生產(chǎn)企業(yè)

    在組織細(xì)胞的體外培養(yǎng)和原代細(xì)胞培養(yǎng)中的組織細(xì)胞分散(將組織塊制備成單個細(xì)胞懸液)以及傳代細(xì)胞培養(yǎng)中,貼壁生長細(xì)胞的消化分散均要使用組織細(xì)胞消化液。常用的消化液為胰蛋白酶 (Trypsin) ,EDTA 等。胰蛋白酶是一種絲氨酸水解酶,它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)切段,水解細(xì)胞間的蛋白質(zhì),破壞細(xì)胞間的連接,從而使組織或貼壁細(xì)胞離散成單個細(xì)胞。胰酶分散細(xì)胞的活性與組織或細(xì)胞的特性、胰酶濃度、溫度和作用時間有關(guān),在PH 8.0和37℃時,胰酶的作用能力**強(qiáng),因此使用胰酶時,應(yīng)把握好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細(xì)胞損傷。一般常用胰酶的工作濃度為0.25%,而半貼壁細(xì)胞或?qū)σ让该舾?..

  • 甘肅重組胰酶有哪些
    甘肅重組胰酶有哪些

    收藏查看我的收藏0有用+1已投票0胰蛋白酶編輯鎖定本詞條由“科普**”百科科學(xué)詞條編寫與應(yīng)用工作項目審核。胰蛋白酶Trypsin(Parenzyme)為蛋白酶的一種,EC,是從牛、羊、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。在脊椎動物中,作為消化酶而起作用。在胰臟是胰蛋白酶的前體胰蛋白酶原被合成后,作為胰液的成分而分泌,受腸激酶,或胰蛋白酶的限制分解成為活化胰蛋白酶,是肽鏈內(nèi)切酶,它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)切斷。它不僅起消化酶的作用,而且還能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前體,起活化作用。是特異性**強(qiáng)的蛋白酶,在決定蛋白質(zhì)的氨基酸排列中,它成為不可缺少的...

  • 中國澳門胰酶生產(chǎn)企業(yè)
    中國澳門胰酶生產(chǎn)企業(yè)

    胰蛋白酶**點(diǎn)評胰蛋白酶能使痰、血凝塊溶化變稀,易于引流排痰,加速創(chuàng)面愈合凈化,促進(jìn)肉芽**增生,而不損傷正常**,臨床上有消消腫功能。[4]胰蛋白酶其他胰蛋白酶細(xì)胞培養(yǎng)胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的**或者細(xì)胞對胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關(guān),在pH為、溫度為37℃時,胰酶溶液的作用能力**強(qiáng)。使用胰酶時,應(yīng)把握好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細(xì)胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)可降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液時應(yīng)選用不含Ca2+、Mg2+的BSS,如:D-Hanks液。終止消化時,可用含有血清培養(yǎng)液或...

  • 中國澳門國產(chǎn)胰酶介紹
    中國澳門國產(chǎn)胰酶介紹

    胰酶中的酚紅有哪些作用?酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為pH指示劑,中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明:酚紅可以模擬固醇類***(特別是雌***)的作用。為避免固醇類反應(yīng),培養(yǎng)細(xì)胞尤其是哺乳類細(xì)胞時,建議用不含酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,在做流式細(xì)胞檢測時,也會使用不含酚紅的培養(yǎng)基或者胰酶。圖 2. Phenol red test圖片來源網(wǎng)絡(luò)8、在做細(xì)胞凋亡檢測時,細(xì)胞為什么不能用含有EDTA的胰酶消化?Annexin V(膜聯(lián)蛋白)是Ca2+依賴的蛋白,EDTA會螯合Ca2+從而影響Annexin V,進(jìn)而影響結(jié)果,因此需選用不含EDTA的胰酶。建議放入培養(yǎng)箱中進(jìn)行消化,時間可以...

