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支原體肉湯培養(yǎng)基是一種專(zhuān)門(mén)用于支原體的分離和培養(yǎng)的培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**成分組成**:-支原體肉湯培養(yǎng)基的主要成分包括豬胃消化粉、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化鈉、葡萄糖和酚紅。具體配方為每升含有豬胃消化粉10.0g,牛肉浸粉5.0g,酵母浸粉5.0g,氯化鈉2.5g,葡萄糖5.0g,酚紅0.02g,pH值調(diào)至7.6±0.2(25℃)。2.**用途**:-主要用于支原體的分離培養(yǎng),特別是肺炎支原體。支原體檢查法在2020年版《中華人民共和國(guó)藥典》中體現(xiàn),要求使用支原體肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)監(jiān)測(cè)肺炎支原體。3.**培養(yǎng)條件**:-支原體肉湯培養(yǎng)基需要在36℃培養(yǎng)7-14天,觀察培養(yǎng)基變色結(jié)果。肺炎支原體可以發(fā)酵培養(yǎng)基中的葡萄糖,使培養(yǎng)基的pH值降低,遇指示劑酚紅使培養(yǎng)基變黃。4.**添加劑**:-每瓶支原體肉湯培養(yǎng)基需配套青霉素溶液(80萬(wàn)IU),每1000ml支原體肉湯培養(yǎng)基溶液中添加1支青霉素溶液(80萬(wàn)IU),以抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)。5.**培養(yǎng)基靈敏度**:-支原體肉湯培養(yǎng)基和精氨酸支原體肉湯培養(yǎng)基的靈敏度均達(dá)到10^9CCU·mL^-1。支原體肉湯基礎(chǔ)和精氨酸支原體肉湯基礎(chǔ)存放于2~8℃有效期為90天。MRVP培養(yǎng)基是一種用于微生物生化鑒定的培養(yǎng)基,特別是用于進(jìn)行甲基紅(MR)試驗(yàn)。碎肉肉湯基礎(chǔ)
在配制改良高氏二號(hào)培養(yǎng)基時(shí),如果遇到成分沉淀問(wèn)題,可以采取以下措施進(jìn)行處理:1.**充分溶解**:確保所有成分在加入之前已經(jīng)充分溶解。對(duì)于不易溶解的成分,如瓊脂,需要在加熱條件下不斷攪拌直至完全溶解。2.**調(diào)整溶解順序**:根據(jù)各成分的溶解特性,調(diào)整添加順序。通常先溶解無(wú)機(jī)鹽和維生素,再加入有機(jī)物質(zhì)。3.**使用輔助溶劑**:對(duì)于某些難溶成分,可以考慮使用適當(dāng)?shù)娜軇┗蛑軇﹣?lái)幫助溶解。4.**避免混合沉淀**:在混合不同成分時(shí),要注意避免因成分相互作用而產(chǎn)生沉淀。例如,避免將鈣鹽和磷酸鹽直接混合。5.**控制pH值**:pH值的變化可能會(huì)影響某些成分的溶解度,因此在調(diào)節(jié)pH值時(shí)要小心,確保在成分完全溶解后再進(jìn)行。6.**分步滅菌**:如果培養(yǎng)基中某些成分不耐熱,可以考慮分步滅菌。即先滅菌大部分成分,冷卻后再添加不耐熱的成分。7.**過(guò)濾**:如果沉淀物已經(jīng)形成,可以通過(guò)過(guò)濾來(lái)去除。使用適當(dāng)孔徑的濾紙或?yàn)V網(wǎng)過(guò)濾培養(yǎng)基。8.**攪拌**:在溶解和加熱過(guò)程中,持續(xù)攪拌可以減少沉淀的形成。9.**使用螯合劑**:對(duì)于易氧化的成分,如硫酸亞鐵,可以使用螯合劑(如EDTA)來(lái)防止沉淀和氧化。硝酸鹽肉湯VRBA培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、酵母膏粉、乳糖、氯化鈉、膽鹽、結(jié)晶紫和中性紅。
