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一些研究已經(jīng)研究了大腸桿菌的蛋白質(zhì)組。到2006年,4237個(gè)開放閱讀框架中的1627個(gè)(38%)已經(jīng)通過實(shí)驗(yàn)確定。給出了大腸桿菌K-12的4639221個(gè)堿基對序列。在注釋的4288個(gè)蛋白質(zhì)編碼基因中,38%沒有被賦予任何功能。與其他五種已測序的微生物進(jìn)行比較,發(fā)現(xiàn)其基因家族普遍存在,且分布較窄。大腸桿菌內(nèi)部有許多相似基因的家族也很明顯。至大的旁系同源蛋白質(zhì)家族包含80個(gè)ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白?;蚪M作為一個(gè)整體,就局部復(fù)制方向而言是驚人地有組織的。鳥嘌呤、寡核苷酸可能與復(fù)制和重組有關(guān),而且大多數(shù)基因都是定向的?;蚪M還包含插入序列(IS)元件、噬菌體殘余物和許多其他異常組成的斑塊,表明基因組通過水平轉(zhuǎn)移具有可塑性。銅綠假單胞菌的O抗原包含脂多糖,有特異性。長野解普魯蘭桿菌
關(guān)于銅綠假單胞桿菌加培養(yǎng)基的量放入問題,這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題是DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細(xì)胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響,還有一個(gè)說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10毫升以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。在不加任何條件下直接凍存細(xì)胞時(shí),細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會形成冰晶,能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)生機(jī)械損傷、電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水、PH改變、蛋白變性等,能引起細(xì)胞死亡。如向培養(yǎng)液加入保護(hù)劑,可使冰點(diǎn)降低。蕈青霉菌種枯草芽孢桿菌菌體生長過程中產(chǎn)生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短桿菌肽等活性物質(zhì)。
復(fù)蘇后的銅綠假單胞菌菌種在傳1-2代后使用。暫不啟開的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4攝氏度中保藏。銅綠假單胞菌特別注意事項(xiàng):微生物菌種應(yīng)保藏于低溫、清潔和干燥的地方,室溫放置時(shí)問過長會導(dǎo)致菌種衰退;菌種操作應(yīng)在無菌條件下進(jìn)行,防止雜菌污染:斜面菌種保藏時(shí)間通常為1-2個(gè)月,應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時(shí)轉(zhuǎn)接;凍干菌種保藏時(shí)間通常為5~10年;菌種使用過程中如出現(xiàn)雜菌污染或菌種生產(chǎn)性能下降,應(yīng)及時(shí)與烜雅聯(lián)系或更換新的菌種。銅綠假單胞菌培養(yǎng)保藏法,培養(yǎng)后于4—6攝氏度冰箱內(nèi)保存。培養(yǎng)溫度為35-37攝氏度。
大腸桿菌不是一種稀罕物,相反它存在于我們每一個(gè)人的體內(nèi),它是我們腸道中十分重要的正常菌群,能夠?yàn)槲覀兲峁┪覀冏陨砗铣刹涣说木S生素K2。不過,它也有「使壞」的時(shí)候:當(dāng)我們抵抗力下降時(shí),它就會成為機(jī)會致病菌,有可能引起我們腸道外的染上,比如敗血癥、泌尿道染上等。另一方面,有個(gè)別種類的大腸桿菌是有致病性的,能引起人類腸胃炎,導(dǎo)致腹不舒服、發(fā)熱、腹瀉等,在兒童中的癥狀甚至更為嚴(yán)重。不過總體來說,在正常條件下,那些無害種類的大腸桿菌與我們還是一個(gè)互惠共生的狀態(tài)。金黃色葡萄球營養(yǎng)要求不高,在普通培養(yǎng)基上生長良好。
關(guān)于銅綠假單胞菌的麩皮保存法是在麩皮內(nèi)加入60%的水,經(jīng)滅菌后接種培養(yǎng),然后干燥保藏。紙片(濾紙)保存法是將滅菌紙片浸入培養(yǎng)液或菌懸液中,常壓或減壓干燥后,置于裝有干燥劑的容器內(nèi)進(jìn)行保存。寄主保存法是銅綠假單胞菌侵入其寄主后加以保存的方法。低溫冰箱保存法一般為-20攝氏度、-50攝氏度或-85攝氏度,低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過多,有些可添加保護(hù)劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。大腸桿菌可以發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸、產(chǎn)氣。食苯假諾卡氏菌菌種
金黃色葡萄球是有細(xì)胞壁的革蘭陽性球菌,排列常是呈串的葡萄狀,所以稱作葡萄球菌。長野解普魯蘭桿菌
大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)是目前應(yīng)用很廣的蛋白表達(dá)系統(tǒng)。它具有:遺傳背景清楚。易于培養(yǎng)和控制。轉(zhuǎn)化操作簡單。表達(dá)水平高。成本低。周期短等特點(diǎn)。同時(shí)是常用也是經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的蛋白表達(dá)系統(tǒng),在基因表達(dá)技術(shù)中發(fā)展至早。Escherich于1885年發(fā)現(xiàn)大腸桿菌。1976年Struhl、1977年Vapnek及1978年Chang等分別將酵母DN段、粗糙鏈孢霉DN段和哺乳動物cDN段導(dǎo)入大腸桿菌,引起其表型的改變,證明了外源基因在大腸桿菌中可以使現(xiàn)有功能的活性表達(dá)。這些研究為大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)的發(fā)展奠定了理論基礎(chǔ)。1980年,Guarante等在Science雜志上發(fā)表了以質(zhì)粒、乳糖操縱子為基礎(chǔ)建立起來的大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)。這一發(fā)展構(gòu)成大腸桿菌系統(tǒng)的雛形。長野解普魯蘭桿菌
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