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溫州細胞培養(yǎng)支原體去除試劑

來源: 發(fā)布時間:2024-07-10

細胞被支原體污染后可能會出現(xiàn)以下幾種情況:
1. 生長速度變慢:支原體污染的細胞生長速度可能會減慢,甚至停止生長。
2. 形態(tài)改變:部分細胞可能會變圓,從培養(yǎng)瓶壁脫落。有些細胞在支原體污染后,形態(tài)變化可能不明顯,但有些細胞可能會出現(xiàn)體積增大、細胞碎片增多等現(xiàn)象。
3. 培養(yǎng)液pH變化:支原體污染的細胞可能導致培養(yǎng)液pH值變化明顯,更換培養(yǎng)液后幾小時內(nèi)變酸(顏色變黃)。
4. 細胞間隙出現(xiàn)膜狀沉積:在某些情況下,細胞與細胞間隙可能出現(xiàn)膜狀沉積,影響細胞的正常生長和傳代。
5. 細胞功能受損:支原體污染可能會影響細胞的代謝和功能,如影響細胞蛋白質、DNA、RNA的合成。
6. 染色體畸變:支原體污染可能會導致細胞染色體斷裂、數(shù)目減少,出現(xiàn)雙著絲點染色體、環(huán)狀染色體等異常。
7. 免疫細胞產(chǎn)量受影響:對于巨噬細胞等免疫細胞的培養(yǎng),支原體污染可能會抑制干擾素的合成和降低其活性。
8. 細胞培養(yǎng)環(huán)境的污染:污染的細胞可能成為實驗室的污染源,影響工作區(qū)域、培養(yǎng)箱和液氮罐等。
9. 實驗結果的不確定性:使用被支原體污染的細胞進行實驗可能會得到不準確的結果,影響科研的可靠性。
支原體污染之后是直接丟棄還是重新培養(yǎng)?溫州細胞培養(yǎng)支原體去除試劑

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支原體去除試劑使用后,對支原體的檢測可能會有影響。一些支原體去除試劑通過特異性地與支原體膜結合、改變支原體膜的通透性來殺死支原體,而對真核細胞幾乎沒有影響。然而,某些情況下,去除試劑可能會對細胞的活力和形態(tài)產(chǎn)生一定的影響,尤其是在去除劑作用期間。此外,如果去除劑的效果不徹底,可能會導致細胞再次被支原體污染。

需要注意的是,某些支原體去除試劑可能會在去除支原體的過程中導致支原體膜溶解,從而釋放出支原體的DNA,這可能會在隨后的支原體核酸檢測中引起假陽性結果。因此,在去除支原體后,建議在繼續(xù)正常傳代培養(yǎng)幾代細胞后再進行支原體檢測,以確保檢測結果的準確性。
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支原體預防的主要成分通常是指用于預防支原體污染的抗*素或化學試劑。在細胞培養(yǎng)中,預防支原體污染的措施包括在培養(yǎng)基中添加抗*素,以及采取其他預防措施來保持實驗室環(huán)境的清潔和無菌操作。以下是一些用于預防支原體污染的主要成分:
1. 四環(huán)素類抗*素:這類抗*素對支原體具有抑制作用,常用于治*和預防支原體感*。
2. 大環(huán)內(nèi)酯類抗*素:例如羅紅霉素、克拉霉素、阿奇霉素等,用于治*肺炎支原體感*。
3. 喹諾酮類藥物:如氧氟沙星、司帕沙星等,也用于治*肺炎支原體感*。
4. 其他抗*素:例如氨基糖苷類、氯霉素等,對支原體有較小的抑制作用。

支原體污染一旦發(fā)生,不僅對細胞培養(yǎng)造成嚴重影響,甚至可能導致實驗結果失真。而且支原體污染在細胞培養(yǎng)實驗中相當常見。因此,預防措施是確保細胞培養(yǎng)環(huán)境和實驗結果可靠性的重要手段。
01/ 良好的無菌技術及實驗操作,保證操作不會引入新的污染
02/ 保持實驗空間的清潔
03/ 確保從可靠的來源獲取細胞,減少不同細胞之間的交叉?zhèn)魅?/span>
04/ 防止交叉污染
05/ 減少氣溶膠生成
06/ 謹慎使用抗*素
07/ 定期支原體篩查
08/ 丟棄或處理受到支原體污染的細胞
09/ 保持良好的記錄
支原體去除的原理是什么?

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細胞培養(yǎng)中支原體污染會對實驗結果產(chǎn)生多方面的影響,具體包括:
1. 細胞生長受影響:支原體污染可能導致細胞生長速度減慢,甚至停滯。
2. 細胞形態(tài)改變:支原體感*的細胞可能會出現(xiàn)形態(tài)的改變,如細胞體積增大、形態(tài)不規(guī)則等。
3. 細胞功能改變:支原體污染會影響細胞的代謝、增殖、分化等生理功能。
4. 細胞產(chǎn)物改變:支原體感*可能影響細胞產(chǎn)生的蛋白質、細胞因子等生物活性物質的表達和分泌。
5. 實驗結果不準確:支原體污染會干擾實驗結果的準確性,導致實驗數(shù)據(jù)不可靠。
6. 實驗重復性差:支原體污染的細胞培養(yǎng)批次間差異大,影響實驗的重復性。
7. 影響后續(xù)實驗:支原體污染的細胞培養(yǎng)產(chǎn)物用于后續(xù)實驗,如轉染、基因編輯等,可能會影響實驗效果。
8. 影響細胞培養(yǎng)產(chǎn)物的質量:支原體污染會影響細胞培養(yǎng)產(chǎn)物的質量,如疫苗、生物制品等。
9. 增加研究成本:支原體污染需要花費額外的時間和成本進行檢測、處理和重復實驗。
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支原體檢測有哪些方法?溫州細胞培養(yǎng)支原體去除試劑

細胞培養(yǎng)中支原體檢測出現(xiàn)假陽性結果可能由以下原因引起:
1. 擴增產(chǎn)物污染:PCR擴增產(chǎn)生的大量DNA拷貝若未妥善處理,極微量的污染就可能導致假陽性結果。
2. 引物設計不當:引物設計不夠特異性,可能會與非目標序列發(fā)生反應,導致非特異性擴增。
3. 試劑質量問題:使用的dNTPs、引物、DNA聚合酶等試劑質量不佳,可能引起非特異性擴增或假陽性結果。
4. 操作技術問題:實驗操作不規(guī)范,如混合樣本、標簽錯誤或樣本標識不清等,可能導致假陽性結果。
5. PCR反應條件設置不當:不恰當?shù)腜CR反應條件,如溫度和時間選擇不當,可能導致非特異性擴增。
6. DNA污染:PCR環(huán)境中的DNA污染會干擾結果,導致假陽性
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