糖原染色試劑盒。含乙二醇基的多糖經(jīng)過(guò)碘酸氧化,產(chǎn)生醛基,與雪夫(Schiff)試劑中無(wú)色品紅結(jié)合,形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中。該反應(yīng)稱為碘酸-雪夫(PAS)反應(yīng)。(1)雪夫液配制:堿性品紅1g溶于200ml沸水中,冷卻60℃時(shí)過(guò)濾,加1mmol/L鹽酸20ml,再冷卻至25℃左右,加偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,置暗處24h,無(wú)色即可放冰箱中保存,呈微紅色,則加活性炭1~2g,吸附過(guò)濾使成無(wú)色液體,放冰箱中保存。若溶液變紅,即不能再用。(2)10g/L過(guò)碘酸水溶液:過(guò)碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸餾水至10ml。溶解后蓋緊放冰箱備用,一般可用3個(gè)月,變黃則失效。過(guò)碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化,生成醛基。福建品牌糖原染色試劑盒推薦廠家
PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1實(shí)驗(yàn)材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標(biāo)本各30例,均來(lái)自我室實(shí)驗(yàn)材料。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,其配方:無(wú)水乙醇80mL,冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL,冰醋酸100mL,95%酒精600mL。1.2.3過(guò)碘酸溶液0.5g過(guò)碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:過(guò)碘酸0.8g,95%乙醇70mL,醋酸鈉0.27g,水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4無(wú)色品紅液(Schiff氏液)在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,煮沸后,在保持微沸的情況下,加入堿性品紅2.5g,并不斷搖動(dòng)約5min(勿使之沸騰),使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色)。冷卻到50℃時(shí),過(guò)濾,加入1N鹽酸50mL,再待冷卻至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉2.5g,塞住瓶口,搖動(dòng)容器以充分混合(此時(shí)顏色明顯變淡),然后避光放置或冰箱內(nèi)24h。上海正規(guī)糖原染色試劑盒單價(jià)糖原累積病診斷和研究 ,糖尿病的診斷和研究 ,用于某些的診斷等。
糖原染色法:染色原理細(xì)胞胞漿中存在糖原或多糖類物質(zhì)(如糖蛋白、粘多糖、糖脂、粘蛋白等),過(guò)碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化為二醛基,其與Schiff試劑中的無(wú)色品紅結(jié)合后呈現(xiàn)紫紅色,沉積在細(xì)胞內(nèi)多糖所在之處。染色步驟:1.組織石蠟包埋切片后脫蠟至水,蒸餾水洗2min(細(xì)胞爬片4%多聚甲醛固定后水洗);2.滴加過(guò)碘酸溶液,氧化5min;3.蒸餾水洗10min;4.滴加Schiff試劑,侵染10-20min;5.傾去Schiff試劑,流水沖洗10min;6.滴加蘇木素染色液,染核1-2min;7.流水沖洗5min;8.酸性乙醇分化液分化。
糖原D-PAS染色液注意事項(xiàng):1、切片脫蠟應(yīng)盡量干冷,否則影響染色效果。需使用一張陽(yáng)性對(duì)照片驗(yàn)證酶的活性。2、過(guò)碘酸氧化時(shí)間不宜過(guò)久,氧化時(shí)溫度以18~22℃較佳。3、試劑(A)、試劑(B)、試劑(C)、應(yīng)置于4℃密閉保存,使用時(shí)避免接觸過(guò)多的陽(yáng)光和空氣,使用前較好提前取出恢復(fù)到在室溫后,避光暗處使用。4、酸性乙醇分化液應(yīng)經(jīng)常更換新液,其分化時(shí)間應(yīng)該依據(jù)切片厚薄、組織的類別和酸性乙醇分化液的新舊而定,另外分化后自來(lái)水沖洗時(shí)間應(yīng)該足夠。5、在過(guò)碘酸溶液和SchiffReagent中作用時(shí)間非常重要,該依據(jù)切片厚薄、組織類別等決定。6、況冶切片染色時(shí)間盡量要短。腺泡狀軟組織肉瘤與化感瘤:前者棒狀小體糖原染色為陽(yáng)性。
特殊染色方法選擇應(yīng)遵循:染色結(jié)果對(duì)比鮮明、結(jié)果易保存、陽(yáng)性突出的染色方法;突出的陽(yáng)性結(jié)果在于所選擇方法表達(dá)的色調(diào)及如何進(jìn)行背景的復(fù)染。結(jié)果能夠長(zhǎng)時(shí)間保存、不褪色對(duì)于后續(xù)的調(diào)閱、科研、論文均較為有利。如顯示淀粉樣物質(zhì),甲基紫染色法雖然流程較為簡(jiǎn)單,但結(jié)果不易保存,陽(yáng)性對(duì)比度相對(duì)不突出;剛果紅染色法陽(yáng)性結(jié)果明顯,長(zhǎng)時(shí)間保存不褪色,流程簡(jiǎn)便,更是實(shí)用的方法。如顯示彈性纖維,地衣紅染色染液雖配制較方便,但結(jié)果對(duì)比度相對(duì)欠佳,與其他幾個(gè)染色法相比,多不選擇使用。多糖主要指糖原,它是一種膠樣液態(tài)存在于肝細(xì)胞、骨骼肌、心肌等處。品質(zhì)好的糖原染色試劑盒廠家批發(fā)價(jià)
糖原染色顯示在肝或心肌細(xì)胞內(nèi)有大量糖原存在即可確診。福建品牌糖原染色試劑盒推薦廠家
糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水。(2)0.5%過(guò)碘酸水溶液5分鐘。或1%過(guò)碘酸95%酒精溶液(過(guò)碘酸再結(jié)晶應(yīng)重新配制使用)。(3)蒸餾水洗,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分鐘。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘。(6)蘇木素浸染細(xì)胞核2-3分鐘。(7)脫水、透明、封蓋。結(jié)果:糖原呈紅色,細(xì)胞核呈藍(lán)色。試劑配制:(1)0.5%過(guò)碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏試劑。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,攪拌加熱沸騰,待冷卻至50℃過(guò)濾,加入當(dāng)量鹽酸至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉。置于暗處,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,然后加入少量活性碳并震蕩、過(guò)濾,此時(shí)溶液應(yīng)為無(wú)色。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差福建品牌糖原染色試劑盒推薦廠家