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甘肅培養(yǎng)基制備器定制

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-07-18

固體斜面培養(yǎng)基配制:培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細(xì)菌不易生長(zhǎng)。較好使用不銹鋼萵加熱溶化,可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時(shí)、可先用溫水加熱并隨時(shí)擾動(dòng)、以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,應(yīng)重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化,迄至煮沸。如為瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中,因蒸發(fā)而丟失的水分,較后必須加以補(bǔ)足。培養(yǎng)基pH的初步調(diào)正:因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會(huì)有所變化,培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應(yīng)進(jìn)行PH的初步調(diào)正。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時(shí),分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當(dāng)。甘肅培養(yǎng)基制備器定制

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血清培養(yǎng)基主要問題:血清含一些對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性的物質(zhì),如多胺氧化酶,能與來自高度繁殖細(xì)胞的多胺反應(yīng)(如精胺、亞精胺)形成有細(xì)胞毒性作用的聚精胺。補(bǔ)體、抗體、細(xì)菌有毒的等都會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),甚至造成細(xì)胞死亡。動(dòng)物個(gè)體不同,血清產(chǎn)地、批號(hào)不同,每批質(zhì)量差異甚大,其成分不能保持一致。取材中可能帶入支原體、病毒,對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生潛在影響,可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗或?qū)嶒?yàn)結(jié)果不可靠性。大規(guī)模生產(chǎn)中,血清來源越來越困難,價(jià)格昂貴,是構(gòu)成動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)生產(chǎn)成本的主要部分之一。吉林培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基成份的混合與溶化:培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。

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培養(yǎng)基的脫氣:必要時(shí),在使用前將養(yǎng)基放到沸水浴或蒸汽浴中加熱15min,加熱時(shí)松開容器蓋子;加熱后蓋緊蓋子,并迅速冷卻至使用溫度。3.添加成分的加入:對(duì)熱不穩(wěn)定的添加成分應(yīng)在培養(yǎng)基冷卻至47℃~50℃時(shí)加入,滅菌的添加成分加入前應(yīng)冷卻至室溫,避免冷的液體會(huì)造成瓊脂凝膠或形成片狀物。4.培養(yǎng)基的棄置:所有污染和未使用的培養(yǎng)基的棄置應(yīng)采用安全的方式,并符合相關(guān)法律法規(guī)的規(guī)定。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時(shí)滅菌,以為測(cè)定該批培養(yǎng)基較終pH之用。

平板的制備和儲(chǔ)存:傾注融化的培養(yǎng)基到平皿中,使之在平皿中形成厚度至少為3mm(直徑90mm的平皿,通常要加入18mL?20mL瓊脂培養(yǎng)基)。將平皿蓋好皿蓋后放到水平平面使瓊脂冷卻凝固。如果平板需儲(chǔ)存,或者培養(yǎng)時(shí)間超過48h或培養(yǎng)溫度高于40℃,則需要傾注更多的培養(yǎng)基。凝固后的培養(yǎng)基應(yīng)立即使用或存放于暗處和(或)5±3℃冰箱的密封袋中,以防止培養(yǎng)基成分的改變。在平板底部或側(cè)邊做好標(biāo)記,標(biāo)記的內(nèi)容包括名稱、制備日期和(或)有效期。也可使用適宜的培養(yǎng)基編碼系統(tǒng)進(jìn)行標(biāo)記。將倒好的平板放在密封的袋子中冷藏保存可延長(zhǎng)儲(chǔ)存期限。為了避免冷凝水的產(chǎn)生,平板應(yīng)冷卻后再裝入袋中。儲(chǔ)存前不要對(duì)培養(yǎng)基表面進(jìn)行干燥處理。對(duì)于采用表面接種形式培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基,應(yīng)先對(duì)瓊脂表面進(jìn)行干燥:揭開平皿蓋,將平板倒扣于烘箱或培養(yǎng)箱中(溫度設(shè)為25~50℃);或放在有對(duì)流的無菌凈化臺(tái)中,直到培養(yǎng)基表面的水滴消失為止。注意不要過度干燥。商品化的平板瓊脂培養(yǎng)基應(yīng)按照廠商提供的說明使用。培養(yǎng)基制備器應(yīng)存放于冷暗處,較好能放于普通冰箱內(nèi)。

