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糖原D-PAS染色液注意事項(xiàng):1、切片脫蠟應(yīng)盡量干冷,否則影響染色效果。需使用一張陽(yáng)性對(duì)照片驗(yàn)證酶的活性。2、過(guò)碘酸氧化時(shí)間不宜過(guò)久,氧化時(shí)溫度以18~22℃較佳。3、試劑(A)、試劑(B)、試劑(C)、應(yīng)置于4℃密閉保存,使用時(shí)避免接觸過(guò)多的陽(yáng)光和空氣,使用前較好提前取出恢復(fù)到在室溫后,避光暗處使用。4、酸性乙醇分化液應(yīng)經(jīng)常更換新液,其分化時(shí)間應(yīng)該依據(jù)切片厚薄、組織的類別和酸性乙醇分化液的新舊而定,另外分化后自來(lái)水沖洗時(shí)間應(yīng)該足夠。5、在過(guò)碘酸溶液和SchiffReagent中作用時(shí)間非常重要,該依據(jù)切片厚薄、組織類別等決定。6、況冶切片染色時(shí)間盡量要短。待冷卻至50℃過(guò)濾,加入當(dāng)量鹽酸至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉。江蘇如何使用糖原染色試劑盒廠家批發(fā)價(jià)
PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1實(shí)驗(yàn)材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標(biāo)本各30例,均來(lái)自我室實(shí)驗(yàn)材料。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,其配方:無(wú)水乙醇80mL,冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL,冰醋酸100mL,95%酒精600mL。1.2.3過(guò)碘酸溶液0.5g過(guò)碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:過(guò)碘酸0.8g,95%乙醇70mL,醋酸鈉0.27g,水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4無(wú)色品紅液(Schiff氏液)在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,煮沸后,在保持微沸的情況下,加入堿性品紅2.5g,并不斷搖動(dòng)約5min(勿使之沸騰),使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色)。冷卻到50℃時(shí),過(guò)濾,加入1N鹽酸50mL,再待冷卻至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉2.5g,塞住瓶口,搖動(dòng)容器以充分混合(此時(shí)顏色明顯變淡),然后避光放置或冰箱內(nèi)24h。浙江咨詢糖原染色試劑盒廠家直銷主要用來(lái)顯示糖原和其他多糖物質(zhì),因此也稱作糖原染色。
PAS染色的臨床意義①幫助鑒別不典型巨核細(xì)胞和霍奇金細(xì)胞或Reed-Sternberg細(xì)胞,前者呈強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng),后者呈弱陽(yáng)性或陰性反應(yīng)。②幫助鑒別戈謝細(xì)胞和尼曼-匹克細(xì)胞,前者呈強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng),后者呈弱陽(yáng)性反應(yīng),且空泡中心為陰性反應(yīng)。③幫助鑒別白血病細(xì)胞和腺骨髓轉(zhuǎn)移的腺細(xì)胞,后者呈強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng),陽(yáng)性反應(yīng)物質(zhì)為紅色細(xì)顆粒狀或粗顆粒狀,有時(shí)呈紅色塊狀。白細(xì)胞系統(tǒng):急性淋巴細(xì)胞白血病時(shí)白血病性原始淋巴細(xì)胞的陽(yáng)性反應(yīng)物質(zhì)為紅色粗顆粒狀或紅色塊狀,底色不紅;急性粒細(xì)胞白血病時(shí),白血病性原始粒細(xì)胞的陽(yáng)性反應(yīng)物質(zhì)呈均勻分布的紅色細(xì)顆粒狀或呈均勻紅色;急性單核細(xì)胞白血病時(shí),白血病性原始單核細(xì)胞的陽(yáng)性反應(yīng)物質(zhì)呈紅色細(xì)顆粒狀,彌散分布,有時(shí)在胞漿的邊緣處顆粒較粗大。
粘液染色法:粘液一般有以下幾點(diǎn)特性:(1)對(duì)鹽基性染料有親合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污穢藍(lán)色。(2)對(duì)某種鹽基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺藍(lán)有異染性。(3)遇醋酸發(fā)生沉淀,胃粘蛋白則除外。(4)溶于弱堿溶液。常用的粘液染色有以下幾種:1、P.A.S染色法:操作方法同前,結(jié)果;中性粘液性物質(zhì),某些酸性粘液物質(zhì)呈紅色,核呈藍(lán)色。2、AB/P.A.S染色法:該種方法的特點(diǎn)是能同時(shí)顯示出酸性和中性粘液物質(zhì)。操作方法:(1)切片常規(guī)脫蠟入水。(2)3%醋酸液洗2分鐘,入1%阿利新蘭醋酸液(PH2.5)10-20分鐘。(3)蒸餾水洗。(4)按P.A.S染色程序。(5)蘇木素淡染2-3分鐘,水洗。(6)常規(guī)脫水、封片。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差。
糖原染色――檢查項(xiàng)目的注意細(xì)節(jié):其判斷標(biāo)準(zhǔn)隨細(xì)胞不同而異,一般分為5級(jí),即0~4級(jí)。糖原染色――檢查項(xiàng)目的一般步驟:(1)新鮮干燥血片或骨髓片于95%乙醇中固定10min,蒸餾水沖洗數(shù)次,待干。(2)浸入10g/L過(guò)碘酸水溶液中10min,蒸餾水沖洗數(shù)次,待完全干燥。(3)放入雪夫液30min,用自來(lái)水沖洗約5min,再用蒸餾水沖洗,然后用20g/L甲基綠復(fù)染20min,水洗,晾干。糖原染色――檢查項(xiàng)目結(jié)果解讀:(1)新鮮干燥血片或骨髓片于95%乙醇中固定10min,蒸餾水沖洗數(shù)次,待干。(2)浸入10g/L過(guò)碘酸水溶液中10min,蒸餾水沖洗數(shù)次,待完全干燥。(3)放入雪夫液30min,用自來(lái)水沖洗約5min,再用蒸餾水沖洗,然后用20g/L甲基綠復(fù)染20min,水洗,晾干。細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究。浙江咨詢糖原染色試劑盒廠家直銷
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PAS染色的臨床意義:1.紅細(xì)胞系統(tǒng):①紅血病或紅白血病時(shí)幼紅細(xì)胞可呈陽(yáng)性反應(yīng),有時(shí)陽(yáng)性反應(yīng)幼紅細(xì)胞的百分比增高,陽(yáng)性反應(yīng)的程度也很強(qiáng)。有時(shí)紅細(xì)胞也呈陽(yáng)性反應(yīng)。②缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血(又稱地中海貧血)以及骨髓增生異常綜合征時(shí)幼紅細(xì)胞可呈陽(yáng)性反應(yīng),有時(shí)陽(yáng)性反應(yīng)幼紅細(xì)胞的百分比也較高。有時(shí)紅細(xì)胞也可呈陽(yáng)性反應(yīng)。③巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血、再生障礙性貧血和白血病等疾病時(shí),幼紅細(xì)胞為陰性反應(yīng),有時(shí)個(gè)別幼紅細(xì)胞呈陽(yáng)性反應(yīng)江蘇如何使用糖原染色試劑盒廠家批發(fā)價(jià)