一種海貍鼠尾膠原手術(shù)縫合線制備方法,其特征在于,步驟如下:(1)膠原紡絲液的配制:將備用的海貍鼠尾筋切成薄片,用無花果蛋白酶進(jìn)行酶解處理,再用雙氧水溶液殺酶;將殺酶后的切片用蒸餾水沖洗,然后用乙酸溶液溶脹,把溶脹后的切片分散攪拌,然后用濾網(wǎng)過濾,除去雜質(zhì)及不溶脹物,然后把該溶液離心脫泡制得膠原紡絲溶液;(2)手術(shù)縫合線纖維的成形:將膠原紡絲液裝入立式向上濕法紡絲機(jī)的紡絲液貯罐中,用氮?dú)鈹D壓入含有pH=8-11、質(zhì)量濃度為50-80%的硫酸鈉溶液的立式凝固浴中凝固成型,再經(jīng)過質(zhì)量濃度為60-90%的乙醇水溶液的脫水浴脫水,再經(jīng)過假捻器加捻,合股后再進(jìn)入含有pH=9-11、質(zhì)量濃度為0.8-1.2%戊二醛的交聯(lián)浴中交聯(lián),經(jīng)過水浴水洗,再經(jīng)第二次加捻,除去水及交聯(lián)劑,干燥后,在卷繞輥上卷繞即得手術(shù)縫合線。為了能夠從小鼠身上提取足夠的DNA,要從它們身上取下足量的細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。北京鼠尾膠原單價(jià)
鼠尾膠原凝膠體在皮膚細(xì)胞原代培養(yǎng)中的應(yīng)用:在國外的藥理,毒理和皮膚病學(xué)的研究領(lǐng)域中已得到的限翩,否則培養(yǎng)成功率極低.本文采用鼠尾膠原凝膠體作為滋養(yǎng)層,提高了培養(yǎng)細(xì)胞的材料和方法r1]實(shí)驗(yàn)材料:培養(yǎng)液DEIdE(G皿}ao),表皮細(xì)胞生長因子(EGFSigma),小牛血清(上海祟明生物制品廠),氫化可的松,胰島素(Sigm,青,鏈霉素,胰蛋白酶,]~DTA,細(xì)胞培養(yǎng)皿~35mill(00rningrSA).(2)皮膚基底細(xì)胞的分離和細(xì)胞懸液的制備:2~3d的新生大鼠(wisr),以75%酒精消毒背部皮膚,剪下皮膚后.以消化12h.輕刷表皮面,收集細(xì)胞懸液,加入細(xì)胞培養(yǎng)液.用梯度離心收集細(xì)胞,以3xi0/m]濃度接種平皿.(3)鼠尾膠原凝膠體的制備:具體方法參見文獻(xiàn)c13o(4)培養(yǎng)皿的膠原鋪制:i.0ml的酸溶解膠原滴入~35mm培養(yǎng)皿中,鋪滿平皿底部;將平皿暴露于氨氣中30min,然后置空氣中30rain,散盡剩余氨氣。昆明鼠尾膠原直銷廠家鼠尾膠原醋酸溶解:不要晃動(dòng)或攪拌。
膠原蛋白的應(yīng)用:1.膠原天然的緊密的纖維結(jié)構(gòu),使膠原材料顯示出很強(qiáng)的韌性和強(qiáng)度,適用于薄膜材料的制備;2.大較膠原被用作制造腸衣等可食用包裝材料.其獨(dú)特之處是:在熱處理過程中.隨著水分和油脂的蒸發(fā)和熔化.膠原幾乎與肉食的收縮率一致。而其他的可食用包裝材料還沒被發(fā)現(xiàn)具有這品質(zhì);3.由于膠原分子鏈上含有大量的親水基團(tuán).所以與水結(jié)合的能力很強(qiáng).這一性質(zhì)使膠原在食品中可以用作填充劑和凝膠;4.膠原在酸性和堿性介質(zhì)中膨脹,這一性質(zhì)也應(yīng)用于制備膠原基材料的處理工藝中。
鼠尾膠原蛋白I型,用那一種膠原酶可以溶解:1.將膠原加入到0.1M的醋酸中,制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解。2.建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動(dòng)或攪拌。在2-8度中放置過夜。在無菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液。我們不建議用過濾的方法無菌化。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會(huì)導(dǎo)致丟失蛋白。3.稀釋一定數(shù)量的膠原溶液。4.按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時(shí)或者2-8度過夜。5.從包被表面除去多余的液體。過夜干燥。如果膠原溶液不是無菌的,這時(shí)候可以在無菌細(xì)胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒。在接種細(xì)胞前用無菌的水漂洗。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長時(shí)程記錄,并且制作簡(jiǎn)便,成本低廉。細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被以包被濃度為2μg/cm2為例。
鼠尾膠原簡(jiǎn)介:鼠尾I型膠原蛋白(Collagenfromrattail,TypeI)系采用Birkedal-Hansen方法在無菌下制備,純度達(dá)到95%以上,可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于細(xì)胞培養(yǎng)皿的包被,特別適合普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細(xì)胞的培養(yǎng);也可用于制備三維膠原凝膠,使細(xì)胞在模擬的三維環(huán)境中生長。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn):1、SDS-PAGE分析純度大于95%。2、無菌檢驗(yàn)結(jié)果為陰性。3、本品2μg/cm2包被細(xì)胞培養(yǎng)皿后培養(yǎng)PC-12細(xì)胞,貼壁及生長正常。4、本品濃度1mg/mL,pH7.0時(shí)形成具有一定強(qiáng)度的三維膠原凝膠,NIH-3T3細(xì)胞在三維凝膠內(nèi)生長正常、PC-12細(xì)胞在三維凝膠表面生長正常。鼠尾膠原蛋白是從老鼠尾巴提取出來的物質(zhì)。天津正規(guī)鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨
制備鼠尾膠原:搖晃,使尾腱分散于醋酸溶液中,4℃放置一星期。北京鼠尾膠原單價(jià)
鼠尾膠原蛋白的提取方法,采用酸法與酶法相結(jié)合的工藝,保持恒低溫?zé)o菌的環(huán)境,利用同樣濃度的鹽溶液進(jìn)行兩次鹽析與離心,簡(jiǎn)化了提純步驟。所用酸為低濃度酸溶液,并采用檸檬酸替代醋酸進(jìn)行提純。從提取原料到樣品生成過程中,進(jìn)行多次真空冷凍干燥,并經(jīng)進(jìn)一步處理獲得含水率在3%以下的膠原蛋白微粉;較后由滅菌、無菌包裝,成品膠原蛋白粉末的純度在98%以上。本發(fā)明獲得的膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,提高了產(chǎn)率和生物相容性,降低了成本,適用于生物醫(yī)用材料,所得到的膠原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋結(jié)構(gòu)。北京鼠尾膠原單價(jià)