細(xì)胞內(nèi)鈣離子作為重要的信號(hào)分子其作用具有時(shí)間性和空間性。當(dāng)神經(jīng)細(xì)胞興奮時(shí),會(huì)產(chǎn)生一個(gè)電沖動(dòng),在此時(shí),細(xì)胞外的鈣離子回流入該細(xì)胞內(nèi),促使這個(gè)細(xì)胞分泌神經(jīng)遞質(zhì),神經(jīng)遞質(zhì)與相鄰的下一級(jí)神經(jīng)細(xì)胞膜上的蛋白分子相結(jié)合,促使這個(gè)一級(jí)神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生新的電沖動(dòng)。以此類(lèi)推,神經(jīng)信號(hào)便一級(jí)一級(jí)地傳遞下去,從而構(gòu)成復(fù)雜的信號(hào)體系,形成了學(xué)習(xí)、記憶等大腦的高級(jí)功能。在哺乳動(dòng)物神經(jīng)系統(tǒng)中,鈣離子同樣扮演著重要的信號(hào)分子的角色。通過(guò)鈣成像技術(shù)發(fā)現(xiàn)神經(jīng)元的活動(dòng)與其內(nèi)部的鈣離子濃度密切相關(guān)。江蘇神經(jīng)細(xì)胞鈣成像動(dòng)物行為學(xué)
近年來(lái)出現(xiàn)了通過(guò)植入性的microscope或microlens進(jìn)行freelymoving動(dòng)物鈣成像的技術(shù)。如光纖成像法:使用一端帶有GRINlens的光纖連接顯微鏡和動(dòng)物大腦,從特定腦區(qū)發(fā)出的熒光信號(hào)被光纖收集,然后通過(guò)相機(jī)成像。動(dòng)物頭部只需植入GRINlens,方便活動(dòng),而且可以同時(shí)植入多個(gè)lens來(lái)觀察不同的腦區(qū)之間的聯(lián)系和相互作用。還有直接植入動(dòng)物大腦的微型熒光顯微鏡,將GRINlens直接植入皮層下的海馬,下丘腦,丘腦等區(qū)域,可以監(jiān)測(cè)深部腦區(qū)的神經(jīng)元活動(dòng)。這種微型顯微鏡的重量只有幾克,不會(huì)影響動(dòng)物自由活動(dòng),可以提供800μm600μm視野和1.50μm橫向分辨率。重慶光遺傳鈣成像聯(lián)系方式鈣信號(hào)發(fā)揮著高度特異性的功能。
解決鈣成像裝置對(duì)核磁成像的干擾:考慮到金屬對(duì)核磁成像的影響,研究人員在核磁共振成像的模塊上裝上了鈣成像模塊,該成像模塊所有的金屬元件全部被更換為非導(dǎo)電塑料??紤]到磁場(chǎng)對(duì)光纖記錄系統(tǒng)的干擾,減少鈣信號(hào)的噪音,將相干光纖激光器與核磁共振放置相鄰不同的房間。解決鈣成像和核磁成像區(qū)域的一致性:在成像過(guò)程中,以皮層區(qū)域的血管分布為參照物,以保證鈣成像和核磁成像的區(qū)域基本保持一致。但在實(shí)際成像中,鈣離子變化和血氧水平依賴(lài)性信號(hào)所響應(yīng)的區(qū)域并不是完全重合。因此研究人員將響應(yīng)區(qū)域內(nèi)的信號(hào)變化幅度進(jìn)行均一化,盡量避免因統(tǒng)計(jì)閾值引起差異。
鈣成像是一種用于觀察和研究細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度變化的技術(shù)。鈣離子在細(xì)胞內(nèi)起著重要的調(diào)節(jié)作用,參與細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞分化等生物過(guò)程。鈣成像技術(shù)通過(guò)使用熒光探針或基因工程技術(shù)將熒光蛋白與鈣離子結(jié)合,使其能夠發(fā)出熒光信號(hào)。