鈣成像具有以下幾個(gè)優(yōu)勢(shì):1.非侵入性:鈣成像技術(shù)可以在活物細(xì)胞或組織中進(jìn)行觀察,無(wú)需破壞細(xì)胞或組織的完整性,因此是一種非侵入性的技術(shù)。2.高時(shí)空分辨率:鈣成像技術(shù)可以實(shí)時(shí)觀察細(xì)胞內(nèi)鈣離子的動(dòng)態(tài)變化,具有較高的時(shí)空分辨率??梢圆蹲降解}離子濃度的瞬時(shí)變化,揭示細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)的快速過(guò)程。3.多樣性:鈣成像技術(shù)可以使用不同的熒光探針或基因工程技術(shù),實(shí)現(xiàn)對(duì)不同類型的細(xì)胞或組織進(jìn)行鈣成像。可以根據(jù)需要選擇適合的探針或方法,擴(kuò)展應(yīng)用范圍。4.可定量分析:通過(guò)鈣成像技術(shù)可以獲得熒光信號(hào)的強(qiáng)度,可以進(jìn)行定量分析,了解鈣離子濃度的變化程度??梢酝ㄟ^(guò)比較不同條件下的鈣成像結(jié)果,研究因素對(duì)鈣離子信號(hào)的調(diào)控作用。5.可應(yīng)用于多個(gè)領(lǐng)域:鈣成像技術(shù)廣泛應(yīng)用于神經(jīng)科學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、藥理學(xué)等領(lǐng)域??梢匝芯可窠?jīng)元活動(dòng)、細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、細(xì)胞凋亡等生物過(guò)程,有助于揭示生物學(xué)機(jī)制和疾病發(fā)生及發(fā)展的過(guò)程。綜上所述,鈣成像技術(shù)具有非侵入性、高時(shí)空分辨率、多樣性、可定量分析和廣泛應(yīng)用于多個(gè)領(lǐng)域等優(yōu)勢(shì),成為研究細(xì)胞內(nèi)鈣離子動(dòng)態(tài)變化的重要工具。鈣成像系統(tǒng)集成自動(dòng)控制和精確計(jì)時(shí)的多模式輸入端口。南京細(xì)胞鈣離子鈣成像nVoke
利用鈣成像技術(shù)記錄大腦活動(dòng)。隨著功能光學(xué)成像技術(shù)的發(fā)展,神經(jīng)學(xué)家們已經(jīng)可以研究腦區(qū)和神經(jīng)元內(nèi)部的工作情況。功能鈣成像技術(shù)就是其中之一,其主要原理是將外源性熒光信號(hào)和生理現(xiàn)象耦合起來(lái)——通過(guò)熒光染料信號(hào)的改變反映細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度,以此daibiao細(xì)胞的功能狀態(tài)。目前它被廣泛應(yīng)用于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)一群相關(guān)神經(jīng)元內(nèi)鈣離子的變化,從而判斷其功能活動(dòng)。該技術(shù)的出現(xiàn)使得科學(xué)家可以親眼目睹神經(jīng)信號(hào)在神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)之中時(shí)間和空間上的傳遞穿梭。美國(guó)光遺傳鈣成像供應(yīng)商神經(jīng)方面科學(xué)迫切需要一種能夠兼顧全局和微觀的新型鈣成像技術(shù)。
研究顯示NL189BLA神經(jīng)元通過(guò)投射到CEA來(lái)控制探索行為中動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)速度和瞬時(shí)停滯。隨著進(jìn)一步的探索,該神經(jīng)元群體的活性以經(jīng)驗(yàn)依賴性的方式增加,而NL189BLA神經(jīng)元的暫時(shí)性功能喪失會(huì)導(dǎo)致瞬間停滯的yizhi,而且這些行為停滯與焦慮和恐懼無(wú)關(guān)。動(dòng)物在這些停滯點(diǎn)開(kāi)始和終止探索性旅程并在停滯后會(huì)改變頭部朝向和運(yùn)動(dòng)軌跡方向,因此在熟悉的位置進(jìn)行短暫停滯可能是替代性嘗試錯(cuò)誤行為的決策。這些結(jié)果揭示杏仁核作為新穎性/熟悉性檢測(cè)器以及行為效應(yīng)器環(huán)路的共同作用,其具有基于探索行為期間的空間經(jīng)驗(yàn)來(lái)驅(qū)動(dòng)或yizhi自發(fā)運(yùn)動(dòng)的能力,這對(duì)于動(dòng)物在自然界中安全有效的探索未知環(huán)境是十分必要的。
