醫(yī)院檢驗中心糖原染色操作規(guī)程:1.雪夫氏試劑:400m1蒸餾水煮沸除去C02,逐漸加堿性品紅2.08溶解后,待冷卻至60℃,加1mm01兒HCl40ml,再加偏重亞硫酸鈉(NaHSO:)4g,次日加活性碳1.5g,放置半天后過濾。配好后液體為無色透明,保存于4℃冰箱中。2.過碘酸作用液:過碘酸1g溶于蒸餾水100ml中,或取過碘酸鉀(1tI04)0。698加蒸餾水100ml,微加熱使溶解,再加濃硝酸0.3m1,置冰箱中保存。3.固定液:95%乙醇90ml與甲醛10m1混勻。4.20g/l甲基綠:甲基綠2g溶于100m1蒸餾水。[操作]_x005f_x000c_(1)新鮮或陳舊血片、骨髓片于固定液內(nèi)10分鐘。(2)水洗數(shù)次后,對照片先用唾液消化30分鐘,也可在同一片,在其中間用蠟筆劃界,一半做對照,另一半做測定。(3)水洗后,滴加過碘酸數(shù)滴于涂片上,作用10分鐘后,再水洗數(shù)次。腺泡狀軟組織肉瘤與化感瘤:前者棒狀小體糖原染色為陽性。福建哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒單價
糖元染色試劑盒細胞生物學研究有以下幾個方面。細胞生物學的研究內(nèi)容十分普遍,主要包括。①細胞核、染色體以及基因表達的研究。②生物膜與細胞器的研究。③細胞骨架體系的研究。④細胞增殖及其調(diào)控。⑤細胞分化及其調(diào)控。⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)⑦細胞的起源與進化。⑧細胞工程。PAS染色,全稱過碘酸雪夫染色(PeriodicAcid-SchiffStain),主要用來顯示糖原和其他多糖物質(zhì),因此也稱作糖原染色。另外,此染色方法還可以顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì),以及軟骨、垂體、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜、霉菌等。PAS法的檢測原理在于:過碘酸(也成為高碘酸)是一種強氧化劑。湖南如何使用糖原染色試劑盒在染色過程中較好不要在玻片上貼標簽紙。
糖原染色試劑盒。含乙二醇基的多糖經(jīng)過碘酸氧化,產(chǎn)生醛基,與雪夫(Schiff)試劑中無色品紅結(jié)合,形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中。該反應稱為碘酸-雪夫(PAS)反應。(1)雪夫液配制:堿性品紅1g溶于200ml沸水中,冷卻60℃時過濾,加1mmol/L鹽酸20ml,再冷卻至25℃左右,加偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,置暗處24h,無色即可放冰箱中保存,呈微紅色,則加活性炭1~2g,吸附過濾使成無色液體,放冰箱中保存。若溶液變紅,即不能再用。(2)10g/L過碘酸水溶液:過碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸餾水至10ml。
糖原染色的參考值及臨床意義:1.慢性淋巴細胞白血病、淋巴肉瘤等惡性淋巴細胞增生性疾病,其淋巴細胞的PSA染色積分值增高;等淋巴細胞良性增生時,淋巴細胞積分值正常。醫(yī)|學教育網(wǎng)搜集整理故該試驗可用于鑒別良性與惡性淋巴細胞增生性疾病。2.紅白血病時幼紅細胞的PAS染色呈強陽性反應,積分值增高;溶血性貧血及巨幼細胞性貧血時,幼紅細胞的PAS染色積分值在正常范圍內(nèi),故該試驗也可用于紅白血病的診斷及鑒別幼紅細胞增多的性質(zhì)。3.急性粒細胞白血病時,原始及幼稚粒細胞PAS染色常呈陰性反應;急性淋巴細胞白血病時,原始及幼稚淋巴細胞常呈陽性反應;急性單核細胞白血病時,原始及幼稚單核細胞多呈強陽性反應。故PAS染色有助于三種急性白血病類型的鑒別。該依據(jù)切片厚薄、組織的類別等決定。
特殊染色化學試劑的選擇:化學試劑的選擇主要針對自配試劑而言,對于商品化試劑盒則在于染液質(zhì)量。1、一般要求選用很好品牌的化學試劑,特別是一些染色中關鍵的試劑。很好的化學試劑(如Sigma、國藥、阿拉丁、西隴等)是保證高質(zhì)量染液的前提和關鍵,特別對于染液中的關鍵試劑尤為重要。如堿性品紅在一些染色液(抗酸、無色品紅、醛品紅等)中均為主要試劑,其質(zhì)量決定了較終的染色效果。如配制無色品紅染液時,所使用的偏重亞硫酸鈉試劑質(zhì)量不合格,則會導致染液配制失敗,無法染出合格的切片。2、純度一般以分析純?yōu)橹?。過碘酸溶液和蘇木素溶液濃度更低,不宜過染。天津正規(guī)糖原染色試劑盒平均價格
糖原染色顯示在肝或心肌細胞內(nèi)有大量糖原存在即可確診。福建哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒單價
糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水。(2)0.5%過碘酸水溶液5分鐘?;?%過碘酸95%酒精溶液(過碘酸再結(jié)晶應重新配制使用)。(3)蒸餾水洗,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分鐘。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘。(6)蘇木素浸染細胞核2-3分鐘。(7)脫水、透明、封蓋。結(jié)果:糖原呈紅色,細胞核呈藍色。試劑配制:(1)0.5%過碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏試劑。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,攪拌加熱沸騰,待冷卻至50℃過濾,加入當量鹽酸至25℃時加入偏重亞硫酸鈉。置于暗處,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,然后加入少量活性碳并震蕩、過濾,此時溶液應為無色。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差福建哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒單價
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