  • 湖南胰酶價格信息
    湖南胰酶價格信息

    胰酶消化貼璧細(xì)胞原理胰酶是一種重要的消化酶,它在人體消化過程中起到了關(guān)鍵作用。胰酶主要由胰腺分泌,它能夠幫助人體消化食物中的蛋白質(zhì)、脂肪和碳水化合物等營養(yǎng)物質(zhì)。而胰酶消化貼壁細(xì)胞則是指胰酶在消化過程中與腸道內(nèi)的貼壁細(xì)胞發(fā)生作用的機(jī)制。胰酶消化貼壁細(xì)胞的原理主要包括胰酶的合成、分泌和作用三個過程首先是胰酶的合成。胰酶是由胰腺內(nèi)的特殊細(xì)胞合成的。這些細(xì)胞受到胃內(nèi)食物的刺激后,通過胰腺神經(jīng)末梢的刺激而開始合成和分泌胰酶。合成的胰酶經(jīng)過胰管進(jìn)入小腸。接下來是胰酶的分泌。胰酶的分泌主要通過胰腺分泌液的產(chǎn)生和排泄來實(shí)現(xiàn)。當(dāng)胃內(nèi)食物通過幽門進(jìn)入小腸后,小腸壁上的細(xì)胞會分泌一種叫做胃腺素的物質(zhì),這種物質(zhì)能...

  • 中國澳門進(jìn)口胰酶哪家便宜
    中國澳門進(jìn)口胰酶哪家便宜

    胰酶消化液(TrypsinSolution)操作步驟(一)獲得目的基因1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA***鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體1、胰酶消化液(TrypsinSolution)載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。2、PCR產(chǎn)物雙酶...

  • EDTA胰酶價格對比
    EDTA胰酶價格對比

    1、細(xì)胞培養(yǎng)過程中為什么要使用胰酶呢?胰酶的作用是什么?胰酶是一種蛋白酶,酶切位點(diǎn)是肽鏈的Lys或Arg兩個殘基的羧基端肽鏈,通過在特定位置上降解蛋白,使細(xì)胞膜上與培養(yǎng)皿壁結(jié)合處蛋白降解,從而使兩者分離。這時,細(xì)胞由于自身內(nèi)部細(xì)胞骨架的張力以及培養(yǎng)液表面張力可成為球形。圖1.胰酶酶切位點(diǎn)2、使用胎牛血清培養(yǎng)細(xì)胞,在使用胰酶消化時發(fā)現(xiàn)血清可以終止此過程,這是什么原因?血清終止的原理其實(shí)是競爭抑制,就是用過量的牛血清中含有的蛋白和胰酶結(jié)合,使胰酶失去消化細(xì)胞蛋白的機(jī)會。3、為什么使用了胰蛋白酶消化,細(xì)胞還是成團(tuán)的,這可能是什么原因?qū)е碌??①消化時間不夠②吹打力度不夠③胰酶消化液濃度不夠④細(xì)胞密度過...

  • 青海國產(chǎn)胰酶
    青海國產(chǎn)胰酶

    胰蛋白酶是一種肽鏈內(nèi)切酶,屬于絲氨酸蛋白酶家族,不僅可以水解堿性氨基酸(精氨酸或賴氨酸)羧基端的肽鍵,還可以水解由堿性氨基酸的羧基形成的酰胺鍵或酯鍵。胰蛋白酶可以從牛、豬等哺乳動物的胰臟提取,經(jīng)過純化后獲得結(jié)晶,再制成凍干制劑。牛的胰蛋白酶有223個氨基酸,分子量為23800道爾頓,活性部位的絲氨酸殘基是不可缺少的絲氨酸蛋白酶。胰蛋白酶溶于水,不溶于乙醇、甘油和三氯甲烷等有機(jī)溶劑。胰蛋白酶的等電點(diǎn)pH值為10.1,**適pH值范圍在7.8~8.5左右,pH值大于9.0時不可逆失活。鈣離子對胰蛋白酶的酶活具有保護(hù)和***作用。[1]胰酶溶液中的二氧化碳與干冰揮發(fā)的二氧化碳可能會極少部分的氣體交換...

