要準(zhǔn)備的器具：組織剪2把，有齒鑷1把，無(wú)齒鑷1把，200 ml燒杯1個(gè)，培養(yǎng)皿1個(gè)，帶蓋廣口瓶1個(gè)，離心管、小瓶數(shù)個(gè)，滴管若干。以上物品須經(jīng)嚴(yán)格高壓消毒滅菌。需配制的液體0.1％醋酸溶液。經(jīng)44.48N10 min高壓蒸汽滅菌(或是過濾除菌)后備用。此外還有用消毒雙蒸水配制75％酒精溶液。取大鼠尾巴，洗凈，置75%酒精浸泡消毒后，手持尾巴，用止血鉗夾住尾巴較高，折斷尾骨后拉出尾腱，將尾腱剪碎后置消毒的三角燒瓶中，稱尾腱的重量，按每克尾腱50ml 的比例加入0.1%醋酸溶液，搖晃，使尾腱分散于醋酸溶液中，4℃放置48 小時(shí)，離心。吸取其上清，分裝至小瓶，4℃保存。上述制備過程均在無(wú)菌條件下完成。制備鼠尾膠原：吸取上清，分裝成小瓶，4℃保存。濟(jì)南正規(guī)鼠尾膠原單價(jià)

鼠尾Ⅰ型膠原：材料與方法：1. 主要材料、試劑和儀器鼠尾、鹽酸、等滲氯化鈉溶液、鈣液、磷液均購(gòu)自上海晶純生化科技股份有限公司。日立高新TEM HT770(日本日立公司)；多功能粉末X射線衍射儀。2.酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白取大鼠尾巴洗凈，用75%的乙醇浸泡5 min。將尾巴剪開，去掉皮毛，并剪成小段，抽出銀色的肌腱。將肌鍵剪斷置于平皿中，用無(wú)菌等滲氯化鈉溶液浸泡。吸去等滲氯化鈉溶液，將肌鍵置于平皿中剪碎，按每克肌鍵50 mL的比例加入0.1%的醋酸溶液。搖晃，將肌鍵分散于醋酸溶液中，4 ℃放置一周，然后以2186×g離心20 min。在醋酸溶液的酸解下，肌腱水解成膠凍狀凝膠，置于冰箱4 ℃保存。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄，并且制作簡(jiǎn)便，成本低廉。徐州正規(guī)鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細(xì)胞中的應(yīng)用。

鼠尾膠原：1實(shí)驗(yàn)制備：實(shí)驗(yàn)設(shè)備及材料：大鼠尾巴、剪刀、鑷子、止血鉗、彎頭吸管、平皿、三角燒瓶、燒杯、量筒、天平、生理鹽水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、蓋玻片、培養(yǎng)瓶、鉆石筆、鼠尾膠原。 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：1、制備鼠尾膠原（兩個(gè)同學(xué)一組操作）。2、切割小玻片。3、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。實(shí)驗(yàn)步驟：制備鼠尾膠原：1、取大鼠尾巴洗凈，75%酒精浸泡5分鐘；2、手持尾巴，用止血鉗夾住鼠尾的較高，折斷尾骨后拉出尾腱；3、將尾腱剪斷置于平皿中，生理鹽水浸泡；4、重復(fù)步驟2、3，直至尾腱量夠用；5、吸去生理鹽水，將尾腱稱重（0.5-1克）。

鼠尾膠原使用方法：1、細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被以包被濃度為2μg/cm2為例，用無(wú)菌0.006mol/L乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/mL。加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中，確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表面。開蓋在超凈臺(tái)上過夜晾干，也可以在室溫放置1小時(shí)后，用PBS洗3~4次后直接使用。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三個(gè)月以上的時(shí)間。三維膠原凝膠的制備：A、無(wú)細(xì)胞三維膠原凝膠的制備（以配制1mg/mL三維膠1mL為例）將200μL本品加到置于冰浴的離心管中，加入690μL雙蒸水，然后加到12μL0.1mol/LNaOH中（如果反過來(lái)把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)），立即混勻。再加入100μL10×PBS或10×培養(yǎng)液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中（混勻后pH為7左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅，初次使用時(shí)需要測(cè)定pH值）。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。如果配制中使用的是10×PBS，使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡。可直接或間接參與細(xì)胞的附著。

鼠尾膠原，10mg包裝，配制方法如下：1.配0.1M的乙酸溶液100ml。即取575ul冰乙酸加超純水至100ml，容量瓶配制比較準(zhǔn)確。2.用吸管吸取10ml剛配好的0.1M乙酸溶液（不要用*加，吸十次不如加一次z準(zhǔn)確），加入盛膠原的瓶中，輕輕顛倒，不要震蕩，蛋白 容易起泡。幾分鐘即可，蛋白質(zhì)非常好溶解。3.將膠原溶液移入事先壓好的玻璃瓶中，比青霉素瓶大點(diǎn)的就行。用*在瓶底加1ml氯仿，打到一檔就行，避免加入氣泡。然后4度過夜除菌。4.第二天將上層膠原溶液分裝進(jìn)EP管中。用封口膜封口，4度保存，勿冷凍。一種基于鼠尾膠原蛋白：根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料。南京鼠尾膠原生產(chǎn)廠家

鼠尾膠原蛋白是從老鼠尾巴提取出來(lái)的物質(zhì)。濟(jì)南正規(guī)鼠尾膠原單價(jià)

鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠3種基質(zhì)對(duì)角膜上皮細(xì)胞增殖的影響：目的探討鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠3種基質(zhì)對(duì)體外培養(yǎng)角膜上皮細(xì)胞增殖的影響。方法采用鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠作為基質(zhì)包被培養(yǎng)器皿,以普通培養(yǎng)器皿作對(duì)照,培養(yǎng)角膜上皮細(xì)胞,觀察細(xì)胞形態(tài),進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)并描繪細(xì)胞生長(zhǎng)曲線,比較不同基質(zhì)對(duì)角膜上皮細(xì)胞的增殖作用。結(jié)果使用基質(zhì)包被的培養(yǎng)器皿培養(yǎng)角膜上皮細(xì)胞,細(xì)胞增殖速度較普通組快,細(xì)胞形態(tài)、活力和長(zhǎng)勢(shì)比普通組更佳,促進(jìn)增殖的能力為鼠尾膠原多聚賴氨酸明膠。結(jié)論鼠尾膠原可促進(jìn)角膜上皮細(xì)胞增殖,且增殖效果優(yōu)于多聚賴氨酸和明膠。濟(jì)南正規(guī)鼠尾膠原單價(jià)