銅綠假單胞菌在分離、培養(yǎng)、保藏的工藝處理、長期保藏、保藏后復(fù)活等環(huán)節(jié)上,都有可能造成真類菌細(xì)胞發(fā)生損壞或基因組信息缺失,從而引起性狀發(fā)生變化。銅綠假單胞菌單層安瓿瓶菌種培養(yǎng)及打管說明,安瓿瓶開封,用浸過75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。菌株恢復(fù)培養(yǎng),用無菌吸管吸取0.3--0.5毫升適宜的液體培養(yǎng)基,滴入安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中,并在建議的條件下培養(yǎng)。菌種活化前,請將安瓿管保存在6-10攝氏度的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后,延遲期較長,需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長??莶菅挎邨U菌可提高動物體(人體)內(nèi)干擾素和巨噬細(xì)胞的活性。腸沙門氏菌腸亞種腸炎血清型菌種
金黃色葡萄球菌對高溫有一定的耐受能力,在80℃以上的高溫環(huán)境下30min才可以將其徹底殺死,另外金黃色葡萄球菌可以存活于高鹽環(huán)境,較高可以耐受15%濃度的NaCl溶液。由于細(xì)菌本身結(jié)構(gòu)特點,利用70%的乙醇可以在幾分鐘之內(nèi)將其快速殺死。金黃色葡萄球菌代謝類型為需氧或兼性厭氧,對環(huán)境要求不高,37℃為較適生長溫度,能在各種惡劣環(huán)境中存活下來,因此,用一般的營養(yǎng)瓊脂即可正常培養(yǎng)細(xì)菌。金黃色葡萄球菌是常見的食源性致病菌,普遍存在于自然環(huán)境中。金黃色葡萄球菌在適當(dāng)?shù)臈l件下,能夠產(chǎn)生腸有害元素,引起食物中毒。近幾年,金黃色葡萄球菌引發(fā)的食物中毒報道層出不窮,由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒占食源性微生物食物中毒事件的25%左右,金黃色葡萄球菌成為只次于沙門氏菌和副溶血桿菌的第三大微生物致病菌。齒雙歧桿菌菌株大腸桿菌是短桿菌,兩端呈鈍圓形,革蘭陰性。
銅綠假單胞桿菌的凍干菌種是經(jīng)冷凍干燥并抽真空保存的,開啟后必須一次使用完,不能留菌粉下次再用;另外安瓿管里大部分仍是用牛奶作為保護(hù)劑,里面菌體為少數(shù),復(fù)蘇時要全部菌懸液接在新鮮培養(yǎng)基上,否則可能造成復(fù)蘇不成功。菌種活化前,如要長期保藏,請將安瓿管保存在4-10攝氏度的環(huán)境下。操作前如有不明白之處,應(yīng)先咨詢專業(yè)人員,避免不必要的損失。菌種操作應(yīng)在在無菌條件下進(jìn)行;轉(zhuǎn)鐘完畢,廢棄物應(yīng)經(jīng)滅菌再做丟棄處理,以免污染周圍環(huán)境。復(fù)蘇后,微生物菌種應(yīng)保藏于建議的溫度、清潔和干燥的地方,室溫放置時間過長或?qū)е戮N衰退。
枯草芽孢桿菌用量少,為減少浪費,兌藥時應(yīng)用小容器將所需用量藥劑充分溶解后再倒入噴霧器中,加水至噴霧器較佳水平線進(jìn)行噴霧;早上10點前或下午4點后施藥,避免陽光直射,殺死芽孢。尤其是4點后用藥,夜間潮濕的環(huán)境更有利于芽孢萌發(fā)。不能與銅制劑、鏈霉素等殺菌劑及堿性農(nóng)藥混用;病害初期或發(fā)病前施藥效果較佳,施藥時注意使藥液均勻噴至作物各部位??莶菅挎邨U菌的溶菌作用主要表現(xiàn)在是通過吸附在病原菌的菌絲上,并隨著菌絲生長而生長,而后產(chǎn)生溶菌物質(zhì)造成原生質(zhì)泄露使得菌絲體斷裂;或者是產(chǎn)生抗類菌物質(zhì)通過溶解病原菌孢子的細(xì)胞壁或細(xì)胞膜,致使細(xì)胞壁穿孔、畸形等現(xiàn)象從而抑制孢子萌發(fā)。銅綠假單胞菌為革蘭氏陰性,不產(chǎn)芽胞。
銅綠假單胞菌亦稱綠膿桿菌,為專性需氧菌。用傳統(tǒng)半固體培養(yǎng)基保存綠膿桿菌的方法,一般3個月左右就需再次移種;若保存到半年則有存活率低、復(fù)蘇后色素不明顯、長期保存易發(fā)生變異等缺點。應(yīng)用較低溫甘油保存法后,現(xiàn)已保存兩年多,菌種存活率高達(dá)100%,且細(xì)菌的微生物特性未發(fā)生變異,該方法明顯優(yōu)于傳統(tǒng)的半固體保存方法,較低溫甘油保存法需要配制無菌肉湯,稱取牛肉膏5.0g、蛋白胨10.0g,氯化鈉0.5g,加入1000毫升蒸餾水中,加熱溶解,調(diào)pH至7.4~0.2。按每管1.7毫升分裝于華氏管中,121.3攝氏度、20分鐘高壓滅菌。通過染色鏡檢,銅綠假單胞菌為革蘭陰性桿菌。光滑青霉菌株
銅綠假單胞菌在培養(yǎng)基底部細(xì)菌的生長不良。腸沙門氏菌腸亞種腸炎血清型菌種
大腸桿菌檢測方法:平板計數(shù)法:用無菌吸管吸取稀釋度樣品1mL,該樣品與乳糖膽鹽發(fā)酵類似,然后將其放入無菌培養(yǎng)皿中,再加入溫度于45℃下的CDLJJD顯色培養(yǎng)基中10mL的量,并進(jìn)行培養(yǎng)皿中溶液均勻混合,可以通過快速轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿的方式,等溶液凝固以后,加入5mL左右,然后快速搖晃培養(yǎng)基,使其可以均勻覆蓋平板表面,等其凝固以后,翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)基,在溫度37℃中培養(yǎng)24h左右,然后觀察其形態(tài),顏色等變化。除此之外,平行設(shè)置兩個稀釋度培養(yǎng)基,步驟是先稀釋樣本,通過稀釋后,微生物可以分散為單個細(xì)胞,然后進(jìn)行一定環(huán)境條件下培養(yǎng),直到其長成菌落為止,然后進(jìn)行計算大腸桿菌的數(shù)量,通過稀釋度和樣本數(shù)量進(jìn)行計算。腸沙門氏菌腸亞種腸炎血清型菌種
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