在配制改良高氏二號培養(yǎng)基時,如果遇到成分沉淀問題,可以采取以下措施進行處理:1.**充分溶解**:確保所有成分在加入之前已經(jīng)充分溶解。對于不易溶解的成分,如瓊脂,需要在加熱條件下不斷攪拌直至完全溶解。2.**調整溶解順序**:根據(jù)各成分的溶解特性,調整添加順序。通常先溶解無機鹽和維生素,再加入有機物質。3.**使用輔助溶劑**:對于某些難溶成分,可以考慮使用適當?shù)娜軇┗蛑軇﹣韼椭芙狻?.**避免混合沉淀**:在混合不同成分時,要注意避免因成分相互作用而產(chǎn)生沉淀。例如,避免將鈣鹽和磷酸鹽直接混合。5.**控制pH值**:pH值的變化可能會影響某些成分的溶解度,因此在調節(jié)pH值時要小心,確保在成分完全溶解后再進行。6.**分步滅菌**:如果培養(yǎng)基中某些成分不耐熱,可以考慮分步滅菌。即先滅菌大部分成分,冷卻后再添加不耐熱的成分。7.**過濾**:如果沉淀物已經(jīng)形成,可以通過過濾來去除。使用適當孔徑的濾紙或濾網(wǎng)過濾培養(yǎng)基。8.**攪拌**:在溶解和加熱過程中,持續(xù)攪拌可以減少沉淀的形成。9.**使用螯合劑**:對于易氧化的成分,如硫酸亞鐵,可以使用螯合劑(如EDTA)來防止沉淀和氧化。制備改良CCD瓊脂培養(yǎng)皿時需要將干粉成分溶解在蒸餾水中,經(jīng)過高壓滅菌,并在冷卻至45-50℃時加入添加劑。MuellerHinton 瓊脂
改良Frey氏培養(yǎng)基是一種專門用于支原體培養(yǎng)的培養(yǎng)基,具有以下特點:1.**成分組成**:-改良Frey氏培養(yǎng)基的基礎配方包括氯化鈉、氯化鉀、磷酸二氫鉀、水解乳蛋白、酚紅、硫酸鎂、磷酸氫二鈉、葡萄糖、酵母浸粉和醋酸鉈。每升培養(yǎng)基中具體分量為氯化鈉5.0克,氯化鉀0.4克,磷酸二氫鉀0.2克,水解乳蛋白5.0克,酚紅0.1克,硫酸鎂0.2克,磷酸氫二鈉1.4克,葡萄糖10.0克,酵母浸粉25.0克,醋酸鉈0.1克,pH值控制在7.7±0.1。2.**用途**:-主要用于培養(yǎng)滑液支原體及其他禽支原體。特別適合于滑液支原體的培養(yǎng)和檢測。3.**pH值**:-改良Frey氏培養(yǎng)基的pH值在7.6~7.8之間,適合支原體的生長。4.**靈敏度和穩(wěn)定性**:-改良Frey氏液體培養(yǎng)基為澄清、無雜質,呈玫瑰紅色的液體;經(jīng)靈敏度檢驗,液體培養(yǎng)基靈敏度菌達到10^-8及以上,且陰性對照無變色,證明該培養(yǎng)基靈敏度高。5.**使用方法**:-稱取47.4克培養(yǎng)基,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,116℃高壓滅菌30分鐘,冷至45℃左右時加入100ml無菌馬血清、輔酶I0.1g、L-半胱氨酸0.1g、精氨酸0.4g和青霉素80萬單位。6.**添加劑**:-可加入改良Frey添加劑,每支添加于1000ml改良Frey氏培養(yǎng)基中,以增強培養(yǎng)效果。木醋桿菌固體培養(yǎng)基改良番茄汁瓊脂培養(yǎng)皿的質量控制包括對質控菌株的接種和培養(yǎng),以確保培養(yǎng)基的性能和準確性。
MD培養(yǎng)基(MinimalDextroseMedium)是一種常用于畢赤酵母(Pichiapastoris)等微生物的培養(yǎng)基,具有以下特點:1.**配方成分**:-MD培養(yǎng)基的主要成分包括酵母氮源、無氨基酸和硫酸銨、硫酸銨、D-葡萄糖和瓊脂糖H,還含有G418硫酸鹽用于抗生物質的篩選。-具體成分如YNB(酵母氮源基)、D-生物素、D-葡萄糖、腺嘌呤和L-組氨酸等。YNB的具體成分可以參見相關產(chǎn)品說明。2.**用途**:-MD培養(yǎng)基主要用于畢赤酵母營養(yǎng)缺陷型菌株的轉化子篩選,特別是用于篩選his4標記和ade2標記。適用的酵母菌株包括GS115、X33、KM71、SMD1168、PichiaPinkstrain等。-MDA培養(yǎng)基(MinimalDextroseMedium+Adenine)即含有腺嘌呤的基礎葡萄糖培養(yǎng)基,用于培養(yǎng)腺嘌呤缺陷型畢赤巴斯德酵母,如PichiaPink菌株。-MDH培養(yǎng)基(MinimalDextroseMedium+Histidine)即含組氨酸的基礎葡萄糖培養(yǎng)基,用于培養(yǎng)組氨酸缺陷型畢赤巴斯德酵母。3.**使用方法**:-如用于配置液體培養(yǎng)基,每包含約16.7g,加入500mL水中,磁力攪拌溶解后,過濾除菌即可。-如用于配置固體培養(yǎng)基,每包含約16.7g,加入250mL水中,磁力攪拌溶解后,過濾除菌70℃?zhèn)溆?;配?50mL的4%的瓊脂粉,高壓滅菌70℃水浴備用;按照1:1混合后倒平板即可。