  • 山東EDTA胰酶牌子
    山東EDTA胰酶牌子

    胰蛋白酶是一種肽鏈內(nèi)切酶,屬于絲氨酸蛋白酶家族,不僅可以水解堿性氨基酸(精氨酸或賴氨酸)羧基端的肽鍵,還可以水解由堿性氨基酸的羧基形成的酰胺鍵或酯鍵。胰蛋白酶可以從牛、豬等哺乳動物的胰臟提取,經(jīng)過純化后獲得結(jié)晶,再制成凍干制劑。牛的胰蛋白酶有223個氨基酸,分子量為23800道爾頓,活性部位的絲氨酸殘基是不可缺少的絲氨酸蛋白酶。胰蛋白酶溶于水,不溶于乙醇、甘油和三氯甲烷等有機(jī)溶劑。胰蛋白酶的等電點(diǎn)pH值為10.1,**適pH值范圍在7.8~8.5左右,pH值大于9.0時不可逆失活。鈣離子對胰蛋白酶的酶活具有保護(hù)和***作用。[1]胰酶PH的變化是肉眼可觀察到的。山東EDTA胰酶牌子 胰酶和雙...

  • 河南胰酶生產(chǎn)企業(yè)
    河南胰酶生產(chǎn)企業(yè)

    胰蛋白酶:(Trypsin)為蛋白酶的一種,是從牛、羊、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。由223個氨基酸殘基組成的單鏈多肽,主要切割賴氨酸和精氨酸羧基端。按干燥品計算,每1mg中胰蛋白酶的活力不得少于2500單位。作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關(guān),在pH為、溫度為37℃時,胰酶溶液的作用能力**強(qiáng)。使用胰酶時,應(yīng)把握好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細(xì)胞損傷。終止消化時,可用含有血清培養(yǎng)液終止胰酶對細(xì)胞的作用。有些細(xì)胞容易消化(如雞胚原代成纖維細(xì)胞)可用胰酶進(jìn)行消化,可以不加E...

  • 江西重組胰酶價格
    江西重組胰酶價格

    對一般細(xì)胞0.25%胰酶(胰蛋白酶,Trypsin)配方:100mlPBS,0.25g胰酶步驟:1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O/2.9gPO4HNa2,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸餾水)2稱胰酶0.25g3加入PBS中,低速攪拌〈4h冰浴中,或者4℃過夜低速攪拌0.5h冰浴中4調(diào)PH7.45仍在冰浴中6過濾,分裝,-20℃保存,4℃短期內(nèi)用完tip:低速很重要,機(jī)械攪拌對酶是一種沖擊,如果起沫,酶就變性了。低溫,防止酶失活對難消化的細(xì)胞:在上述配方中,加入0.02g的EDTA(0.02%)tip:...

  • 甘肅EDTA胰酶有哪些
    甘肅EDTA胰酶有哪些

    1、胰酶是,就是說PBS,注意,盡量不要用水來溶,因為要保持滲透壓。2、EDTA的工作液溶度是-,根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度自己調(diào)整。EDTA并不是必須的,容易消化的細(xì)胞可不加。EDTA對細(xì)胞貼壁性有影響,因此使用時要甚重。如果影響貼壁,但消化時必須要用,那么在用完全培養(yǎng)基終止消化后,可離心棄上清,再加完全培養(yǎng)基培養(yǎng),可去除EDTA。如果對貼壁沒影響,那么可不離心。3、EDTA的濃度也是質(zhì)量體積比。和胰酶一起溶于PBS。4、注意,血清可終止胰酶的作用,但不能終止EDTA的作用,對有些細(xì)胞來說,終止消化后的離心是必要的。5、胰酶和EDTA在pH為8左右的時候**易溶解,在配制時可先滴幾滴NaOH將p...

  • 湖南國產(chǎn)胰酶哪個好
    湖南國產(chǎn)胰酶哪個好

    胰酶分裝凍存時要注意什么?胰酶分裝時盡量分裝成多瓶,并遵守3次左右用完和只裝2/3體積的原則。因為冷凍保存時體積會膨脹,多次使用同一瓶胰酶反復(fù)凍融會降低消化效果并增大污染的可能性。5、怎么才能判斷胰酶消化完全?注意:不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才表示消化好了。一般肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動了,多半呈沙狀移動就可以了,就應(yīng)該停止消化。6、胰酶適用于哪些細(xì)胞消化?它的消化效果與哪些有關(guān)呢?胰酶適用于消化細(xì)胞間質(zhì)較少的軟組織和傳代細(xì)胞,如胚胎、上皮、肝、腎等組織,但對纖維性組織和較硬的*組織效果較差。胰酶的消化效果主要與pH值、溫度、胰酶濃度、組織塊大小和硬度有關(guān)。胰蛋白酶溶液作為細(xì)胞...

