培養(yǎng)基的稱量和溶解：小心稱量所需量的脫水合成培養(yǎng)基（必要時(shí)佩戴口罩或在通風(fēng)柜中操作，以防吸入含有有毒物質(zhì)的培養(yǎng)基粉末），先加入適量的水，充分混合（注意避免培養(yǎng)基結(jié)塊），然后加水至所需的量后適當(dāng)加熱，并重復(fù)或連續(xù)攪拌使其快速分散，必要時(shí)應(yīng)完全溶解。含瓊脂的培養(yǎng)基在加熱前應(yīng)浸泡幾分鐘。注意：培養(yǎng)基的加熱溶解或高溫滅菌盛放使用的容器不得為銅鍋或鐵鍋，以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中，使細(xì)菌不易生長(zhǎng)。較好使用不銹鋼鍋加熱溶化，可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時(shí)、可先用溫水加熱并隨時(shí)攪動(dòng)、以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用，應(yīng)重新制備。低滲溶液則使細(xì)胞吸水膨脹易破裂，因此，配制培養(yǎng)基時(shí)要掌握營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度。上海大容量 培養(yǎng)基制備儀

含瓊脂的培養(yǎng)基有時(shí)在平板上不凝固或凝固不好問題：在此種情況下，建議對(duì)于需要高壓滅菌的培養(yǎng)基,倒入平板前先搖一搖。主要是瓊脂培養(yǎng)基的分子量比較大，在冷卻過程中容易沉淀到底，造成瓊脂不能均勻分布。對(duì)于無需高壓滅菌的培養(yǎng)基，不能直接煮沸溶解后倒入平板、需要重復(fù)三至五次煮沸溶解過程，因一次無法保證瓊脂完全溶解。微生物培養(yǎng)基成分中含有染料或指示劑；不同批次的粉狀培養(yǎng)基含水量不同。一般要求≤6。含水量越高，顏色越深；研磨時(shí)間越長(zhǎng)，顏色越深等三個(gè)原因。全自動(dòng)培養(yǎng)基制備儀液體培養(yǎng)基，80%～90%是水，其中配有可溶性的或不溶性的營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基。

培養(yǎng)基的制備原則和要求：培養(yǎng)基是根據(jù)各類微生物生長(zhǎng)繁殖的需要，用人工方法把多種物質(zhì)混合而成的營(yíng)養(yǎng)物。一般用來分離、培養(yǎng)菌類。常用的培養(yǎng)基有基礎(chǔ)培養(yǎng)基、增菌培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基和厭氧培養(yǎng)基。在制備培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)掌握如下原則和要求：(一)培養(yǎng)基必須含有細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。所用的化學(xué)藥品必須純凈，稱取的份量務(wù)必準(zhǔn)確。(二)培養(yǎng)基的酸堿度應(yīng)符合細(xì)菌生長(zhǎng)要求。按各種培養(yǎng)基要求準(zhǔn)確測(cè)定調(diào)節(jié)pH值。多數(shù)細(xì)菌生長(zhǎng)的適宜pH值為7.2～7.6，呈弱堿性。

消毒與滅菌的區(qū)別：消毒指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法單殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。消毒方法常用煮沸消毒法，巴氏消毒法（對(duì)于一些不耐高溫的液體）還有化學(xué)藥劑（如酒精、氯氣、石炭酸等）消毒、紫外線消毒。滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。滅菌方法：①接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法；②玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法，所用器械是干熱滅菌箱；③培養(yǎng)基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法，所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋。④表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法，所用器械是紫外燈。有的培養(yǎng)基還含有素和色素，用于單種微生物培養(yǎng)和鑒定。

配制培養(yǎng)基需要哪些制備：（1）稱出規(guī)定數(shù)量的瓊脂和蔗糖，加水直到培養(yǎng)基較終容積的34，加熱溶解，完全融解后的溶液是透明的。在配制液體培養(yǎng)基（不加瓊脂）時(shí)無需加熱。（2）按需要加入一定量的各種貯存母液，包括生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)和其他特殊附加物。吸取母液要使用專一的移液管。如有必要，培養(yǎng)基中所需的維生素，可在高壓滅菌之后通過減壓過濾裝置或微孔過濾器滅菌后再加入。（3）蒸餾水定容。充分混合后調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，一般以5.66.0為好。（4）培養(yǎng)基分裝，分裝量一般以占培養(yǎng)容器的1514為宜。之后在24h內(nèi)完成高壓滅菌，也可以高壓滅菌后再進(jìn)行培養(yǎng)基的無菌分裝，室溫下存放備用。暫時(shí)不用的培養(yǎng)基應(yīng)放置于10攝氏度下保存，而含有生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)的培養(yǎng)基在45攝氏度保存更佳。培養(yǎng)基，是指供給微生物、植物或動(dòng)物生長(zhǎng)繁殖的，由不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。上海瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備儀

培養(yǎng)基配成后一般需測(cè)試并調(diào)節(jié)pH，還須進(jìn)行滅菌，通常有高溫滅菌和過濾滅菌。上海大容量 培養(yǎng)基制備儀

微生物發(fā)酵培養(yǎng)基配制注意事項(xiàng)：①養(yǎng)分濃度和配比合適：微生物只有在培養(yǎng)基中養(yǎng)分濃度合適的情況下才能生長(zhǎng)良好是合適的。當(dāng)養(yǎng)分濃度過低時(shí)，不能滿足微生物正常生長(zhǎng)的需要。②微生物培養(yǎng)基pH條件控制：培養(yǎng)基的pH必須控制在一定范圍內(nèi)，以滿足不同種類微生物的生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝物。各種微生物生長(zhǎng)繁殖或代謝產(chǎn)物產(chǎn)生的較佳pH條件不同。通常細(xì)菌和放線菌適合在7~7.5pH范圍內(nèi)生長(zhǎng)，酵母菌和霉菌一般在4.5~6pH范圍內(nèi)生長(zhǎng)。③微生物培養(yǎng)基原料來源選擇：培養(yǎng)基配制時(shí)，應(yīng)盡可能使用低廉易得的原料作為培養(yǎng)基成分。尤其在發(fā)酵行業(yè)，培養(yǎng)基用量大，使用成本較低原料實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品附加價(jià)值。例如在微生物單細(xì)胞蛋白的工業(yè)化生產(chǎn)過程中，制糖業(yè)含蔗糖廢液、乳業(yè)含乳糖廢液、大豆廢液工業(yè)和黑色廢物、造紙工業(yè)中含有戊糖和己糖的亞硫酸鹽紙漿等經(jīng)常被作為培養(yǎng)基原料使用。④成品培養(yǎng)基滅菌處理、為了獲得微生物的純培養(yǎng)物，必須避免被細(xì)菌污染，所以對(duì)使用的設(shè)備和工作場(chǎng)所進(jìn)行消毒和消毒。對(duì)于微生物培養(yǎng)基要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理。上海大容量 培養(yǎng)基制備儀

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