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培養(yǎng)平板培養(yǎng)基是被用于獲得微生物純培養(yǎng)的很常用的固體培養(yǎng)基形式,它是冷卻凝固后的固體培養(yǎng)基在無菌培養(yǎng)皿中形成的培養(yǎng)基固體平面,常被簡(jiǎn)稱為培養(yǎng)平板。也叫平面培養(yǎng)基、平皿培養(yǎng)基。平板培養(yǎng)基常用于單孢分離,測(cè)定菌絲生長(zhǎng)速度,觀察菌落的形態(tài),拮抗實(shí)驗(yàn),測(cè)定接種空間雜菌數(shù)。平板培養(yǎng)基制作方法如下:將培養(yǎng)皿洗凈、干燥,使各培養(yǎng)皿蓋方向一致,用牛皮紙包好,或放入特制鐵罐內(nèi),注明皿蓋的方向。高壓滅菌或干燥滅菌后備用。取剛滅菌后尚未凝固的培養(yǎng)基置于無菌箱或超凈工作臺(tái)內(nèi),先左手持三角瓶,右手反轉(zhuǎn)手掌用中指和無名指撥出棉塞或硅膠賽(或不翻轉(zhuǎn)手掌用小指和手掌撥出棉塞),同時(shí)將三角瓶轉(zhuǎn)換至右手,而后左手拿平皿,以大拇指和中指將皿蓋打開一縫,至瓶口剛好伸人。三角瓶口經(jīng)火焰燒灼后,傾入滅菌或溶化、冷卻至55~60°C的培養(yǎng)基約15mL(勿使瓶口靠在平皿壁上,以免沾染皿壁),迅速蓋好皿蓋,置于桌上輕輕旋轉(zhuǎn)平皿,使培養(yǎng)基均勻分布于整個(gè)平皿底部,冷凝后即為平板培養(yǎng)基。有時(shí)凝固后的培養(yǎng)基表面有冷凝水,可將平皿蓋打開倒置于37℃溫箱,除去冷凝水,否則將影響平板分離培養(yǎng)效果。為防止冷凝水過多,也可將培養(yǎng)基冷卻至45~50°C再倒平板。培養(yǎng)基制備器完全滅菌后用于單種微生物培養(yǎng)和鑒定,一般都是在無菌狀態(tài)下儲(chǔ)存,定量使用的。重慶培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基制備器功能強(qiáng)大的加熱器,能夠迅速加熱。甘肅培養(yǎng)基制備器定制

培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備:正確制備培養(yǎng)基時(shí)微生物檢驗(yàn)的較基礎(chǔ)步驟之一。使用脫水培養(yǎng)基和其他成分,尤其是含有有毒物質(zhì)(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時(shí),應(yīng)遵守良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范和生產(chǎn)廠商提供的使用說明。培養(yǎng)基的不正確制備會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基出現(xiàn)質(zhì)量問題。使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)嚴(yán)格按照廠商提供的使用說明配置。記錄所有相關(guān)數(shù)據(jù),如質(zhì)量/體積、pH、制備日期、滅菌條件和制備人員等。使用各別成分制備培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)按照配方準(zhǔn)確配制,記錄所有細(xì)節(jié)信息,如;培養(yǎng)基名稱和類型及試劑級(jí)別、每個(gè)成分物質(zhì)含量、制造商、批號(hào)、pH、培養(yǎng)基體積(分裝體積)、無菌措施(包括實(shí)施的方式、溫度及時(shí)間)、配置日期、人員等,以便潮源。甘肅培養(yǎng)基制備器定制

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