無血清細(xì)胞凍存液：采用patent的凍存配方，用包括重組人血白蛋白等多種蛋白組分替代了血清的用途。用包括DMSO在內(nèi)的復(fù)合凍存保護(hù)劑替代了單一的DMSO的保護(hù)作用。復(fù)合保護(hù)劑的內(nèi)部保護(hù)劑，易于穿透細(xì)胞膜，避免在細(xì)胞凍存過程中細(xì)胞內(nèi)部的水分子形成冰晶損傷細(xì)胞；外部保護(hù)劑，可在溶液形成冰晶之前，在細(xì)胞膜外部競爭性的結(jié)合細(xì)胞膜表面的水分子，從而降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度，減少陽離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量。在細(xì)胞內(nèi)部與外部的協(xié)同保護(hù)作用下，明顯降低了溫度迅速下降與溫度上升對細(xì)胞的損害，因此大幅度提高了細(xì)胞經(jīng)過凍存后的復(fù)蘇存活率。在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù)，較大提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率。廣州正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液供應(yīng)商

干細(xì)胞無血清凍存液操作事項(xiàng)：使用說明：1. 細(xì)胞消化和計(jì)數(shù)，用胰酶對待凍存的細(xì)胞進(jìn)行消化，并對細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。2. 1000轉(zhuǎn)/min離心5分鐘（4℃），去掉上清。3. 根據(jù)細(xì)胞計(jì)數(shù)的情況，加入適量的干細(xì)胞無血清凍存液，使細(xì)胞密度在1×106左右（或根據(jù)自己希望達(dá)到的細(xì)胞密度）。4. 輕輕地重懸細(xì)胞（務(wù)必重懸均勻）。5. 將重懸的細(xì)胞按等份加入到滅菌的凍存管（需提前做好標(biāo)記或者貼上標(biāo)簽）中，旋緊凍存管蓋。6. 將凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒直接放入-80℃。7. 第二天將細(xì)胞從-80℃轉(zhuǎn)移到液氮中。注意事項(xiàng)：1.用處于對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。2.控制好胰酶的消化時(shí)間，切記消化過度，會影響復(fù)蘇效果。3.重懸細(xì)胞的過程中，請務(wù)必要輕柔，以免損傷細(xì)胞，但同時(shí)也一定要充分重懸，這樣細(xì)胞在復(fù)蘇時(shí)才不會成團(tuán)。4.細(xì)胞操作請注意無菌。長沙正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品介紹從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管，立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。

無血清快速細(xì)胞凍存液凍存液成分。無血清細(xì)胞，無血清干細(xì)胞及MSC凍存液。保存條件：儲存于4℃以下。質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起，為期3年。3個(gè)月以上沒有使用凍存液計(jì)劃時(shí)，盡可能冷凍保存。為避免重復(fù)凍融過程可能導(dǎo)致的凍存液品質(zhì)下降和性能降低，推薦將100ml產(chǎn)品分裝小瓶后，再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。無血清細(xì)胞凍存液，細(xì)胞凍存與復(fù)蘇后，平均活細(xì)胞回收比例超過80%。與含血清凍存液比較，BI無血清凍存液細(xì)胞存活率都有較佳的表，BI無血清細(xì)胞凍存液也適用于動物血清培養(yǎng)的細(xì)胞凍存。

細(xì)胞凍存液的作用是什么？滲透性冷凍保護(hù)劑：可以滲透到細(xì)胞內(nèi)，一般是一些小分子物質(zhì)，主要包括甘油、DMSO、乙二醇、丙二醇、乙酰胺、甲醇等。非滲透性冷凍保護(hù)劑：不能滲透到細(xì)胞內(nèi)，一般是些大分子物質(zhì)，主要包括聚乙烯吡咯烷酮（PVP）、蔗糖、聚乙二醇、葡聚糖、白蛋白以及Hetastarch等。冷凍保護(hù)劑同溶液中的水分子結(jié)合，發(fā)生水合作用，弱化水的結(jié)晶過程使溶液的粘性增加從而減少冰晶的形成，同時(shí)冷凍保護(hù)劑可以通過在細(xì)胞內(nèi)外維持一定的摩爾濃度，降低細(xì)胞內(nèi)外未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度，使細(xì)胞免受溶質(zhì)的損傷。滲透性冷凍保護(hù)劑的保護(hù)機(jī)制是在細(xì)胞冷凍懸液完全凝固之前，滲透到細(xì)胞內(nèi)，在細(xì)胞內(nèi)外產(chǎn)生一定的摩爾濃度，降低細(xì)胞內(nèi)外未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度，從而保護(hù)細(xì)胞免受高濃度電解質(zhì)的損傷同時(shí)。細(xì)胞內(nèi)水分也不會過分外滲，避免了細(xì)胞過分脫水皺縮。含血清，細(xì)胞污染(細(xì)菌、霉菌和支原體等)的風(fēng)險(xiǎn)更高。

凍存細(xì)胞注意事項(xiàng)：冷凍保護(hù)劑可降低培養(yǎng)基的冰點(diǎn)，并可減緩冷卻速度，較大降低冰晶形成的危險(xiǎn)(冰晶可損傷細(xì)胞，導(dǎo)致細(xì)胞死亡)。注：DMSO可促進(jìn)有機(jī)分子進(jìn)入組織。操作含DMSO的試劑時(shí)，應(yīng)采用與此類物質(zhì)安全危害相適應(yīng)的設(shè)備和操作規(guī)范，并應(yīng)按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處置此類試劑。建議可使用廠商生產(chǎn)的無血清細(xì)胞凍存液，使用方便，復(fù)蘇率高。注意冷凍保護(hù)劑DMSO的品質(zhì)：DMSO應(yīng)為試劑級等級，無菌且無色，以5-10ml小體積分裝，4℃避光保存，勿作多次解凍。待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后，立即加入1 ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合。金華正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液供應(yīng)商

無血清細(xì)胞凍存液：為多種保護(hù)劑組合，在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù)，較大提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率。廣州正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液供應(yīng)商

無血清細(xì)胞凍存液對比含血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢：傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液是使用培養(yǎng)基、血清和DMSO按照一定的比例混合，其中DMSO的含量是10%，血清的含量是10%，統(tǒng)稱為含血清細(xì)胞凍存液。含血清細(xì)胞凍存液的一般的凍存方法是梯度降溫凍存法，如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘，然后移至-20℃冰箱30分鐘，再移至-80℃冰箱保存16-18個(gè)小時(shí)（或隔夜），較后才移至液氮罐中進(jìn)行長期的儲存。（其中需要注意的是-20℃條件下不可超過1個(gè)小時(shí)，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量的死亡。）廣州正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液供應(yīng)商