高通量篩選的特色效用高通量篩選技術是將多種技術方法有機結合而形成的一種新技術體系,它以微板形式作為實驗工具載體,以自動化操作系統(tǒng)執(zhí)行實驗過程,以靈敏快速的檢測儀器采集實驗數(shù)據(jù),以計算機對數(shù)以千計的樣品數(shù)據(jù)進行分析處理,從而得出科學準確的實驗結果和特色效用。英國學者AlanD研究提示,一個實驗室采用傳統(tǒng)的方法,借助20余種藥物作用靶位,1年內(nèi)能篩選75000個樣品;1997年高通量篩選技術發(fā)展初期,采用100余種靶位,每年可篩選100萬個樣品;1999年高通量篩選技術進一步完善后,每天的篩選量就高達10萬種化合物。高通量篩選技術的方法有哪些。江西高通量篩選分子庫
高通量篩選技術,是目前藥物篩選領域研究的重要課題,近年來,對它的研究應用雖然已取得了長足的發(fā)展,但仍然存在許多難題,如體外模型的篩選結果與整體藥理作用的關系;對高通量篩選模型的評價標準以及新的藥物作用靶點的研究和發(fā)現(xiàn)等。隨著醫(yī)藥學的進步,高通量篩選技術在創(chuàng)新藥物的研發(fā)中,一定會開拓出更廣闊的空間。多學科理論和技術的結合 在高通量篩選過程中,不僅應用了普通的藥理學技術和理論,而且與藥物化學、分子生物學、細胞生物學、數(shù)學、微生物學、計算機科學等多學科緊密結合。這種多學科的有機結合,在藥物篩選領域產(chǎn)生大量新的課題和發(fā)展機會,促進了藥物篩選理論和技術的發(fā)展。江西高通量篩選分子庫高通量篩選的具備條件。
細胞活力的測定常用于藥物篩選。一種常見且可靠的活力測定為使用熒光素酶催化底物(熒光素)氧化,在ATP依賴性反應中產(chǎn)光來測量ATP含量。我們也常使用如釕、阿拉馬爾藍和四氮唑類化合物(MTT、MTS、XTT和WST-1)等染料通過測定熒光或顏色的變化來測定細胞活力。此外,細胞活力也可以通過細胞內(nèi)酶(蛋白酶、LDH)在培養(yǎng)基中的釋放或通過將不透膜的熒光染料插入DNA(如碘化丙啶)來評估,也可以使用膜滲透性DNA染料對細胞進行計數(shù)。細胞活力測定。
高通量篩選是藥物研發(fā)的一個重要手段,然而研究中發(fā)現(xiàn)一些化合物在不同類型靶點篩選中均表現(xiàn)出陽性結果,這類化合物稱為“頻繁命中化合物”(Frequent hitters)。根據(jù)篩選結果的有效性,頻繁命中化合物可以大致分為兩類,一是能與許多不同類型靶點成鍵結合的混亂化合物(Promiscuous compound);二是通過干擾實驗條件而在多個實驗中呈現(xiàn)出陽性結果的假陽性化合物(False positive)。雖然混亂化合物可能成為多藥理作用的研究起點,但考慮其低選擇性容易與其他蛋白發(fā)生反應從而導致潛在的毒副作用,因此這類化合物通常不作為新藥物研發(fā)的優(yōu)先;而假陽性化合物產(chǎn)生機制較為復雜,根據(jù)現(xiàn)有的研究主要可以分為:膠體聚集化合物、自熒光化合物、熒光酶抑制劑和化學易反應化合物。細胞高通量篩選技術。
高通量篩選技術,是目前藥物篩選領域研究的重要課題,近年來,對它的研究應用雖然已取得了長足的發(fā)展,但仍然存在許多難題,如體外模型的篩選結果與整體藥理作用的關系;對高通量篩選模型的評價標準以及新的藥物作用靶點的研究和發(fā)現(xiàn)等。隨著醫(yī)藥學的進步,高通量篩選技術在創(chuàng)新藥物的研發(fā)中,一定會開拓出更廣闊的空間。高通量篩選時每天要對數(shù)以千萬的樣品進行檢測,工作枯燥,步驟單一,操作人員容易疲勞、出錯。自動化操作系統(tǒng)由計算機及其操作軟件、自動化加樣設備、溫孵離心設備和堆棧4個部分組成。自動化操作系統(tǒng)代替人工操作顯然有諸多優(yōu)勢,它利用計算機通過操作軟件控制整個實驗過程,編程過程簡潔明了。全自動高通量篩選工作站。江西高通量篩選分子庫
高通量篩選技術的靶點是。江西高通量篩選分子庫
高通量篩選(Highthroughputscreening,HTS)技術包括機器人技術、液體處理器、數(shù)據(jù)處理、相當多的軟件和敏感的檢測系統(tǒng)。它是一種藥物發(fā)現(xiàn)過程,可以使生化或細胞事件能夠重復和快速測試化合物數(shù)十萬次。HTS可根據(jù)待測樣品的種類大致分為細胞水平篩選和分子水平篩選兩類。細胞水平篩選是在細胞個體水平上完成的檢測,由于含有諸如信號傳導、物質(zhì)代謝等關于細胞生命活動的信息,因此可以省去體外篩選中的許多步驟。下面將圍繞細胞水平篩選介紹幾種常用的檢測方法:離子通道檢測、報告基因檢測和細胞增殖檢測。江西高通量篩選分子庫