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鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用:兩組培養(yǎng)皿中,隨著過氧化氫濃度的增高,均可見細(xì)胞凋亡狀態(tài)明顯加重,細(xì)胞存活率及細(xì)胞內(nèi)過氧化氫活力明顯下降,細(xì)胞凋亡率及細(xì)胞內(nèi)丙二醛水平明顯增高,Bcl-2/Bax比值明顯降低,呈劑量依賴性。而在相同濃度過氧化氫誘導(dǎo)下,與對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞凋亡狀態(tài)明顯減弱,細(xì)胞存活率、超氧化物歧化酶活力及Bcl-2/Bax比值增高,細(xì)胞凋亡率和丙二醛水平明顯減低。表明鼠尾膠原對(duì)過氧化氫所致的心肌細(xì)胞氧化損傷具有保護(hù)作用,其機(jī)制可能與提高超氧化物歧化酶活力,減少丙二醛產(chǎn)生及提高Bcl-2的表達(dá)有關(guān)。鼠尾膠原醋酸溶解:在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解。石家莊鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨
鼠尾膠原制備詳細(xì)步驟: 1、取大鼠尾巴洗凈,75%酒精浸泡 5 分鐘; 2.將尾巴剪開、去掉皮毛,并剪成小段,抽出銀色的尾鍵 3、將尾腱剪斷置于平皿中,PBS 浸泡; 4、將所有的尾鍵放于 Tris-HCl 中,4 度過夜。 0.05mol/L Tris-bas 的 Tris-HCl 的配制方法。 稱量 6gTris 置于 1L 燒杯中,加入約 800ml 去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙?,濃鹽酸調(diào)節(jié) PH,高壓滅菌。 5、吸去 Tris-HCl,將尾腱稱重(0.5-1 克); 6、將尾腱置于平皿內(nèi)剪碎,轉(zhuǎn)移至三角燒瓶中; 7、按每克尾腱 50ml 的比例,加入 0.1%醋酸溶液; 8、搖晃,使尾腱分散于醋酸溶液中,4℃放置一星期; 9、離心,4 度 4000 轉(zhuǎn)/分,30 分鐘; 10、吸取上清,過 300 目濾器。 11、每 600ml 上述粗提液中加入 100ml 0.14 mol/LNaOH,8000 轉(zhuǎn) 5min 離心,棄上清,留絮狀沉淀。 12、將絮狀沉淀物置于三蒸水中,用 0.1mol/L(1000:6)醋酸溶解沉淀物。昆明鼠尾膠原哪里買取大鼠尾巴洗凈,75%酒精浸泡5分鐘。
利用鼠尾Ⅰ型膠原構(gòu)建與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料。 方法 通過醋酸酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白,并重構(gòu)成膠原纖維。然后,將重構(gòu)后的膠原纖維放置在礦化液中模仿骨生物礦化2~6 d,通過透射電子顯微鏡和電子衍射觀察骨生物礦化。 結(jié)果 酸解提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白能夠重構(gòu)成膠原纖維,并且具有特征性的D-Band結(jié)構(gòu)。透射電子顯微鏡和電子衍射顯示:礦化2 d后,羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維,膠原纖維部分礦化;礦化6 d后,膠原纖維內(nèi)部完全礦化,形成Ⅰ型膠原蛋白/羥基磷灰石鈣的仿生骨材料。 結(jié)論 利用酸解法提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白可以重構(gòu)成膠原纖維,經(jīng)礦化可形成與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)一致的仿生骨材料。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,并且制作簡(jiǎn)便,成本低廉。
鼠尾膠原簡(jiǎn)介:鼠尾I型膠原蛋白(Collagenfromrattail,TypeI)系采用Birkedal-Hansen方法在無菌下制備,純度達(dá)到95%以上,可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于細(xì)胞培養(yǎng)皿的包被,特別適合普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細(xì)胞的培養(yǎng);也可用于制備三維膠原凝膠,使細(xì)胞在模擬的三維環(huán)境中生長(zhǎng)。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn):1、SDS-PAGE分析純度大于95%。2、無菌檢驗(yàn)結(jié)果為陰性。3、本品2μg/cm2包被細(xì)胞培養(yǎng)皿后培養(yǎng)PC-12細(xì)胞,貼壁及生長(zhǎng)正常。4、本品濃度1mg/mL,pH7.0時(shí)形成具有一定強(qiáng)度的三維膠原凝膠,NIH-3T3細(xì)胞在三維凝膠內(nèi)生長(zhǎng)正常、PC-12細(xì)胞在三維凝膠表面生長(zhǎng)正常。一種基于鼠尾膠原蛋白:根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料。
鼠尾膠原類似物的建立:目的:探尋建立類似物的培養(yǎng)方法。方法:原代培養(yǎng)人皮膚成纖維細(xì)胞,制備鼠尾膠原,將鼠尾膠原溶液、濃縮培養(yǎng)基、NaOH溶液和以血清重懸的成纖維細(xì)胞溶液在適當(dāng)?shù)谋壤禄旌虾笮纬赡z構(gòu)建類似物。結(jié)果:形成的類似物中成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好,并且組織塊具有一定彈性和抗拉伸能力。結(jié)論:①利用鼠尾膠原可以構(gòu)建類似物,該模型是進(jìn)行皮膚部位型培養(yǎng)和制作復(fù)合皮的關(guān)鍵與基礎(chǔ);②成纖維細(xì)胞膠原凝膠復(fù)合物有著良好的生物學(xué)特性,它是研究成纖維細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)之間以及細(xì)胞之間相互作用的良好模型。將無組織纖維、脂肪和多糖殘留的鼠尾腱,真空冷凍干燥備用。鄭州鼠尾膠原銷售廠家
本品可用于細(xì)胞培養(yǎng)皿的包被,特別適合普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。石家莊鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨
實(shí)驗(yàn)應(yīng)用:鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細(xì)胞中的應(yīng)用。目的:建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的效果。結(jié)果:自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞,細(xì)胞角蛋白18表達(dá)陽(yáng)性,免疫組織化學(xué)結(jié)果和掃描電鏡證實(shí)所培養(yǎng)的細(xì)胞具有典型的分泌上皮細(xì)胞特征。結(jié)論:成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,并且制作簡(jiǎn)便,成本低廉。石家莊鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨
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