培養(yǎng)基制備方法與注意事項(xiàng):1、培養(yǎng)基配方選擇同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別。因此，除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法，應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外，一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料，加以比較核對(duì)，再依據(jù)自己的使用目的，加以選用，記錄其來(lái)源。2、培養(yǎng)基制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄，包括培養(yǎng)基名稱，配方及其來(lái)源，和各種成份的牌號(hào)，好終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制備的日期和制備者等，記錄應(yīng)復(fù)制一份，原記錄保存?zhèn)洳椋瑥?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。3、培養(yǎng)基成份稱量培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯(cuò)亂，好好一次完成，不要中斷?？蓪⑴浞街糜诎鴤?cè)，每稱完一種成分即在配方上做出記號(hào)，并將所需稱取的藥品一次取齊，置于左側(cè)，每種稱取完畢后，即移放于右側(cè)。完全稱取完畢后，還應(yīng)進(jìn)行一次檢查?？刂婆囵B(yǎng)基的條件，控制培養(yǎng)基的pH 配制培養(yǎng)基必須根據(jù)微生物的特點(diǎn)調(diào)節(jié)pH。四川培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備：①概述：培養(yǎng)基和試劑的滅菌通常采用濕熱滅菌或過(guò)濾滅菌。有些培養(yǎng)基無(wú)需高壓滅菌,可煮滅菌。如，含亮綠的腸道菌培養(yǎng)基對(duì)光和熱特別敏感，應(yīng)在煮沸后快速冷卻，避光保存。同樣，一些試劑則不需要滅菌，直接使用(參見(jiàn)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)或生產(chǎn)廠商的使用說(shuō)明）。②濕熱滅菌;p濕熱滅菌在高壓鍋或培養(yǎng)基制備器中進(jìn)行。高壓霉菌一般采用121℃±3℃霉菌15min。如果培養(yǎng)基的體積超過(guò)1000mL，要對(duì)滅菌條件進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。所有操作均要按照標(biāo)準(zhǔn)和使用說(shuō)明的規(guī)定進(jìn)行。注：大容量培養(yǎng)基（＞1000mL）滅菌時(shí)可能會(huì)造成過(guò)度加熱。加熱后應(yīng)采取適當(dāng)?shù)姆绞嚼鋮s，防止沸溢。這對(duì)大容量培養(yǎng)基和敏感性培養(yǎng)基（如含亮綠的培養(yǎng)基）是非常重要的。天津培養(yǎng)基制備器品牌分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒，以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。

利用三角培養(yǎng)瓶制備培養(yǎng)基：包扎，分裝好后，塞上棉塞，在用牛皮紙將棉塞包裹好，防止滅菌時(shí)水份進(jìn)入把棉塞弄濕。滅菌，按配方上要求的溫度、壓力進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高，營(yíng)養(yǎng)成分會(huì)被破壞，培養(yǎng)基中的糖、氨基酸會(huì)使培養(yǎng)基的顏色變深。擺斜面，滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放，使其凝固成為一個(gè)斜面，約占試管長(zhǎng)度的1/2。貯存，培養(yǎng)基在30℃下放置，無(wú)污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。培養(yǎng)基是細(xì)胞生長(zhǎng)的必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，利用三角培養(yǎng)瓶制備培養(yǎng)基可按照以上步驟操作，在使用前需確保培養(yǎng)基的無(wú)菌性，以免影響細(xì)胞正常繁殖。

微生物限度:細(xì)胞培養(yǎng)基不是無(wú)菌產(chǎn)品，其中的微生物在一定條件下會(huì)吸收細(xì)胞培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)滋生繁殖，導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)基變質(zhì)失效。控制細(xì)胞培養(yǎng)基中細(xì)菌和霉菌，是延長(zhǎng)細(xì)胞培養(yǎng)基有效期的方法之一。清大天一在參考《中華人民當(dāng)?shù)厮幍洹?005版二部附錄第100頁(yè)的口服給藥制劑的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)，并嚴(yán)于該標(biāo)準(zhǔn)，規(guī)定細(xì)胞培養(yǎng)基產(chǎn)品的細(xì)菌數(shù)每1g不得超過(guò)200個(gè)，霉菌數(shù)每1g不得超過(guò)50個(gè)。稱取樣品1g，加入無(wú)菌純化水10mL溶解，混勻即得試樣。按中華人民當(dāng)?shù)厮幍?005年版二部附錄ⅪJ微生物限度檢查法進(jìn)行，檢查項(xiàng)目為細(xì)菌數(shù)、霉菌數(shù)。檢查法采用平皿法。培養(yǎng)基制備器外控高低電平控制啟停，正反，簡(jiǎn)易分裝，光耦隔離；外控模擬量調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速。

培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備：1.pH的測(cè)定和調(diào)整：用pH計(jì)測(cè)定pH,必要時(shí)在滅菌前調(diào)節(jié)pH，除特殊說(shuō)明外,培養(yǎng)基滅菌后冷卻至25℃時(shí),要求pH的變化不超過(guò)0.2pH單位.通常使用濃度約為40g/L(約1mol/L)的氫氧化鈉溶液或濃度約為36.5g/L（約1mol/L)的鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH。如果滅菌后調(diào)節(jié)pH，溶液需滅菌。注:商品化培養(yǎng)基在高壓滅菌前后pH可能發(fā)生明顯變化,但使用蒸餾水或去離子水時(shí),滅菌前無(wú)需調(diào)節(jié)pH。2.分裝：將配置好的培養(yǎng)基分裝到適當(dāng)?shù)娜萜髦?，容器的體積至少為體積的1.2倍。培養(yǎng)基制備器滅菌之后保持的溫度是可以預(yù)設(shè)的。殺菌劑裝入口寬大，并附有保險(xiǎn)鎖。天津培養(yǎng)基制備器哪個(gè)品牌好

全自動(dòng)培養(yǎng)基制備儀主要特點(diǎn)：水蒸氣高溫滅菌，保證整個(gè)制備過(guò)程在無(wú)菌下進(jìn)行。四川培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基的質(zhì)量測(cè)試：每批培養(yǎng)基制備好以后，應(yīng)仔細(xì)檢查一遍，如發(fā)現(xiàn)破裂、水分浸入、色澤異常、棉塞被培養(yǎng)基沾染等、均應(yīng)挑出棄去。并測(cè)定其較終pH.將全部培養(yǎng)基放入36±1°C恒溫箱培養(yǎng)過(guò)夜，如發(fā)現(xiàn)有菌生長(zhǎng)，即棄去。用有關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)菌株接種1~2管或瓶培養(yǎng)基，培養(yǎng)24~48小時(shí)，如無(wú)菌生長(zhǎng)或生長(zhǎng)不好。應(yīng)追查原因并重復(fù)接種一次，如結(jié)果仍同前，則該批培養(yǎng)基即應(yīng)棄去，不能使用。培養(yǎng)基的保存：培養(yǎng)基應(yīng)存放于冷暗處，較好能放于普通冰箱內(nèi)。放置時(shí)間不宜超過(guò)一周，傾注的平板培養(yǎng)基不宜超過(guò)3天。每批培養(yǎng)基均必須附有該批培養(yǎng)基制備記錄副頁(yè)或明顯標(biāo)簽。四川培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器

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