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陜西酶高通量篩選

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-08-05

環(huán)特生物是一家以斑馬魚(yú)生物技術(shù)應(yīng)用為的國(guó)家高新生物科技企業(yè)。作為行業(yè)獨(dú)一家同時(shí)獲得國(guó)家CNAS認(rèn)可、CMA資質(zhì)認(rèn)定、AAALAC國(guó)際實(shí)驗(yàn)動(dòng)物認(rèn)證的斑馬魚(yú)科技公司,多項(xiàng)技術(shù)成果先后榮獲德國(guó)紐倫堡國(guó)際發(fā)明金獎(jiǎng)、英國(guó)國(guó)際發(fā)明展金獎(jiǎng)及杰出創(chuàng)新獎(jiǎng)和中國(guó)發(fā)明協(xié)會(huì)發(fā)明創(chuàng)業(yè)獎(jiǎng)項(xiàng)目獎(jiǎng)金獎(jiǎng)等多項(xiàng)發(fā)明類國(guó)內(nèi)外大獎(jiǎng)。環(huán)特高通量篩選技術(shù)支持化合物篩選、新藥篩選、中藥篩選、藥物有效成分篩選、活性成分篩選、動(dòng)物模型篩選藥物、藥物毒性篩選、菌株菌種高通量篩選和抑制劑篩選等各類需求。如何實(shí)現(xiàn)快速高通量篩選。陜西酶高通量篩選

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然而傳統(tǒng)的針對(duì)單一靶點(diǎn)的研究方法已經(jīng)難以適應(yīng)一些多基因疾病和病毒等相關(guān)藥物的研究。而基于細(xì)胞水平的高內(nèi)涵篩選(high content screening, HCS)技術(shù)實(shí)現(xiàn)了對(duì)化合物多靶點(diǎn)多參數(shù)的同時(shí)檢測(cè),從疾病相關(guān)基因調(diào)控通路和網(wǎng)絡(luò)水平上研究藥物的作用機(jī)制、代謝途徑和潛在毒性等,也使在細(xì)胞水平評(píng)價(jià)活性化合物的成成為可能。從篩選載體上看,HCS和HTS并沒(méi)有的區(qū)別,它的檢測(cè)體積并未因檢測(cè)指標(biāo)增加而增高,操作步驟同樣簡(jiǎn)單可行、可自動(dòng)化。故HCS在新藥研發(fā)中發(fā)揮越來(lái)越重要的作用。陜西酶高通量篩選高通量篩選的實(shí)驗(yàn)方案。

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細(xì)胞活力的測(cè)定常用于藥物篩選。一種常見(jiàn)且可靠的活力測(cè)定為使用熒光素酶催化底物(熒光素)氧化,在ATP依賴性反應(yīng)中產(chǎn)光來(lái)測(cè)量ATP含量。我們也常使用如釕、阿拉馬爾藍(lán)和四氮唑類化合物(MTT、MTS、XTT和WST-1)等染料通過(guò)測(cè)定熒光或顏色的變化來(lái)測(cè)定細(xì)胞活力。此外,細(xì)胞活力也可以通過(guò)細(xì)胞內(nèi)酶(蛋白酶、LDH)在培養(yǎng)基中的釋放或通過(guò)將不透膜的熒光染料插入DNA(如碘化丙啶)來(lái)評(píng)估,也可以使用膜滲透性DNA染料對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。細(xì)胞活力測(cè)定。

