對于同一個樣品,如果一步法恒溫試劑盒檢測結(jié)果為陽性,而PCR檢測為陰性,可能的原因包括: 1. 檢測的支原體種類不同:一步法恒溫試劑盒可能檢測的支原體種類更多,例如可以涵蓋27種支原體,而PCR檢測可能只針對常見的12種支原體進行檢測。因此,如果樣品...
目前有 210 +種不同種類的支原體分布于人類、動物、昆蟲和植物中,其中 20 +種在細胞培養(yǎng)中被發(fā)現(xiàn)為污染物。支原體在實驗室中的傳播來源多種多樣,主要來源包括實驗室人員、胎牛血清(FBS)或新生牛血清(NBS)、以及由豬來源的胰蛋白酶溶液。此外,來自其他實驗...
對于同一個樣品,如果PCR檢測結(jié)果為陽性而一步法恒溫檢測試劑盒結(jié)果為陰性,可能的原因包括: 1. 靈敏度差異:PCR方法通常具有較高的靈敏度,可以檢測到單個拷貝的支原體DNA。相比之下,一步法恒溫檢測試劑盒可能需要更高的支原體拷貝數(shù)才能檢測...
支原體去除試劑在清*支原體的過程中可能會對細胞的生長狀態(tài)產(chǎn)生一定的影響。支原體去除試劑是一種非抗*素類試劑,它通過與支原體膜特異性結(jié)合,改變支原體膜的通透性,從而導(dǎo)致支原體破裂死亡。盡管該產(chǎn)品在作用期間可能會對細胞的活力和形態(tài)有一定的影響,但由于它不能穿過...
免疫沉淀技術(shù)(Immunoprecipitation, IP)在生物醫(yī)學(xué)研究中有著廣泛的應(yīng)用,以下是一些主要的應(yīng)用領(lǐng)域: 1. 蛋白質(zhì)相互作用研究:IP技術(shù)可以用來研究蛋白質(zhì)之間的相互作用,揭示蛋白質(zhì)復(fù)合物的組成和蛋白質(zhì)之間的相互作用網(wǎng)絡(luò)。 2...
支原體預(yù)防的主要成分通常是指用于預(yù)防支原體污染的抗*素或化學(xué)試劑。在細胞培養(yǎng)中,預(yù)防支原體污染的措施包括在培養(yǎng)基中添加抗*素,以及采取其他預(yù)防措施來保持實驗室環(huán)境的清潔和無菌操作。以下是一些用于預(yù)防支原體污染的主要成分: 1. 四環(huán)素類抗*素:這類...
巢式PCR法和一步法恒溫支原體檢測試劑盒各有優(yōu)缺點,具體哪個更好要根據(jù)實驗需求和條件來決定。 1. 巢式PCR法通過兩輪PCR擴增來提高檢測的特異性和靈敏度。它的優(yōu)點是: 2. 特異性強,可以減少假陽性結(jié)果。 3. 靈敏度高,可以檢測到很...
LAMP法,即環(huán)介導(dǎo)等溫擴增法(Loop-mediated isothermal amplification),在支原體檢測中的應(yīng)用具有以下特點和應(yīng)用場景: 1. 日常監(jiān)測:由于LAMP法的快速和簡便性,它適用于生物實驗室的日常監(jiān)測,可以及時檢測出...
支原體污染是細胞培養(yǎng)中普遍的問題之一,細胞庫中或正在使用的細胞中,支原體的污染率約為15%-35%。并對培養(yǎng)細胞的生理和代謝造成諸多影響: 01/ 爭奪營養(yǎng):支原體的污染會阻礙細胞生長和增殖 02/ 改變蛋白質(zhì)、RNA 或 DNA 合成的...
免疫沉淀ChIP實驗中磁珠還是瓊脂糖珠的選擇取決于客戶實驗情況。 瓊脂糖珠海綿狀的結(jié)構(gòu) (直徑 50-150 μm) 可以結(jié)合抗體 (繼而結(jié)合靶蛋白) ,它能夠直接高效、快速結(jié)合抗體,而不需借助特殊的專業(yè)設(shè)備。瓊脂糖珠呈多孔結(jié)構(gòu),這使得它們擁有...