鈣離子通過(guò)參與多種細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)途徑來(lái)調(diào)控絕大多數(shù)類型神經(jīng)元的功能。由于鈣離子信號(hào)在已知的細(xì)胞器結(jié)構(gòu)中發(fā)揮其特定的功能,鈣離子成像顯得尤為重要。在神經(jīng)系統(tǒng)中,由于神經(jīng)元的多樣性,導(dǎo)致鈣離子功能也多樣化。在突觸前膜,鈣內(nèi)流激發(fā)貯存神經(jīng)遞質(zhì)的神經(jīng)小泡向胞外釋放;在突觸后膜,樹(shù)突棘內(nèi)鈣水平瞬間升高,介導(dǎo)了突觸可塑性;在細(xì)胞核內(nèi),鈣信號(hào)能夠調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄。現(xiàn)在常使用的鈣離子指示劑有化學(xué)性鈣離子指示劑(ChemicalIndicators)和基因編碼鈣離子指示劑(GeneticallyEncodedIndicators)兩類。通過(guò)鈣成像技術(shù)檢測(cè)活動(dòng)動(dòng)物記錄神經(jīng)元的活動(dòng)。
科學(xué)家利用鈣成像技術(shù)記錄大腦活動(dòng)。隨著功能光學(xué)成像技術(shù)的發(fā)展,神經(jīng)學(xué)家們已經(jīng)可以研究腦區(qū)和神經(jīng)元內(nèi)部的工作情況。功能鈣成像技術(shù)就是其中之一,其主要原理是將外源性熒光信號(hào)和生理現(xiàn)象耦合起來(lái)——通過(guò)熒光染料信號(hào)的改變反映細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度,以此daibiao細(xì)胞的功能狀態(tài)。目前它被廣泛應(yīng)用于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)一群相關(guān)神經(jīng)元內(nèi)鈣離子的變化,從而判斷其功能活動(dòng)。該技術(shù)的出現(xiàn)使得科學(xué)家可以親眼目睹神經(jīng)信號(hào)在神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)之中時(shí)間和空間上的傳遞穿梭。對(duì)鈣離子的功能研究中,鈣指示劑是必不可少的工具。重慶熒光顯微鈣成像價(jià)位
功能性多神經(jīng)元鈣成像是一種通過(guò)記錄神經(jīng)元內(nèi)Ca2+信號(hào)變化,監(jiān)測(cè)大量神經(jīng)元?jiǎng)幼麟娢坏墓鈱W(xué)記錄技術(shù)。南京細(xì)胞鈣離子鈣成像nVoke
鈣是機(jī)體的組成元素之一。鈣離子作為電流載體維持細(xì)胞內(nèi)外的電化學(xué)梯度,同時(shí)在細(xì)胞的生命活動(dòng)中扮演著重要角色。作為第二信使,鈣參與細(xì)胞周期、細(xì)胞代謝、細(xì)胞分化、壞死、凋亡等等許多重要的生理過(guò)程。細(xì)胞內(nèi)的鈣離子水平通常很低,一般胞漿中的自由鈣約為100nM。胞內(nèi)的鈣可被各種亞細(xì)胞器所貯存,據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道:其中約50%位于細(xì)胞核,30%位于線粒體,14%位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng),5%位于胞膜上,1%位于胞質(zhì)內(nèi),且因?yàn)殁}離子易與磷酸和碳酸復(fù)合物形成不溶物,故游離鈣只占[1]。細(xì)胞可以通過(guò)鈣內(nèi)流、內(nèi)鈣釋放及膜系統(tǒng)上的降鈣蛋白等一整套完整的監(jiān)控系統(tǒng)來(lái)維持細(xì)胞內(nèi)鈣的內(nèi)穩(wěn)狀態(tài)。例如與鈣內(nèi)流相關(guān)的通道例如電壓門控性鈣離子通道VDCC、受體活躍的通道RACC;與內(nèi)鈣釋放相關(guān)的受體如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的IP3受體;以及降鈣相關(guān)的脂膜及線粒體上的主動(dòng)運(yùn)輸?shù)拟}泵系統(tǒng)等等[2]。近20年來(lái)鈣的熒光成像及測(cè)定技術(shù)發(fā)展迅速,出現(xiàn)了各種各樣的鈣熒光指示劑,結(jié)合不斷發(fā)展的顯微成像系統(tǒng),我們可以對(duì)活細(xì)胞的鈣離子進(jìn)行測(cè)定及成像,進(jìn)一步揭示其生理機(jī)制及相關(guān)疾病的發(fā)病機(jī)制。鈣成像的熒光指示劑鈣成像的熒光探針一般均為Ca2螯合劑EGTA,APTRA,BAPTA的衍生物,它們可以結(jié)合鈣離子從而顯示一個(gè)光譜響應(yīng)。南京細(xì)胞鈣離子鈣成像nVoke