細胞內(nèi)鈣離子作為重要的信號分子其作用具有時間性和空間性。當diyi個細胞興奮時,產(chǎn)生了一個電沖動,此時,細胞外的鈣離子流入該細胞內(nèi),促使這個細胞分泌神經(jīng)遞質(zhì),神經(jīng)遞質(zhì)與相鄰的下一級神經(jīng)細胞膜上的蛋白分子結(jié)合,促使這一級神經(jīng)細胞產(chǎn)生新的電沖動。以此類推,神經(jīng)信號便一級一級地傳遞下去,從而構(gòu)成復雜的信號體系,*終形成了學習、記憶等大腦的高級功能。在哺乳動物神經(jīng)系統(tǒng)中,鈣離子同樣扮演著重要的信號分子的角色。鈣成像系統(tǒng)在自由行為動物上對鈣離子動態(tài)進行單細胞分辨率級別的持久成像。寧波inscopix鈣成像聯(lián)系方式
對于成像和長時間成像,較重要的是要保證細胞的正常生長。熒光團受激發(fā)光光照后產(chǎn)生的氧化物質(zhì)與蛋白質(zhì)、核酸和脂肪等發(fā)生反應,熒光信號降低的同時(光致退色)也降低了細胞壽命(光線損傷)。在光照過程中氧化劑的產(chǎn)生,主要決定于熒光團的光化學性質(zhì)和光照劑量,因此減少光照劑量成為解決上述問題的途徑之一。光漂白(Photobleaching)指在光的照射下熒光物質(zhì)所激發(fā)出來的熒光強度隨著時間推移逐步減弱乃至消失的現(xiàn)象。熒光成像的質(zhì)量很大程度上依賴于熒光信號強度,提高激發(fā)光強度固然可以提高信號強度,但激發(fā)光的強度不是可以無限提高的,當激發(fā)光的強度超過一定限度時,光吸收就趨于飽和,并不可逆地破壞激發(fā)態(tài)分子,這就是光漂白現(xiàn)象。在顯微技術(shù)中,光漂白使得觀測變得很復雜,因為它會造成破壞,使螢光團無法繼續(xù)放光,從而干擾實驗結(jié)果。寧波inscopix鈣成像聯(lián)系方式對于鈣離子成像來說,大多數(shù)情況下速度很重要。
鈣成像技術(shù)在許多領(lǐng)域都有廣泛的應用,以下是一些常見的應用場景:1.神經(jīng)科學研究:鈣成像技術(shù)被廣泛應用于研究神經(jīng)元活動和神經(jīng)網(wǎng)絡的功能??梢杂^察神經(jīng)元的鈣離子動態(tài)變化,揭示神經(jīng)元的興奮性和抑制性活動,研究神經(jīng)網(wǎng)絡的連接和信息傳遞。2.細胞信號傳導研究:鈣離子在細胞內(nèi)起著重要的信號傳導作用。鈣成像技術(shù)可以用于研究細胞內(nèi)鈣離子的濃度變化,揭示細胞信號傳導的機制和調(diào)控過程。3.細胞凋亡研究:鈣離子在細胞凋亡過程中扮演重要角色。鈣成像技術(shù)可以用于觀察細胞內(nèi)鈣離子的變化,研究細胞凋亡的啟動和執(zhí)行過程。4.藥理學研究:鈣成像技術(shù)可以用于評估藥物對細胞內(nèi)鈣離子濃度的影響。可以研究藥物的作用機制、藥物的劑量效應關(guān)系等。5.疾病研究:鈣成像技術(shù)可以應用于研究與鈣離子信號傳導相關(guān)的疾病,如神經(jīng)退行性疾病、心血管疾病等。可以揭示疾病發(fā)生及發(fā)展的機制,為疾病的診斷和診療提供依據(jù)??傊}成像技術(shù)在神經(jīng)科學、細胞生物學、藥理學和疾病研究等領(lǐng)域都有廣泛的應用,可以幫助揭示生物過程的機制和疾病的發(fā)生及發(fā)展過程。
