RNA提取試劑注意事項:1、需自備氯仿,異丙醇,DEPC,75%乙醇(DEPC水配制),和DEPC水。2、所有離心管,泵頭及相關溶液都必須無RNA酶污染。耐高溫器物可150℃烘烤4小時以去除RNA酶,其它器物去除RNA酶可考慮用0.01%的DEPC水浸泡過夜,然后滅菌,烘干。溶液需用DEPC水配制。加0.01%(體積比)diethylpyrocarbonate(DEPC)至重蒸水或MiliQ級水中,處理過夜,滅菌即成DEPC水。3、使用凍存的細胞或組織抽提總RNA的效果通常比新鮮的細胞或組織差一些。因為在細胞或組織凍融過程中一些細胞或組織內的RNase會被釋放出來并剪切樣品。如果不能及時抽提RNA,推薦先加入適量TRIReagent,并裂解樣品后凍存。RNA 的產(chǎn)量和質量也是另無數(shù)人頭疼的問題。金華RNA提取試劑銷售廠家
細胞質和細胞核RNA提取試劑盒特點:1.有效分離和提取細胞質RNA,與細胞核RNA。2.方便快捷的離心柱操作方式。3.提取的RNA,品質高,產(chǎn)量多。4.試劑盒不含苯酚,可提取所有RNA(含RNA)。5.純化的RNA可用于任何應用,包括RT-PCR,qRT-PCR,RNA-Seq,陣列等。6.細胞質RNA不含DNA,可直接用于RT-PCR/qRT-PCR。7.試劑盒可用于哺乳動物細胞或者組織樣品的提取。在某些情況下,研究者們更希望能夠提取特定分餾的RNA,而不是總RNA。例如,在一些表達譜研究中,較好能夠提取成熟的細胞質(Cytoplasmic)RNA?;蛘?,在研究分析未剪接的RNA前體時,提取細胞核(Nuclear)RNA會是一個更好的選擇。然而,市面上絕大多數(shù)廠家只能為您分別提供2種試劑盒來提取細胞質與細胞核的RNA,不光費用高昂,而且浪費大量的材料與時間。該EpiQuik?總RNA提取試劑盒提供了一種快速,簡單,經(jīng)濟有效的方法合肥正規(guī)RNA提取試劑廠家推薦拭子RNA提取試劑的選擇?對離心柱法而言,拭子核酸得率的高低。
DNA稱脫氧核糖核酸,是一種分子,雙鏈結構,由脫氧核糖核苷酸(成分為:脫氧核糖、磷酸及四種含氮堿基)組成??山M成遺傳指令,引導生物發(fā)育與生命機能運作。主要功能是長期性的資訊儲存,可比喻為“藍圖”或“食譜”。RNA稱核糖核酸,是以DNA的一條鏈為模板,以堿基互補配對原則,轉錄而形成的一條單鏈,主要功能是實現(xiàn)遺傳信息在蛋白質上的表達,是遺傳信息傳遞過程中的橋梁。RNA的堿基主要有4種,即A腺嘌呤,G鳥嘌呤,C胞嘧啶,U尿嘧啶。其中,U尿嘧啶取代了DNA中的T胸腺嘧啶而成為RNA的特征堿基。RNA是核糖核酸,DNA是脫氧核酸。區(qū)別:1.兩性解離:DNA無,bai只有酸解離,堿基被屏蔽(在分子內部形成了H鍵)。RNA有,有PI。2.粘度大:DNA;RNA,粘度由分子長度/直徑?jīng)Q定,DNA為線狀分子,RNA為線團。3.堿的作用:DNA耐堿RNA易被堿水解。4.顯色反應:鑒別DNA和RNA+濃HClRNA------→綠色化合物DNA------→藍紫色化合物苔黑酚。二苯胺啡啶溴紅(熒光染料)和溴嘧啶都可對DNA染色,原理是卡在分子中,DNA的離心和電泳顯色可用它們。
細胞RNA提取的方法:異丙醇主要用于沉淀RNA。取出EP管后可以見到側壁沉淀,輕輕吸棄上清。向EP管中加入75%酒精洗滌沉淀,幫助分離剩余的有機試劑(剩余有機試劑過多會影響OD值和PCR反應),輕彈沉淀,使其浮在酒精,靜置1-2min,讓酒精充分接觸沉淀,充分溶解有機試劑,然后4度離心5min。輕輕吸棄上清。將EP管再次放于離心機中瞬時離心,棄掉管壁殘余液體。然后將EP管置于超凈臺中干燥5-10min.。注意RNA樣品不要過于干燥,否則很難溶解。加入50ulDEPC處理水,震蕩充分溶解沉淀。測量RNA濃度。將RNA保存于-80度。tRNA是mRNA上遺傳密碼的識別者和氨基酸的轉運者。
