金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus,S.aureus)也稱“金葡菌”,隸屬于葡萄球菌屬,是革蘭氏陽(yáng)性菌表示,為一種常見(jiàn)的食源性致病微生物。該菌較適宜生長(zhǎng)溫度為37℃,pH為7.4,耐高鹽,可在鹽濃度接近10%的環(huán)境中生長(zhǎng)。金黃色葡萄球菌常寄生于人和動(dòng)物的皮膚、鼻腔、咽喉、腸胃、癰、化膿瘡口中,空氣、污水等環(huán)境中也無(wú)處不在。我國(guó)國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)于2013年發(fā)布《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中致病菌限量》(GB29921-2013),在國(guó)標(biāo)中制定了金黃色葡萄球菌的限量標(biāo)準(zhǔn):規(guī)定熟肉制品、熟制水產(chǎn)品、熟制糧食制品等8大類食品中,同批次采集5份樣品,每份樣品中的金黃色葡萄球菌濃度均不得超出100CFU/g,只允許其中1份樣品在100~1000CFU/g之間。金黃色葡萄球是較敏感的維生素,大多都是青霉素類。根霉屬的菌菌種
枯草芽孢桿菌,是芽孢桿菌屬的一種,CAS號(hào)68038-70-0。單個(gè)細(xì)胞0.7~0.8×2~3微米,著色均勻。無(wú)莢膜,周生鞭毛,能運(yùn)動(dòng)。革蘭氏陽(yáng)性菌,芽孢0.6~0.9×1.0~1.5微米,橢圓到柱狀,位于菌體中心或稍偏,芽孢形成后菌體不膨大。菌落表面粗糙不透明,污白色或微黃色,在液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)時(shí),常形成皺醭。需氧菌。可利用蛋白質(zhì)、多種糖及淀粉,分解色氨酸形成吲哚。在遺傳學(xué)研究中應(yīng)用普遍,對(duì)此菌的嘌呤核苷酸的合成途徑與其調(diào)節(jié)機(jī)制研究較清楚。普遍分布在土壤及腐爛的有機(jī)物中,易在枯草浸汁中繁殖,故名。凝結(jié)芽孢桿菌 GBI306086菌株嗜粘蛋白阿克曼氏菌 哈利氏厭氧菌 干酪乳桿菌亞種 DG 副干酪乳桿菌 B21060 長(zhǎng)雙歧桿菌 88 副干酪乳桿菌 Lpc-37 .
枯草芽孢桿菌能提高動(dòng)物生產(chǎn)性能是其產(chǎn)生多種消化酶的一個(gè)重要體現(xiàn)。芽孢桿菌為需氧菌,在生長(zhǎng)過(guò)程中需要大量的氧氣,進(jìn)入動(dòng)物腸道內(nèi),消耗大量的游離氧,降低腸道內(nèi)氧濃度和氧化還原電勢(shì),改善了乳酸桿菌、雙歧桿菌等厭氧菌的生長(zhǎng)環(huán)境,保持腸道微生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)衡,提高動(dòng)物機(jī)體抗病能力,減少胃腸道疾病發(fā)生幾率。拮抗致病微生物,改善體內(nèi)外生態(tài)環(huán)境,動(dòng)物飼喂枯草芽孢桿菌后,能明顯降低腸道大腸桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、沙門氏菌的數(shù)量,使機(jī)體內(nèi)的有益菌增加而潛在的致病菌減少,因而排泄物、分泌物中的有益菌數(shù)量增多,致病性微生物減少,從而凈化體內(nèi)外環(huán)境,減少疾病的發(fā)生。