  • 新疆胰酶
    新疆胰酶

    品名:0.25%胰蛋白酶溶液,1X分類:細(xì)胞消化試劑規(guī)格:100ML用途:消化試劑,如胰蛋白酶,被用于將粘附細(xì)胞從其附著的表面或底物上分離和降解,以及將組織進(jìn)行游離,以開展原代細(xì)胞培養(yǎng)。產(chǎn)品包括2種常用濃度的γ照射豬胰蛋白酶(1:250)以及一種新型非哺乳動物豬胰蛋白酶替代品,稱為ThermoScientificHyQTaseTM.HyQTase是一種蛋白水解酶和膠原水解酶的混合超濾溶液,可以快速消化,同時不損傷細(xì)胞。其非哺乳動物配方使它適用于無血清應(yīng)用,不需要失效或?qū)γ敢种苿?。此試劑可使?xì)胞被快速分離,形成單細(xì)胞懸浮物,保持高細(xì)胞活力,并使傳代時的變異減至**小。在使用胰酶細(xì)胞消化液的過程中...

  • 河北EDTA胰酶介紹
    河北EDTA胰酶介紹

    ①制備粗酶液稱取定量粗胰酶,其胰蛋白酶活性為,胰淀粉酶活性為,胰脂肪酶活性為。將其用pH值為、濃度為0.2mol/L的乙酸-乙酸鈉緩沖液溶解,然后進(jìn)行真空過濾,收集濾液并用磷酸緩沖液進(jìn)行稀釋,使胰蛋白酶活性為3-10U/mg,備用。②制備反膠束將AOT置于100℃烘箱中干燥至恒重,放入干燥器中冷卻至室溫。然后稱取,加入10L異辛烷,在攪拌下使其形成均勻的分散液,再加入定量蒸餾水,在200r/min的轉(zhuǎn)速下處理2h,獲得濃度為。使用時用異辛烷稀釋10倍。③萃取將稀釋10倍的AOT-異辛烷反膠束置于萃取器中,按照AOT異辛烷反膠束:粗酶溶液體積比為(2-3):1的比例加入粗酶溶液萃取3...

  • 山東進(jìn)口胰酶報價
    山東進(jìn)口胰酶報價

    ①制備粗酶液稱取定量粗胰酶,其胰蛋白酶活性為,胰淀粉酶活性為,胰脂肪酶活性為。將其用pH值為、濃度為0.2mol/L的乙酸-乙酸鈉緩沖液溶解,然后進(jìn)行真空過濾,收集濾液并用磷酸緩沖液進(jìn)行稀釋,使胰蛋白酶活性為3-10U/mg,備用。②制備反膠束將AOT置于100℃烘箱中干燥至恒重,放入干燥器中冷卻至室溫。然后稱取,加入10L異辛烷,在攪拌下使其形成均勻的分散液,再加入定量蒸餾水,在200r/min的轉(zhuǎn)速下處理2h,獲得濃度為。使用時用異辛烷稀釋10倍。③萃取將稀釋10倍的AOT-異辛烷反膠束置于萃取器中,按照AOT異辛烷反膠束:粗酶溶液體積比為(2-3):1的比例加入粗酶溶液萃取3...

  • 河北胰酶產(chǎn)品介紹
    河北胰酶產(chǎn)品介紹

    細(xì)胞消化胰酶的配制對一般細(xì)胞0.25%胰酶(胰蛋白酶,Trypsin)配方:100mlPBS,0.25g胰酶步驟:1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O/2.9gPO4HNa2,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸餾水)2稱胰酶0.25g3加入PBS中,低速攪拌〈4h冰浴中,或者4℃過夜低速攪拌0.5h冰浴中4調(diào)PH7.45仍在冰浴中6過濾,分裝,-20℃保存,4℃短期內(nèi)用完tip:低速很重要,機(jī)械攪拌對酶是一種沖擊,如果起沫,酶就變性了。低溫,防止酶失活對難消化的細(xì)胞:在上述配方中,加入0.02g的EDTA(0...

