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山東瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器

來源: 發(fā)布時間:2023-12-12

三角培養(yǎng)瓶是細胞培養(yǎng)中的常用耗材,也可用于培養(yǎng)基的配制、混合及儲存。利用三角培養(yǎng)瓶制備培養(yǎng)基可以按照以下步驟操作:配料:配方換算→在容器中加入少量水(蒸餾水,自然水)→按照配方稱取各種藥品(依次加入)→加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。溶解:淀粉溶解:少量冷水調(diào)成糊狀。加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。調(diào)PH:用1N的鹽酸或1N的NaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。過濾:濾紙或棉花進行過濾。分裝:一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。三角培養(yǎng)瓶:若作靜置培養(yǎng),則100ml培養(yǎng)基/250ml的三角培養(yǎng)瓶,很多不能超過150ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,否則滅菌時培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養(yǎng),則15-20ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。試管分裝:液體培養(yǎng)基一般裝4-5ml,約試管的1/4高度;固體斜面培養(yǎng)基一般裝3-4ml,約試管的1/5高度。在配制培養(yǎng)基時應(yīng)盡量利用廉價且易于獲得的原料作為培養(yǎng)基成分。山東瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器

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培養(yǎng)基制備基本方法:培養(yǎng)基配方的選定,同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應(yīng)嚴格按其規(guī)定進行配制外,一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料,加以比較核對,再依據(jù)自己的使用目的加以選用,記錄其來源。培養(yǎng)基pH的初步調(diào)整,培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應(yīng)進行pH的初步調(diào)正,因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,例如,牛肉浸液約可降低pH0.2。而腸浸液pH卻會有明顯的升高。因此,對這個步驟,操作者應(yīng)隨時注意探索經(jīng)驗、以期能掌握培養(yǎng)基的很終pH,保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。pH調(diào)正后,還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘,以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。中國香港自動攪拌培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基制備器微生物細胞組成元素的調(diào)查或分析,是設(shè)計培養(yǎng)基時的重要參考依據(jù)。

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液體培養(yǎng)基:為確定液體培養(yǎng)基的生長率,應(yīng)接種適當?shù)呐囵B(yǎng)物。下面介紹的是用定量、半定量和定性方法評估生長率和選擇性的方法。所推薦的這些方法都是通過將液體培養(yǎng)基以傾注或劃線方式接種到瓊脂平板上培養(yǎng)后,計數(shù)或計算液體培養(yǎng)基分數(shù)而得出其生長數(shù)量的。對于液體培養(yǎng)基定性測試方法,則通過肉眼觀察來實現(xiàn)。目標菌和非目標菌的定量稀釋法步驟如下:選擇液體培養(yǎng)基10mL/管待檢。接種目標菌:將少量測試菌株培養(yǎng)物(每管10CFU~100CFU)接種測試肉湯和標準肉湯,混勻。接種非目標菌:將大量測試菌株培養(yǎng)物(每管大于1000CFU)接種測試肉湯和標準肉湯,混勻。

培養(yǎng)基的分裝:培養(yǎng)基的分裝,應(yīng)按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當容器內(nèi)。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時好好能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時,分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當。分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒,以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時滅菌,以為測定該批培養(yǎng)基好終pH之用。培養(yǎng)基制備器滅菌鍋關(guān)閉放氣閥前,將鍋內(nèi)氣體排干凈。

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微生物檢驗培養(yǎng)基制備的要點:培養(yǎng)基分裝,準備好的中.海培養(yǎng)基根據(jù)用途不同分為燒瓶、試管等容器,分裝試管量大采用自動分液器,分裝試管量小,可以用漏斗分液。分液量不超過容器體積的三分之二。三角瓶不要超過體積的二分之一;瓊脂斜面不要超過試管長度的五分之一。滅菌后斜面應(yīng)為培養(yǎng)基量的三分之一,底層應(yīng)為培養(yǎng)基量的三分之二;半固態(tài)瓊脂的體積為三分之一;用于接種或保護細菌的高級瓊脂,分裝試管長度的三分之一和四分之一,接種厭氧菌的量應(yīng)達到三分之二;瓊脂平板90毫米內(nèi)徑13~15毫升,內(nèi)徑70毫米8~10毫升。如果瓊脂平板表面較水,可將平板倒置,置于37℃培養(yǎng)箱中三十分鐘,晾干后使用。每批培養(yǎng)基分裝在二十毫升左右的小玻璃瓶中,與該批培養(yǎng)基同時滅菌,在以確定這批培養(yǎng)基的很終pH值。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法,濾紙應(yīng)拆疊成折扇成漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。中國香港自動攪拌培養(yǎng)基制備器

固體培養(yǎng)基根據(jù)性質(zhì)又分為固化培養(yǎng)基、非可逆性固化培養(yǎng)基、天然固態(tài)培養(yǎng)基、濾膜。山東瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器

制備的方法和注意事項:1培養(yǎng)基配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應(yīng)嚴格按其規(guī)定進行配制外,一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料,加以比較核對,再依據(jù)自己的使用目的,加以選用,記錄其來源。2培養(yǎng)基的制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄,包括培養(yǎng)基名稱,配方及其來源,和各種成份的牌號,好終pH值、消毒的溫度和時間制備的日期和制備者等,記錄應(yīng)復(fù)制一份,原記錄保存?zhèn)洳?,?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。山東瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器