大腸桿菌搖瓶發(fā)酵常用的化學(xué)合成培養(yǎng)基有LB、SOB、SOC等。培養(yǎng)基中通常含有碳(能)源、氮源,以及微營(yíng)養(yǎng)物如微生物和微量元素,這些營(yíng)養(yǎng)物的濃度與比例,對(duì)實(shí)現(xiàn)生產(chǎn)重組微生物的高密度發(fā)酵是很重要的。培養(yǎng)基中復(fù)合氮源的種類對(duì)重組大腸桿菌的高密度發(fā)酵也很重要。在某些情況下,向培養(yǎng)基中添加一些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)能提高生產(chǎn)率。這些營(yíng)養(yǎng)物的作用可能是作為產(chǎn)物前體,也有可能是阻止產(chǎn)物的降解。發(fā)酵過(guò)程:1、種子活化:將保存于-80℃的種子甘油菌室溫解凍,取500ul菌接入50mlLB培養(yǎng)基,再加入相對(duì)應(yīng)的篩選抗性,37℃培養(yǎng)7h。2、上罐:將上步活化的種子50ml接入3L發(fā)酵培養(yǎng)基中,設(shè)定溫度,空氣流量,壓力值,監(jiān)控DO與PH值。3、從發(fā)酵4小時(shí)開(kāi)始,每隔1h進(jìn)行取樣檢測(cè)OD,當(dāng)OD值≥40時(shí),開(kāi)始誘導(dǎo)。4、誘導(dǎo)物:IPTG(1mol/L,過(guò)濾除菌),加入4ml,至終濃度達(dá)到1mmol/L,誘導(dǎo)階段溫度控制再35℃,其他條件不變,誘導(dǎo)10小時(shí)。5、誘導(dǎo)結(jié)束,放罐,5000rpm離心,收集菌體,于-80℃冰箱保存。金黃色葡萄球是病原微生物,這種病原微生物可傳染人并造成相應(yīng)的病癥。
典型的金黃色葡萄球菌為球型,顯微鏡下排列成葡萄串狀。金黃色葡萄球菌無(wú)芽胞、鞭毛,大多數(shù)無(wú)莢膜。革蘭染色陽(yáng)性。金葡菌具有抗干燥、耐熱、耐低溫、耐高滲的特性。在干燥環(huán)境中存活數(shù)月;空氣中存在,但不繁殖。加熱70℃1h,80℃30min不被殺死。在冷凍食品中不易死。在含有50%~66%蔗糖或15%以上食鹽食品中才可被抑制,能在15%NaCl和40%膽汁中生長(zhǎng)。金黃色葡萄球菌是院內(nèi)傳染及社區(qū)獲得性傳染的常見(jiàn)細(xì)菌之一。隨著?-內(nèi)酰胺類維生素的普遍應(yīng)用,耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)隨之增加,且引起的傳染和病死率有逐年增加的趨勢(shì)。MRSA可通過(guò)接觸途徑進(jìn)行傳播,即易感人群從攜帶者或傳染者身上獲得MRSA,導(dǎo)致傳播流行。通過(guò)染色鏡檢,銅綠假單胞菌為革蘭陰性桿菌。凸形假單胞菌菌種
大腸桿菌每年的生產(chǎn)數(shù)量都讓人嘆為觀止。根霉屬的菌菌種
銅綠假單胞菌通過(guò)吸附在病原真類菌的菌絲上,并隨著菌絲生長(zhǎng)而生長(zhǎng),產(chǎn)生溶菌物質(zhì)消解菌絲體,使菌絲發(fā)生斷裂、解體、細(xì)胞質(zhì)消解,有的菌絲原生質(zhì)凝結(jié);或者是次生代謝產(chǎn)物對(duì)病原菌孢子的細(xì)胞壁產(chǎn)生溶解作用,致使細(xì)胞壁產(chǎn)生穿孔、畸形等現(xiàn)象。銅綠假單胞菌不但能直接抑制植物病原菌,而且能通過(guò)誘發(fā)植物自身的抗病潛能從而增強(qiáng)植物的抗病性。生防銅綠假單胞菌能促進(jìn)植物根系及植株生長(zhǎng),增強(qiáng)植物的抗病性,從而間接地減少病害發(fā)生。銅綠假單胞菌發(fā)酵分為:固體發(fā)酵、液體發(fā)酵、固液混合發(fā)酵3種工藝。根霉屬的菌菌種
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