當(dāng)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度發(fā)生變化時(shí),熒光信號(hào)的強(qiáng)度也會(huì)相應(yīng)改變,從而可以通過(guò)顯微鏡觀察到鈣離子的動(dòng)態(tài)變化。鈣成像技術(shù)廣泛應(yīng)用于神經(jīng)科學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、藥理學(xué)等領(lǐng)域,有助于揭示鈣離子在生物過(guò)程中的作用機(jī)制。超微顯微鈣成像顯微鏡是研究活動(dòng)動(dòng)物神經(jīng)活動(dòng)必要儀器。
鈣成像技術(shù)通常使用熒光染料或報(bào)告基因來(lái)標(biāo)記細(xì)胞中的鈣離子。當(dāng)細(xì)胞受到外界刺激時(shí),鈣離子會(huì)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),導(dǎo)致熒光染料或報(bào)告基因發(fā)出光信號(hào)。通過(guò)觀察光信號(hào)的強(qiáng)度和分布,可以推斷出鈣離子的濃度和分布情況。鈣成像技術(shù)具有以下優(yōu)點(diǎn):高靈敏度:可以檢測(cè)到細(xì)胞內(nèi)微小的鈣離子濃度變化。實(shí)時(shí)性:可以實(shí)時(shí)記錄鈣離子濃度的變化過(guò)程??臻g分辨率高:可以清晰地觀察到鈣離子在細(xì)胞內(nèi)的分布情況。無(wú)創(chuàng)性:可以通過(guò)huo體成像技術(shù)觀察動(dòng)物體內(nèi)的鈣離子變化情況??芍貜?fù)性:可以對(duì)同一群體細(xì)胞進(jìn)行多次成像,以評(píng)估不同處理或刺激的影響??傊?,鈣成像技術(shù)是一種強(qiáng)大的生物醫(yī)學(xué)研究工具,可以幫助科學(xué)家們更好地了解細(xì)胞生理和病理狀態(tài),為疾病診斷和zhi療提供有力支持。鈣成像系統(tǒng)具有單細(xì)胞分辨率的大視野的特征。江蘇神經(jīng)細(xì)胞鈣成像動(dòng)物行為學(xué)
鈣成像數(shù)據(jù)采集盒擁有 2TB 存儲(chǔ)空間,可選擇以太網(wǎng)或 Wi? 方式連接電腦。江蘇神經(jīng)細(xì)胞鈣成像動(dòng)物行為學(xué)
對(duì)新環(huán)境的探索確保了生存和進(jìn)化的適應(yīng)性,這是通過(guò)根據(jù)經(jīng)驗(yàn)動(dòng)態(tài)變化的探索性回合和逮捕來(lái)表達(dá)的。因此,調(diào)節(jié)探索性行為的神經(jīng)環(huán)路應(yīng)該參與經(jīng)驗(yàn)的整合,并利用它來(lái)選擇適當(dāng)?shù)男袨檩敵?。通過(guò)空間探索分析,研究人員發(fā)現(xiàn)在之前動(dòng)物被逮捕的地點(diǎn),瞬間逮捕數(shù)隨著經(jīng)驗(yàn)的增加而增加。在自由探索的小鼠身上進(jìn)行的Inscopix鈣成像顯示,基底外側(cè)杏仁核中有一個(gè)遺傳和投射定義的神經(jīng)元群,在自我控制的行為停止期間是活躍的。這個(gè)合集是以經(jīng)驗(yàn)依賴(lài)的方式響應(yīng)的,對(duì)這些神經(jīng)元的nVoke閉環(huán)光遺傳操作表明,它們?cè)谔剿鬟^(guò)程中驅(qū)動(dòng)經(jīng)驗(yàn)依賴(lài)的逮捕是充分和必要的。投影特異性成像和光遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)顯示,這些yizhi是由投射到**杏仁核的基底外側(cè)杏仁核神經(jīng)元影響的,揭示了杏仁核環(huán)路,該回路介導(dǎo)了熟悉部位的短暫阻止,但不影響回避或焦慮/恐懼樣行為。江蘇神經(jīng)細(xì)胞鈣成像動(dòng)物行為學(xué)