開(kāi)發(fā)一種新藥的過(guò)程可能是漫長(zhǎng)、復(fù)雜和不確定的,但從社會(huì)、科學(xué)和經(jīng)濟(jì)的角度來(lái)看,它也可能是高回報(bào)的。高通量篩選(HTS)已經(jīng)成為藥物發(fā)現(xiàn)的主要工具。,向大家介紹目前用于靶標(biāo)確認(rèn)的幾種HTS方法,主要分為兩大類:生化水平和細(xì)胞水平。生化水平分析包括比率熒光法(FA/FP)、熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)、時(shí)間分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移(TR-FRET)等;細(xì)胞水平的分析包括細(xì)胞活力、報(bào)告基因、第二信使和高內(nèi)涵成像等。生化篩選利用純化的目標(biāo)蛋白,在體外測(cè)定配體的結(jié)合或酶活性的抑制。這些檢測(cè)通常在384孔板中以競(jìng)爭(zhēng)的形式進(jìn)行,其中所研究的化合物必須取代已知的配體或底物。高通量篩選的常見(jiàn)問(wèn)題。

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斑馬魚(yú)胚胎發(fā)育速度快,其1天生長(zhǎng)相當(dāng)于鼠類8~10天,實(shí)驗(yàn)周期大幅縮短,效率更高?;蛳嗨贫扰c人體達(dá)87%,與人體對(duì)應(yīng)性強(qiáng),雌魚(yú)單次產(chǎn)卵超200枚,樣本量大、個(gè)體差異小,結(jié)果更可靠。斑馬魚(yú)實(shí)驗(yàn)用樣量為小鼠的1/1000~1/100,加之實(shí)驗(yàn)效率大幅提升后,帶來(lái)極具吸引力的成本優(yōu)勢(shì)。方案設(shè)計(jì)靈活,可定制化程度高,能滿足不同樣品數(shù)量和實(shí)驗(yàn)?zāi)康男枨?。環(huán)特生物是一家以斑馬魚(yú)生物技術(shù)應(yīng)用為的國(guó)家高新生物科技企業(yè)。作為行業(yè)獨(dú)一家同時(shí)獲得國(guó)家CNAS認(rèn)可、CMA資質(zhì)認(rèn)定、AAALAC國(guó)際實(shí)驗(yàn)動(dòng)物認(rèn)證的斑馬魚(yú)科技公司,多項(xiàng)技術(shù)成果先后榮獲德國(guó)紐倫堡國(guó)際發(fā)明金獎(jiǎng)、英國(guó)國(guó)際發(fā)明展金獎(jiǎng)及杰出創(chuàng)新獎(jiǎng)和中國(guó)發(fā)明協(xié)會(huì)發(fā)明創(chuàng)業(yè)獎(jiǎng)項(xiàng)目獎(jiǎng)金獎(jiǎng)等多項(xiàng)發(fā)明類國(guó)內(nèi)外大獎(jiǎng)。高通量篩選方法有哪些。陜西酶高通量篩選

高通量篩選技術(shù)的方法有哪些。陜西酶高通量篩選

高通量篩選是藥物研發(fā)的一個(gè)重要手段,然而研究中發(fā)現(xiàn)一些化合物在不同類型靶點(diǎn)篩選中均表現(xiàn)出陽(yáng)性結(jié)果,這類化合物稱為“頻繁命中化合物”(Frequent hitters)。根據(jù)篩選結(jié)果的有效性,頻繁命中化合物可以大致分為兩類,一是能與許多不同類型靶點(diǎn)成鍵結(jié)合的混亂化合物(Promiscuous compound);二是通過(guò)干擾實(shí)驗(yàn)條件而在多個(gè)實(shí)驗(yàn)中呈現(xiàn)出陽(yáng)性結(jié)果的假陽(yáng)性化合物(False positive)。雖然混亂化合物可能成為多藥理作用的研究起點(diǎn),但考慮其低選擇性容易與其他蛋白發(fā)生反應(yīng)從而導(dǎo)致潛在的毒副作用,因此這類化合物通常不作為新藥物研發(fā)的優(yōu)先;而假陽(yáng)性化合物產(chǎn)生機(jī)制較為復(fù)雜,根據(jù)現(xiàn)有的研究主要可以分為:膠體聚集化合物、自熒光化合物、熒光酶抑制劑和化學(xué)易反應(yīng)化合物。陜西酶高通量篩選