  • 福建進(jìn)口胰酶介紹
    福建進(jìn)口胰酶介紹

    1、細(xì)胞培養(yǎng)過程中為什么要使用胰酶呢?胰酶的作用是什么?胰酶是一種蛋白酶,酶切位點(diǎn)是肽鏈的Lys或Arg兩個殘基的羧基端肽鏈,通過在特定位置上降解蛋白,使細(xì)胞膜上與培養(yǎng)皿壁結(jié)合處蛋白降解,從而使兩者分離。這時,細(xì)胞由于自身內(nèi)部細(xì)胞骨架的張力以及培養(yǎng)液表面張力可成為球形。圖1.胰酶酶切位點(diǎn)2、使用胎牛血清培養(yǎng)細(xì)胞,在使用胰酶消化時發(fā)現(xiàn)血清可以終止此過程,這是什么原因?血清終止的原理其實(shí)是競爭抑制,就是用過量的牛血清中含有的蛋白和胰酶結(jié)合,使胰酶失去消化細(xì)胞蛋白的機(jī)會。3、為什么使用了胰蛋白酶消化,細(xì)胞還是成團(tuán)的,這可能是什么原因?qū)е碌??①消化時間不夠②吹打力度不夠③胰酶消化液濃度不夠④細(xì)胞密度過...

  • 中國臺灣EDTA胰酶一般多少錢
    中國臺灣EDTA胰酶一般多少錢

    1、細(xì)胞培養(yǎng)過程中為什么要使用胰酶呢?胰酶的作用是什么?胰酶是一種蛋白酶,酶切位點(diǎn)是肽鏈的Lys或Arg兩個殘基的羧基端肽鏈,通過在特定位置上降解蛋白,使細(xì)胞膜上與培養(yǎng)皿壁結(jié)合處蛋白降解,從而使兩者分離。這時,細(xì)胞由于自身內(nèi)部細(xì)胞骨架的張力以及培養(yǎng)液表面張力可成為球形。圖1.胰酶酶切位點(diǎn)2、使用胎牛血清培養(yǎng)細(xì)胞,在使用胰酶消化時發(fā)現(xiàn)血清可以終止此過程,這是什么原因?血清終止的原理其實(shí)是競爭抑制,就是用過量的牛血清中含有的蛋白和胰酶結(jié)合,使胰酶失去消化細(xì)胞蛋白的機(jī)會。3、為什么使用了胰蛋白酶消化,細(xì)胞還是成團(tuán)的,這可能是什么原因?qū)е碌??①消化時間不夠②吹打力度不夠③胰酶消化液濃度不夠④細(xì)胞密度過...

  • 河南EDTA胰酶采購
    河南EDTA胰酶采購

    胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對胰酶的作用反應(yīng)不一樣胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關(guān),在pH為8.0、溫度為37°℃時,胰酶溶液的作用能力**強(qiáng)。使用胰酶時,應(yīng)把握好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細(xì)胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)可降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液時應(yīng)選用不含Ca2+、Mg2+的BSS,如:D-Hanks液。終止消化時,可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對細(xì)胞的作用。胰蛋白酶是一種胰絲氨酸肽鏈內(nèi)切酶,作用于多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)。河南EDTA胰酶采購胰蛋白酶(Trypsin)簡稱胰酶,是一...