連四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基(TetrathionateBroth,簡(jiǎn)稱(chēng)TTB)是一種選擇性富集培養(yǎng)基,主要用于分離和富集沙門(mén)氏菌。以下是其主要特點(diǎn):1.**成分組成**:-連四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分包括胰酪蛋白胨、動(dòng)物組織消化物、膽鹽、碳酸鈣和硫代硫酸鈉等。每升培養(yǎng)基中通常包含胰酪蛋白胨2.5g、動(dòng)物組織消化物2.5g、膽鹽1.0g、碳酸鈣10.0g和硫代硫酸鈉30.0g。2.**選擇性**:-該培養(yǎng)基通過(guò)添加去氧膽鹽和亮綠染料等抑制劑,抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(zhǎng),從而提高對(duì)沙門(mén)氏菌的選擇性。碘-碘酸鉀與硫代硫酸鈉反應(yīng)生成四硫磺酸鹽,阻遏常規(guī)腸道細(xì)菌生長(zhǎng)。3.**鑒別功能**:-葡萄糖和甘露醇是可發(fā)酵的糖類(lèi)物質(zhì),輔助腸道致病菌尤其是沙門(mén)氏菌的鑒別。連四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基含有碘液和煌綠水溶液,這些添加劑有助于抑制共生生物,從而改善沙門(mén)氏菌的分離。4.**應(yīng)用廣**:-主要用于傷寒沙門(mén)氏菌和其他沙門(mén)氏菌的分離、增菌和鑒定。常用于從糞便、污水等樣品中分離沙門(mén)氏菌。5.**配制方法**:-一般將培養(yǎng)基粉末溶解在蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸,分裝后進(jìn)行高壓滅菌。使用時(shí)需現(xiàn)配現(xiàn)用,以保證培養(yǎng)基的穩(wěn)定性和選擇性。
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基(ColumbiaAgar)是一種常用的微生物學(xué)培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**用途**:-主要用于梭菌的分離培養(yǎng),特別是用于藥品中梭菌的檢測(cè)。2.**成分組成**:-培養(yǎng)基的主要成分包括酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、肉胃酶消化物、酵母浸出粉、玉米淀粉、氯化鈉和瓊脂。這些成分提供碳氮源、維生素和生長(zhǎng)因子,維持均衡的滲透壓,并作為凝固劑。3.**添加劑**:-每瓶需配套添加硫酸慶大霉素,以抑制腸桿菌科和銅綠假單胞菌的生長(zhǎng)。4.**pH值**:-培養(yǎng)基的pH值控制在7.3±0.2(25℃)。5.**配制方法**:-稱(chēng)取44g培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于1000ml純化水中,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15分鐘,冷至45-50℃,加入硫酸慶大霉素20mg,混勻,傾入無(wú)菌平皿,備用。6.**培養(yǎng)條件**:-將培養(yǎng)基放置于30℃-35℃恒溫培養(yǎng)箱中,進(jìn)行厭氧培養(yǎng)48-72小時(shí)。7.**質(zhì)控結(jié)果**:-接種質(zhì)控菌株如生孢梭菌、大腸埃希氏菌和金黃色葡萄球菌,觀察其生長(zhǎng)情況和特征。生孢梭菌在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好,形成無(wú)色菌落,而大腸埃希氏菌和金黃色葡萄球菌則被抑制。8.**注意事項(xiàng)**:-培養(yǎng)基中含少量淀粉,若滅菌前未加熱煮沸溶解,滅菌后冷卻可能出現(xiàn)少量白色沉淀。