乳糖亞硫酸鹽培養(yǎng)基(LactoseSulfiteMedium,簡稱LS)是一種用于產(chǎn)氣莢膜梭菌確認試驗的培養(yǎng)基,具有以下特點:1.**用途**:-主要用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的確認試驗,通過檢測其發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的能力。2.**成分組成**:-培養(yǎng)基的主要成分包括胰酪胨、酵母膏、氯化鈉、乳糖和L-半胱氨酸鹽酸鹽。具體配方為每升含有胰酪胨15.0g、酵母膏2.5g、氯化鈉2.5g、乳糖10.0g、L-半胱氨酸鹽酸鹽0.3g,pH值控制在7.1±0.2(25℃)。3.**添加劑**:-每瓶培養(yǎng)基需配套添加焦亞硫酸鈉溶液和檸檬酸鐵銨溶液,每8mL乳糖亞硫酸鹽培養(yǎng)基(LS)需要1支焦亞硫酸鈉和1支檸檬酸鐵銨溶液。這些添加劑用于檢測硫化氫的產(chǎn)生,使菌落呈黑色。4.**配制方法**:-稱取30.3g培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于1000mL蒸餾水中,分裝至含有倒置小導管的試管中,每管8mL,121℃高壓滅菌15分鐘,冷卻,臨用前,每管添加0.5mL過濾除菌的焦亞硫酸鈉溶液和0.5mL檸檬酸鐵銨溶液。5.**培養(yǎng)條件**:-將培養(yǎng)基放置于36℃±1℃的厭氧環(huán)境中培養(yǎng)18-24小時。6.**結果觀察**:-接種質控菌株如產(chǎn)氣莢膜梭菌(ATCC13124),觀察其生長情況和特征。產(chǎn)氣莢膜梭菌在該培養(yǎng)基上生長良好,菌落變黑,表明其發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的能力。營養(yǎng)葡萄糖瓊脂培養(yǎng)皿的用途十分廣,它適用于多種細菌的綜合生化試驗,可以用于觀察菌落形態(tài)。
甘露醇氯化鈉瓊脂(MannitolSaltAgar,簡稱MSA)是一種用于分離和鑒定革蘭氏陽性細菌特別是金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)的選擇性培養(yǎng)基,具有以下特點:1.**成分組成**:-甘露醇氯化鈉瓊脂的主要成分包括甘露醇、氯化鈉、瓊脂、酚紅指示劑等。具體配方為每升培養(yǎng)基含有甘露醇10克、氯化鈉75克、瓊脂15克、酚紅0.03克,pH值通常調至7.2-7.4。2.**高鹽濃度**:-該培養(yǎng)基含有較高濃度的氯化鈉(7.5-10%),這種高鹽環(huán)境有助于抑制革蘭氏陰性細菌和一些其他非耐鹽細菌的生長,同時促進耐鹽的革蘭氏陽性細菌如金黃色葡萄球菌的生長。3.**pH值**:-甘露醇氯化鈉瓊脂的pH值通常在7.2-7.4之間,適合多數(shù)細菌的生長。4.**指示劑**:-培養(yǎng)基中添加的酚紅指示劑可以顯示細菌的代謝活動,幫助鑒別細菌。例如,某些細菌在發(fā)酵甘露醇時會產(chǎn)生酸性代謝產(chǎn)物,導致培養(yǎng)基顏色變化。5.**選擇性**:-甘露醇氯化鈉瓊脂具有選擇性,特別適合于金黃色葡萄球菌的分離和鑒定。金黃色葡萄球菌能夠在高鹽環(huán)境中生長,并利用甘露醇作為碳源,發(fā)酵產(chǎn)生酸,使培養(yǎng)基顏色變化。改良番茄汁瓊脂培養(yǎng)皿的制備方法包括將干粉成分加入蒸餾水,加熱溶解,校正pH值,然后進行高壓滅菌。YM肉湯
營養(yǎng)葡萄糖瓊脂培養(yǎng)皿可以用于大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌等質控菌株的培養(yǎng)和觀察 。MuellerHinton 瓊脂
水:水是細胞生長的基本介質,改良亮綠瓊脂培養(yǎng)皿中的水分為細菌提供了必需的溶劑環(huán)境。氧氣:雖然瓊脂培養(yǎng)基本身不提供氧氣,但細菌可以通過接觸培養(yǎng)皿上方的空氣來獲取氧氣,進行有氧呼吸??股镔|:在某些情況下,改良亮綠瓊脂培養(yǎng)皿中可以添加抗生物質,以抑制特定菌種的生長,從而篩選出對抗生物質有抗性的菌種。通過這些方式,改良亮綠瓊脂培養(yǎng)皿為菌種提供了一個適宜的生長環(huán)境,使其能夠在實驗室條件下生長和繁殖。在實際應用中,根據(jù)研究目的和目標菌種的特定需求,培養(yǎng)基的配方可能會有所調整。復制再試一次分享MuellerHinton 瓊脂