鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠3種基質(zhì)對(duì)角膜上皮細(xì)胞增殖的影響：目的探討鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠3種基質(zhì)對(duì)體外培養(yǎng)角膜上皮細(xì)胞增殖的影響。方法采用鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠作為基質(zhì)包被培養(yǎng)器皿,以普通培養(yǎng)器皿作對(duì)照,培養(yǎng)角膜上皮細(xì)胞,觀察細(xì)胞形態(tài),進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)并描繪細(xì)胞生長(zhǎng)曲線,比較不同基質(zhì)對(duì)角膜上皮細(xì)胞的增殖作用。結(jié)果使用基質(zhì)包被的培養(yǎng)器皿培養(yǎng)角膜上皮細(xì)胞,細(xì)胞增殖速度較普通組快,細(xì)胞形態(tài)、活力和長(zhǎng)勢(shì)比普通組更佳,促進(jìn)增殖的能力為鼠尾膠原多聚賴氨酸明膠。結(jié)論鼠尾膠原可促進(jìn)角膜上皮細(xì)胞增殖,且增殖效果優(yōu)于多聚賴氨酸和明膠。建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法。鄭州正規(guī)鼠尾膠原供應(yīng)商

含細(xì)胞三維膠原凝膠的制備（以配制1mg/mL三維膠1mL為例）準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞，并放置于冰浴中。將200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中（如果反過(guò)來(lái)把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)），立即混勻。再加入23μL10×PBS或10×培養(yǎng)液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中（混勻后pH為7左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒(méi)有加酚紅，初次使用時(shí)需要測(cè)定pH值）。加入760μL的細(xì)胞懸浮液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后，加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。本品在室溫下pH中性時(shí)可迅速成膠，在操作過(guò)程中要盡量保持低溫。保存條件4℃保存，切勿凍存，有效期一年。貴陽(yáng)正規(guī)鼠尾膠原廠家一種基于鼠尾膠原蛋白：各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇?xì)ぞ厶菫?% 2% 1%，余量的水。

鼠尾膠原實(shí)驗(yàn)應(yīng)用：探討應(yīng)用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中的促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁效果。方法制作鼠尾膠原，觀察全細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中，自制的鼠尾膠原對(duì)前庭毛細(xì)胞的貼壁黏附作用。結(jié)果無(wú)鼠尾膠原時(shí)，前庭毛細(xì)胞懸浮于外液，不宜封接；有鼠尾膠原時(shí)，前庭毛細(xì)胞貼附于培養(yǎng)皿底壁，易于封接和長(zhǎng)時(shí)間（約8h)的觀察和記錄。鼠尾膠原對(duì)前庭毛細(xì)胞具有良好的貼壁黏附促進(jìn)作用。結(jié)論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄，并且制作簡(jiǎn)便，成本低廉。

鼠尾膠原的提取步驟：離心膠原溶液(1600rpm，15 min)，取上清；置300 目篩網(wǎng)于濾器（高壓滅菌）中，抽濾上清 每600mL 上述粗提液中加100 mL 0.14 mol/L NaOH 溶液，離心(18000 rpm，12 min)，棄上 清，留絮狀沉淀；將絮狀沉淀轉(zhuǎn)移至錐形瓶中，用0.1 mol/L 的醋酸溶液(200 mL)振搖促其重新 溶解。 膠原醋酸液在-70較低溫冰凍兩天。 用一次性注射器戳洞封蓋冰凍好的含膠原培養(yǎng)皿保鮮膜，真空冷凍干燥呈干棉花樣外觀（至少24 準(zhǔn)確稱取配置3mg/mL 的膠原醋酸液，加入消毒過(guò)的攪拌子，冷房攪拌數(shù)日得絮狀膠原。 10. 膠原蛋白凝膠制備預(yù)試- 膠原液：5*DMEM：血清：10*HEPES 液=6：2：1：1，充分混勻； 0.5 NaOH調(diào)定pH 值至7.2（綜合DMEM顏色變化和pH試紙判斷。鼠尾膠原，是一種細(xì)胞支持物，它是細(xì)胞外基質(zhì)的主要成份。

以鼠尾膠原為支架的類似物的建立：探尋建立類似物的培養(yǎng)方法。方法：原代培養(yǎng)人皮膚成纖維細(xì)胞，制備鼠尾膠原，將鼠尾膠原溶液、濃縮培養(yǎng)基、NaOH溶液和以血清重懸的成纖維細(xì)胞溶液在適當(dāng)?shù)谋壤禄旌虾笮纬赡z構(gòu)建類似物。結(jié)果：形成的類似物中成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好，并且組織塊具有一定彈性和抗拉伸能力。結(jié)論：①利用鼠尾膠原可以構(gòu)建類似物，該模型是進(jìn)行皮膚部位型培養(yǎng)和制作復(fù)合皮的關(guān)鍵與基礎(chǔ)；②成纖維細(xì)胞膠原凝膠復(fù)合物有著良好的生物學(xué)特性，它是研究成纖維細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)之間以及細(xì)胞之間相互作用的良好模型。開(kāi)蓋在超凈臺(tái)上過(guò)夜晾干，也可以在室溫放置1小時(shí)后。南京正規(guī)鼠尾膠原哪里買(mǎi)

鼠尾膠原為貼附底物人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式的成功建立。鄭州正規(guī)鼠尾膠原供應(yīng)商

鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用：膠原蛋白具有抗氧化作用，但既往在實(shí)驗(yàn)室主要將鼠尾膠原用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁和支架構(gòu)建，對(duì)于其抗氧化作用目前尚無(wú)相關(guān)研究。目的：探討鼠尾膠原對(duì)過(guò)氧化氫導(dǎo)致離體心肌細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用。方法：將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿（實(shí)驗(yàn)組）和普通培養(yǎng)皿（對(duì)照組）中，并且均用0，10，100μmol/L H2O2誘導(dǎo)。24 h后，以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細(xì)胞的形態(tài)，應(yīng)用MTT 比色法檢測(cè)心肌細(xì)胞存活率，TUNEL 法檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡形態(tài)，流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡率，黃嘌呤氧化酶法檢測(cè)超氧化物歧化酶活力，硫代巴比妥比色法檢測(cè)丙二醛水平，Western-Blot 檢測(cè)凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表達(dá)。鄭州正規(guī)鼠尾膠原供應(yīng)商