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鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng):通過醋酸抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等 步驟制備的。鼠尾膠原蛋白可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿,培養(yǎng)一些在普通細(xì)胞 培養(yǎng)器皿中不易貼壁的細(xì)胞。也可用于制備三維膠,模擬真實(shí)的生長環(huán)境, 使細(xì)胞在三維環(huán)境中生長。 1,在使用鼠膠原蛋白 型包被的細(xì)胞培養(yǎng)皿中檢查到PC-12 細(xì)胞的 貼壁和生長。 1mg/ml濃度以上,pH 左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度的三維膠,檢查到 NIH-3T3 細(xì)胞在三維膠內(nèi)正常生長、PC-12 細(xì)胞在三維膠表面 正常生長。 使用方法: 1、細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被 推薦濃度: 1-5ug/cm 0.012mg/ml。按以下表格體積加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中。注意事項(xiàng):在室溫下pH 中性時(shí)可迅速成膠,在操作過程中要 盡量保持低溫。昆明正規(guī)鼠尾膠原廠家批發(fā)價(jià)
鼠尾膠原蛋白提取、分離、純化方法的建立及鑒定:通過對鼠尾進(jìn)行剝離獲得鼠尾腱,用Tris-HCl緩沖液、胃蛋白酶處理獲得鼠尾膠原蛋白原液、反復(fù)使用氯化鈉溶液進(jìn)行分級鹽析、醋酸溶液復(fù)溶進(jìn)行鼠尾膠原蛋白的純化.超純水透析除去無機(jī)鹽類獲得純化的鼠尾膠原蛋白。通過SDS-PAGE蛋白質(zhì)電泳、氨基酸含量分析等技術(shù)手段鑒定.結(jié)果 本研究建立的方法可以獲得高純度的鼠尾膠原蛋白,純度達(dá)到電泳純.與國外進(jìn)口的商業(yè)化鼠尾膠原蛋白產(chǎn)品相比無差異。研究了提取、分離、純化參數(shù)對得率、純度的影響,建立了較優(yōu)的鼠尾膠原蛋白提取條件,胃蛋白酶用量:1∶500,酶解時(shí)間:72 h,鹽析濃度:2 mol/L,提取所用酸溶液:0.05 mol/L醋酸溶液.結(jié)論 為鼠尾膠原蛋白的擴(kuò)大化生產(chǎn)提供了合適的工藝參數(shù),為大量獲得鼠尾膠原蛋白并進(jìn)行更深層次的功效方面研究提供了理論支持和實(shí)踐基礎(chǔ)。開封正規(guī)鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨取大鼠尾巴洗凈,75%酒精浸泡5分鐘。
以鼠尾膠原為支架的類似物的建立:探尋建立類似物的培養(yǎng)方法。方法:原代培養(yǎng)人皮膚成纖維細(xì)胞,制備鼠尾膠原,將鼠尾膠原溶液、濃縮培養(yǎng)基、NaOH溶液和以血清重懸的成纖維細(xì)胞溶液在適當(dāng)?shù)谋壤禄旌虾笮纬赡z構(gòu)建類似物。結(jié)果:形成的類似物中成纖維細(xì)胞生長狀態(tài)良好,并且組織塊具有一定彈性和抗拉伸能力。結(jié)論:①利用鼠尾膠原可以構(gòu)建類似物,該模型是進(jìn)行皮膚部位型培養(yǎng)和制作復(fù)合皮的關(guān)鍵與基礎(chǔ);②成纖維細(xì)胞膠原凝膠復(fù)合物有著良好的生物學(xué)特性,它是研究成纖維細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)之間以及細(xì)胞之間相互作用的良好模型。
膠原蛋白的功效與作用:一提起膠原蛋白,女性朋友們眼睛都放光了,因?yàn)槲覀兌贾滥z原蛋白被稱為我們皮膚的“軟黃金”,層中70%都是膠原蛋白,膠原蛋白含量的多少決定克皮膚的年輕程度!是讓我們皮膚變得有彈性的東西。大部分只知道需要補(bǔ)充膠原蛋白,但是卻不知道什么時(shí)候需要補(bǔ)充膠原蛋白,總認(rèn)為自己還年輕不需要補(bǔ)充,其實(shí)這是錯(cuò)誤的觀念,膠原蛋白在女性20歲的時(shí)候就已經(jīng)開始流失了,含量逐漸下降,25歲后進(jìn)入流失的高峰期,40歲時(shí)的含量不到80歲的一半,所以我們應(yīng)該20歲就開始補(bǔ)充膠原蛋白,以保持皮膚的年輕狀態(tài)。膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同。
鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用:原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實(shí)驗(yàn)室主要將鼠尾膠原用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁和支架構(gòu)建,對于其抗氧化作用目前尚無相關(guān)研究。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導(dǎo)致離體心肌細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實(shí)驗(yàn)組)和普通培養(yǎng)皿(對照組)中,并且均用0,10,100μmol/L H2O2誘導(dǎo)。24 h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細(xì)胞的形態(tài),應(yīng)用MTT比色法檢測心肌細(xì)胞存活率,TUNEL法檢測心肌細(xì)胞凋亡形態(tài),流式細(xì)胞技術(shù)檢測心肌細(xì)胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平,Western-Blot檢測凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表達(dá)。成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,并且制作簡便,成本低廉。開封正規(guī)鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨
鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細(xì)胞中的應(yīng)用。昆明正規(guī)鼠尾膠原廠家批發(fā)價(jià)
鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠3種基質(zhì)對角膜上皮細(xì)胞增殖的影響:目的探討鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠3種基質(zhì)對體外培養(yǎng)角膜上皮細(xì)胞增殖的影響。方法采用鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠作為基質(zhì)包被培養(yǎng)器皿,以普通培養(yǎng)器皿作對照,培養(yǎng)角膜上皮細(xì)胞,觀察細(xì)胞形態(tài),進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)并描繪細(xì)胞生長曲線,比較不同基質(zhì)對角膜上皮細(xì)胞的增殖作用。結(jié)果使用基質(zhì)包被的培養(yǎng)器皿培養(yǎng)角膜上皮細(xì)胞,細(xì)胞增殖速度較普通組快,細(xì)胞形態(tài)、活力和長勢比普通組更佳,促進(jìn)增殖的能力為鼠尾膠原多聚賴氨酸明膠。結(jié)論鼠尾膠原可促進(jìn)角膜上皮細(xì)胞增殖,且增殖效果優(yōu)于多聚賴氨酸和明膠。昆明正規(guī)鼠尾膠原廠家批發(fā)價(jià)
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