  • 進(jìn)口胰酶聯(lián)系方式
    進(jìn)口胰酶聯(lián)系方式

    胰蛋白酶(Trypsin)是由胰臟產(chǎn)生沒有活性的胰蛋白酶原分泌到小腸后,小腸內(nèi)的腸肽酶會活化該酶原,形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特點(diǎn)在于已經(jīng)活化的胰蛋白酶,能夠繼續(xù)活化更多胰蛋白酶原,這種過程即自動催化。胰蛋白酶在小腸工作,它會將蛋白質(zhì)水解為肽進(jìn)而分解為氨基酸,其**適溫度約為 37°℃。Trypsin solution(2.5%)由 2.5%胰酶組成,不含 EDTA,經(jīng)過濾除菌。本試劑可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,或者一些組織的消化,通常室溫下 1min 左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞。該溶液濃度較高,可以稀釋到相應(yīng)濃度后使用。EDTA是乙二胺四乙酸,一種金屬螯合劑。進(jìn)口胰酶聯(lián)系方式 只斷裂...

  • 廣東重組胰酶價格
    廣東重組胰酶價格

    ①制備粗酶液稱取定量粗胰酶,其胰蛋白酶活性為,胰淀粉酶活性為,胰脂肪酶活性為。將其用pH值為、濃度為0.2mol/L的乙酸-乙酸鈉緩沖液溶解,然后進(jìn)行真空過濾,收集濾液并用磷酸緩沖液進(jìn)行稀釋,使胰蛋白酶活性為3-10U/mg,備用。②制備反膠束將AOT置于100℃烘箱中干燥至恒重,放入干燥器中冷卻至室溫。然后稱取,加入10L異辛烷,在攪拌下使其形成均勻的分散液,再加入定量蒸餾水,在200r/min的轉(zhuǎn)速下處理2h,獲得濃度為。使用時用異辛烷稀釋10倍。③萃取將稀釋10倍的AOT-異辛烷反膠束置于萃取器中,按照AOT異辛烷反膠束:粗酶溶液體積比為(2-3):1的比例加入粗酶溶液萃取3...

  • 寧夏國產(chǎn)胰酶介紹
    寧夏國產(chǎn)胰酶介紹

    淡黃色的胰酶溶液能放心使用嗎?能,對于胰酶呈黃色的問題,不同品牌也都對此現(xiàn)象進(jìn)行了測試實(shí)驗。變色的胰酶同樣能很好的用于細(xì)胞的解離,請放心使用。細(xì)胞消化時,胰酶不去除對細(xì)胞的影響?細(xì)胞消化時,如果消化液中只有胰酶,不含EDTA,不去除是沒有問題的。如果消化液中含有胰酶和EDTA,比較好去除。EDTA是一種化學(xué)螯合劑,主要作用在于能螯合Ca、Mg離子,使細(xì)胞分離。但EDTA不能被血清中和,消化后要徹底清洗去除,否則細(xì)胞易脫壁。胰酶胰酶和EDTA聯(lián)合使用可提高消化效率,所以常二者合用。胰酶的保存消化液經(jīng)過過濾除菌,可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,或者一些組織的消化。寧夏國產(chǎn)胰酶介紹 0.25%胰酶是細(xì)...

  • 遼寧國產(chǎn)胰酶進(jìn)貨價
    遼寧國產(chǎn)胰酶進(jìn)貨價

    1、細(xì)胞培養(yǎng)過程中為什么要使用胰酶呢?胰酶的作用是什么?胰酶是一種蛋白酶,酶切位點(diǎn)是肽鏈的Lys或Arg兩個殘基的羧基端肽鏈,通過在特定位置上降解蛋白,使細(xì)胞膜上與培養(yǎng)皿壁結(jié)合處蛋白降解,從而使兩者分離。這時,細(xì)胞由于自身內(nèi)部細(xì)胞骨架的張力以及培養(yǎng)液表面張力可成為球形。圖1.胰酶酶切位點(diǎn)2、使用胎牛血清培養(yǎng)細(xì)胞,在使用胰酶消化時發(fā)現(xiàn)血清可以終止此過程,這是什么原因?血清終止的原理其實(shí)是競爭抑制,就是用過量的牛血清中含有的蛋白和胰酶結(jié)合,使胰酶失去消化細(xì)胞蛋白的機(jī)會。3、為什么使用了胰蛋白酶消化,細(xì)胞還是成團(tuán)的,這可能是什么原因?qū)е碌??①消化時間不夠②吹打力度不夠③胰酶消化液濃度不夠④細(xì)胞密度過...

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