支原體預(yù)防的主要成分通常是指用于預(yù)防支原體污染的抗*素或化學(xué)試劑。在細胞培養(yǎng)中,預(yù)防支原體污染的措施包括在培養(yǎng)基中添加抗*素,以及采取其他預(yù)防措施來保持實驗室環(huán)境的清潔和無菌操作。以下是一些用于預(yù)防支原體污染的主要成分: 1. 四環(huán)素類抗*素:這類...
支原體的預(yù)防可通過以下方式: 1. 控制污染源:通過定期檢測和去除細胞培養(yǎng)中的支原體污染,確保細胞培養(yǎng)體系內(nèi)無支原體存在,從而獲得準確有效的實驗數(shù)據(jù)。 2. 改善無菌操作技術(shù):通過提高實驗人員的操作技術(shù)和意識,避免在細胞培養(yǎng)過程中引入支原體污染...
一步法支原體檢測試劑盒的防污染版本通常采用等溫擴增技術(shù),如LAMP(Loop-Mediated Isothermal Amplification)原理,通過支原體特異性引物在恒溫條件下對樣本進行檢測,終通過顏色變化確定樣品中是否含有支原體污染。這種方法的優(yōu)...
支原體污染和黑膠蟲污染是兩種不同類型的細胞培養(yǎng)污染,它們具有各自的特點和區(qū)別: 支原體污染:在相差顯微鏡下,支原體呈暗色微小顆粒位于細胞表面和細胞之間。 黑膠蟲污染:在高倍鏡下,被黑膠蟲污染的細胞膜會變得模糊不清,邊界不清晰,有粗糙感。 ...
支原體檢測的應(yīng)用場景非常廣*,以下是一些主要的應(yīng)用領(lǐng)域: 1. 細胞培養(yǎng):在實驗室和生物制品工廠中,細胞培養(yǎng)過程容易受到支原體污染。支原體污染可能導(dǎo)致細胞功能改變,影響實驗結(jié)果和生物制品的質(zhì)量。因此,支原體檢測在細胞培養(yǎng)的質(zhì)量控制中至關(guān)重要??蒲兄?..
支原體預(yù)防的實驗步驟主要包括以下幾個方面: 1. 無菌操作技術(shù):在細胞培養(yǎng)過程中,嚴格遵守?zé)o菌操作規(guī)程,包括穿戴適當?shù)膶嶒灧⑹痔?,使用無菌工具和耗材。 2. 環(huán)境控制:保持實驗室環(huán)境清潔,定期消毒工作臺和實驗室表面,使用層流罩或生物安全柜...
ChIP(染色質(zhì)免疫沉淀)實驗是一種用于研究蛋白質(zhì)與DNA相互作用的技術(shù)。以下是ChIP實驗的實驗設(shè)計概述: 1. 目標蛋白的選擇:確定您想要研究的目標蛋白,例如特定的轉(zhuǎn)錄因子或組蛋白修飾。 2. 樣本的準備:根據(jù)研究的需要選擇合適的細胞或組織...
免疫沉淀技術(shù)RIP(RNA Immunoprecipitation,RNA免疫沉淀)的實驗方法基于以下幾個關(guān)鍵步驟: 1. 細胞裂解:首先,細胞或組織樣本被裂解,以釋放細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)和RNA復(fù)合物。 2.抗體特異性結(jié)合:裂解后的樣本中加入針對特...
免疫沉淀技術(shù)的實驗方法通常包括以下步驟: 1. 樣本準備 2. 細胞裂解:使用裂解緩沖液(含有蛋白酶抑制劑以防止蛋白質(zhì)降解)裂解細胞,釋放蛋白質(zhì)。 3. 蛋白質(zhì)濃度測定:使用BCA、Bradford或Lowry等方法測定裂解液中蛋白質(zhì)的濃...
免疫沉淀實驗步驟: 1. 樣品制備 a. 懸浮細胞樣品處理:離心收集細胞(4℃, 1000g, 5 min),用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞加入150-250 μL裂解液的比例加入含蛋白酶抑制劑的裂解液(裂解液應(yīng)在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加...