鈣是機體的組成元素之一。鈣離子作為電流載體維持細胞內(nèi)外的電化學梯度,同時在細胞的生命活動中扮演著重要角色。作為第二信使,鈣參與細胞周期、細胞代謝、細胞分化、壞死、凋亡等等許多重要的生理過程。細胞內(nèi)的鈣離子水平通常很低,一般胞漿中的自由鈣約為100nM。胞內(nèi)的鈣可被各種亞細胞器所貯存,據(jù)文獻報道:其中約50%位于細胞核,30%位于線粒體,14%位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng),5%位于胞膜上,1%位于胞質(zhì)內(nèi),且因為鈣離子易與磷酸和碳酸復合物形成不溶物,故游離鈣只占[1]。細胞可以通過鈣內(nèi)流、內(nèi)鈣釋放及膜系統(tǒng)上的降鈣蛋白等一整套完整的監(jiān)控系統(tǒng)來維持細胞內(nèi)鈣的內(nèi)穩(wěn)狀態(tài)。例如與鈣內(nèi)流相關(guān)的通道例如電壓門控性鈣離子通道VDCC、受體活躍的通道RACC;與內(nèi)鈣釋放相關(guān)的受體如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的IP3受體;以及降鈣相關(guān)的脂膜及線粒體上的主動運輸?shù)拟}泵系統(tǒng)等等[2]。近20年來鈣的熒光成像及測定技術(shù)發(fā)展迅速,出現(xiàn)了各種各樣的鈣熒光指示劑,結(jié)合不斷發(fā)展的顯微成像系統(tǒng),我們可以對活細胞的鈣離子進行測定及成像,進一步揭示其生理機制及相關(guān)疾病的發(fā)病機制。鈣成像的熒光指示劑鈣成像的熒光探針一般均為Ca2螯合劑EGTA,APTRA,BAPTA的衍生物,它們可以結(jié)合鈣離子從而顯示一個光譜響應。鈣離子在很多生理活動中都發(fā)揮著重要作用。
解決鈣成像裝置對核磁成像的干擾:考慮到金屬對核磁成像的影響,研究人員在核磁共振成像的模塊上裝上了鈣成像模塊,該成像模塊所有的金屬元件全部被更換為非導電塑料。考慮到磁場對光纖記錄系統(tǒng)的干擾,減少鈣信號的噪音,將相干光纖激光器與核磁共振放置相鄰不同的房間。解決鈣成像和核磁成像區(qū)域的一致性:在成像過程中,以皮層區(qū)域的血管分布為參照物,以保證鈣成像和核磁成像的區(qū)域基本保持一致。但在實際成像中,鈣離子變化和血氧水平依賴性信號所響應的區(qū)域并不是完全重合。因此研究人員將響應區(qū)域內(nèi)的信號變化幅度進行均一化,盡量避免因統(tǒng)計閾值引起差異。鈣成像技術(shù)能直接測量神經(jīng)元和神經(jīng)元組織中動態(tài)的鈣流動。寧波inscopix鈣成像價格多少
鈣成像技術(shù)(calcium imaging)是指利用鈣離子指示劑或指示監(jiān)測組織內(nèi)鈣離子濃度的方法。寧波inscopix鈣成像聯(lián)系方式
傳統(tǒng)的寬場熒光顯微鏡由于光散射的影響,只能夠?qū)Υ竽X淺層的神經(jīng)元或在離體組織上進行成像,共聚焦顯微鏡由于光損傷較大,一般也只用于離體鈣成像。隨著熒光顯微鏡技術(shù)的迅速發(fā)展,在體鈣成像技術(shù)得到了蓬勃發(fā)展。雙光子熒光顯微鏡能夠在進行在體成像的時候?qū)崿F(xiàn)高分辨率和高信噪比。例如,用雙光子顯微鏡對海馬樹突棘的鈣離子信號進行成像,研究神經(jīng)元突觸后長時程降低(Wangetal.,2000);觀察在體小鼠運動皮層神經(jīng)元在嗅覺選擇任務中刺激相關(guān)電位(Komiyamaetal.,2010)等等。不過,這些實驗還是需要對動物進行麻醉和固定,而神經(jīng)科學領(lǐng)域很多研究更希望能夠?qū)ψ杂苫顒拥膭游镞M行研究。近年來出現(xiàn)了通過植入性的microscope或microlens進行在體freelymoving動物鈣成像的技術(shù)。使用一端帶有GRINlens的光纖連接顯微鏡和動物大腦,從特定腦區(qū)發(fā)出的熒光信號被光纖收集,然后通過Inscopix顯微鏡成像。動物頭部只需植入GRINlens,方便活動。寧波inscopix鈣成像聯(lián)系方式