酪胨瓊脂(GelatinAgar,簡(jiǎn)稱(chēng)G.A)培養(yǎng)基是一種常用的微生物學(xué)培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**成分組成**:-酪胨瓊脂的主要成分包括蛋白胨、氯化鈉和瓊脂。蛋白胨提供氮源和維生素,氯化鈉維持滲透壓平衡,瓊脂作為凝固劑。2.**培養(yǎng)用途**:-該培養(yǎng)基用于多種微生物的生長(zhǎng),特別是在檢測(cè)和分離細(xì)菌時(shí)。它可以用于培養(yǎng)革蘭氏陽(yáng)性菌和陰性菌,如金黃色葡萄球菌、大腸桿菌等。3.**凝固特性**:-酪胨瓊脂中含有瓊脂,使其在冷卻后形成固態(tài)培養(yǎng)基,便于微生物的分離和觀察。4.**pH值**:-酪胨瓊脂的pH值通常在7.2-7.4之間,適合大多數(shù)細(xì)菌的生長(zhǎng)。pH值的穩(wěn)定性對(duì)于微生物的生長(zhǎng)和代謝活動(dòng)至關(guān)重要。5.**營(yíng)養(yǎng)豐富**:-由于蛋白胨的添加,酪胨瓊脂提供了豐富的氮源和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),支持微生物的快速生長(zhǎng)和繁殖。6.**操作簡(jiǎn)便**:-預(yù)裝的酪胨瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)皿在使用時(shí)只需打開(kāi)包裝,接種微生物后即可進(jìn)行培養(yǎng),無(wú)需額外準(zhǔn)備培養(yǎng)基,操作簡(jiǎn)便快捷。7.**無(wú)菌保證**:-預(yù)裝培養(yǎng)皿在生產(chǎn)過(guò)程中經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的無(wú)菌操作和滅菌處理,確保培養(yǎng)皿內(nèi)無(wú)雜菌污染,為微生物的純種培養(yǎng)提供保障。LB瓊脂(Miller)是一種用于細(xì)菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基,特別適合于大腸桿菌(E. coli)等革蘭氏陰性菌的培養(yǎng)。A1培養(yǎng)基
LB瓊脂可以通過(guò)將粉末成分溶解在去離子水中,加熱煮沸以幫助瓊脂溶解,然后用NaOH調(diào)節(jié)pH至適宜值。碎肉肉湯基礎(chǔ)
牛心湯肉湯培養(yǎng)基(HeartInfusionBroth)是一種營(yíng)養(yǎng)豐富的微生物培養(yǎng)基,主要用于培養(yǎng)和增菌各種苛養(yǎng)微生物,特別是鏈球菌和腸球菌。以下是它的一些特點(diǎn):1.**營(yíng)養(yǎng)成分**:牛心湯肉湯培養(yǎng)基含有牛心浸粉、蛋白胨、葡萄糖、碳酸氫鈉、氯化鈉和無(wú)水磷酸氫二鈉等成分,為微生物提供碳源、氮源以及必需的無(wú)機(jī)鹽和維生素。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通??刂圃?.4±0.2(25℃),為微生物提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。3.**應(yīng)用范圍**:它適用于多種苛養(yǎng)性微生物的培養(yǎng),如鏈球菌屬(Streptococcus)和腸球菌屬(Enterococcus)等,也可用于致病細(xì)菌的分離和增菌,包括弧菌科、霍亂弧菌、牛奶中的溶血鏈球菌、腦膜炎球菌、肺炎球菌等。4.**制備方法**:將培養(yǎng)基粉末溶解在蒸餾水中,加熱煮沸至完全溶解,然后進(jìn)行高壓滅菌,通常在115℃下滅菌20分鐘。5.**儲(chǔ)存條件**:牛心湯肉湯培養(yǎng)基通常需要在陰涼干燥的條件下儲(chǔ)存,以保持其穩(wěn)定性和有效性。6.**質(zhì)量控制**:使用標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行質(zhì)量控制,確保培養(yǎng)基能夠支持目標(biāo)微生物的生長(zhǎng)。牛心湯肉湯培養(yǎng)基因其全的營(yíng)養(yǎng)成分和廣的適用性,成為微生物實(shí)驗(yàn)室中的常用培養(yǎng)基之一。碎肉肉湯基礎(chǔ)