動物組織總RNA提?。?、盡量選取新鮮的組織,如果不是新鮮的(較好在三個月之內-80℃冰箱或者在液氮中凍存的。在剪取組織時,不要拿到室溫直接剪取,一定要放到冰盒上,盡量避免反復凍融。2、用干凈的剪刀鑷子剪取一小塊組織,剪取樣本時盡量剪組織中心的部位,或者先將大塊的組織先從中間切開,然后再在新鮮切口的位置剪取樣本。取下的組織要充分的剪碎,將剪碎的組織放到無RNA酶的EP管中,加入裂解液,剪碎的組織要充分接觸裂解液,準備勻漿。3、正常組織選取綠豆粒大?。?0~60mg)的組織進行勻漿,如果組織中含有大量的蛋白、脂肪或者是緊密的纖維組織比如肝臟等,適當增減剪取組織的量(可選10~20mg)。4、如果提取的是魚肌肉,蝦肉,海蜇等含水分較多的組織時則應當適當提高樣本量用量(推薦100~200mg)。5、條件允許的情況下,動物組織使用高通道組織勻漿機勻漿后即可直接進行提取步驟,如沒有該設備。6、較后提取后得到的RNA一定要立即放到冰盒上,以減少RNA的降解。植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點:配有CS過濾柱,可有效去除其它雜質。金華RNA提取試劑
血漿/血清中miRNA提取試劑盒:是專門針對血清、血漿樣本中miRNA提取而開發(fā)的。金華RNA提取試劑銷售廠家
Trizol是一種總RNA抽提試劑,內含異硫氰酸胍等物質,能迅速裂解細胞,壓制細胞釋放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法進行提取組織或細胞中的RNA。原理:在勻質化或溶解樣品中,Trizol試劑可保持RNA的完整性,同時能破壞細胞及溶解細胞成分。加入氯仿離心后,裂解液分層成水相和有機相。RNA存在于水相中。水相轉移后,RNA通過異丙醇沉淀回收。移去水相后,用乙醇可從中間相沉淀得到DNA,加入異丙醇沉淀可從有機相得到蛋白質。異硫氰酸胍氯化銫超速離心法:原理:使用蛋白質變性劑異硫氰酸胍有效壓制RNA酶的活性,經(jīng)過起始密度為1.78g/ml的氯化銫介質,進行密度梯度超速離心,RNA沉淀于管底,而DNA與蛋白質在上清液中。使用這種方法,不但能得到高質量的RNA,而且能同時分離出細胞染色體DNA。金華RNA提取試劑銷售廠家
蘇州君欣生物科技有限公司成立于2019-12-16,位于江蘇省張家港市塘橋鎮(zhèn)東城科技創(chuàng)業(yè)園C幢二樓,公司自成立以來通過規(guī)范化運營和高質量服務,贏得了客戶及社會的一致認可和好評。公司主要產(chǎn)品有原代細胞,無血清細胞凍存液,干細胞無血清培養(yǎng)基,動物疾病模型等,公司工程技術人員、行政管理人員、產(chǎn)品制造及售后服務人員均有多年行業(yè)經(jīng)驗。并與上下游企業(yè)保持密切的合作關系。蘇州君欣生物集中了一批經(jīng)驗豐富的技術及管理專業(yè)人才,能為客戶提供良好的售前、售中及售后服務,并能根據(jù)用戶需求,定制產(chǎn)品和配套整體解決方案。蘇州君欣生物科技有限公司以先進工藝為基礎、以產(chǎn)品質量為根本、以技術創(chuàng)新為動力,開發(fā)并推出多項具有競爭力的原代細胞,無血清細胞凍存液,干細胞無血清培養(yǎng)基,動物疾病模型產(chǎn)品,確保了在原代細胞,無血清細胞凍存液,干細胞無血清培養(yǎng)基,動物疾病模型市場的優(yōu)勢。