支原體去除和支原體預(yù)防是兩種不同的策略,它們在細胞培養(yǎng)和生物制品生產(chǎn)中都非常重要。 支原體去除是指在細胞已經(jīng)被支原體污染后采取的措施。這通常涉及到使用特定的抗*素或化學(xué)試劑來消滅或抑制支原體的生長。例如,根據(jù)的描述,支原體去除試劑是一種...
Co-IP(免疫共沉淀)技術(shù)主要用于研究蛋白質(zhì)之間的相互作用,其實驗設(shè)計如下: 1. 樣品準備:Co-IP實驗通常有兩種,一種是內(nèi)源性蛋白相互作用驗證,一種是非內(nèi)源性蛋白相互作用驗證。內(nèi)源性相互作用通過質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的方式將兩種蛋白轉(zhuǎn)染至同一細胞內(nèi)表達;...
qPCR法,即定量聚合酶鏈式反應(yīng)(Quantitative Polymerase Chain Reaction)法,是一種高度靈敏和特異的分子生物學(xué)技術(shù),用于檢測和定量DNA序列。在支原體檢測中,qPCR法的原理主要包括以下幾個步驟: 1. DNA提...
支原體去除試劑使用后,對支原體的檢測可能會有影響。一些支原體去除試劑通過特異性地與支原體膜結(jié)合、改變支原體膜的通透性來殺死支原體,而對真核細胞幾乎沒有影響。然而,某些情況下,去除試劑可能會對細胞的活力和形態(tài)產(chǎn)生一定的影響,尤其是在去除劑作用期間。此外,如果...
免疫沉淀技術(shù)的實驗設(shè)計通常包括以下幾個關(guān)鍵步驟: 1. 目標蛋白質(zhì)的選擇: 2. 抗體的選擇:選擇特異性強、親和力高的抗體來捕獲目標蛋白質(zhì) 3. 樣本的準備:收集和準備細胞或組織樣本。 4. 蛋白質(zhì)的裂解和釋放:選擇合適的裂解條件,...
免疫沉淀Co-IP實驗中磁珠還是瓊脂糖珠的選擇取決于客戶實驗情況。 瓊脂糖珠海綿狀的結(jié)構(gòu) (直徑 50-150 μm) 可以結(jié)合抗體 (繼而結(jié)合靶蛋白) ,它能夠直接高效、快速結(jié)合抗體,而不需借助特殊的專業(yè)設(shè)備。瓊脂糖珠呈多孔結(jié)構(gòu),這使得它們擁...
支原體去除后對細胞檢測的影響主要取決于去除方法和去除后的處理。以下是一些可能的影響: 1. 去除方法的影響:不同的支原體去除方法可能對細胞檢測產(chǎn)生不同的影響。例如,一些去除方法可能會對細胞的代謝和增殖產(chǎn)生暫時性的影響,這可能會影響某些類型的細胞檢測。...
對于同一個樣品,如果PCR檢測結(jié)果為陽性而一步法恒溫檢測試劑盒結(jié)果為陰性,可能的原因包括: 1. 靈敏度差異:PCR方法通常具有較高的靈敏度,可以檢測到單個拷貝的支原體DNA。相比之下,一步法恒溫檢測試劑盒可能需要更高的支原體拷貝數(shù)才能檢測...
支原體的預(yù)防可通過以下方式: 1. 控制污染源:通過定期檢測和去除細胞培養(yǎng)中的支原體污染,確保細胞培養(yǎng)體系內(nèi)無支原體存在,從而獲得準確有效的實驗數(shù)據(jù)。 2. 改善無菌操作技術(shù):通過提高實驗人員的操作技術(shù)和意識,避免在細胞培養(yǎng)過程中引入支原體污染...
RIP實驗步驟通常包括: 1. 細胞收集與交聯(lián):培養(yǎng)細胞至適當密度。使用交聯(lián)劑(如甲醛)進行交聯(lián),以固定蛋白質(zhì)-RNA復(fù)合物。 2. 細胞裂解:收集細胞并進行裂解,釋放RNA-蛋白質(zhì)復(fù)合物。在裂解過程中添加蛋白酶抑制劑以防止蛋白質(zhì)降解。 ...